專利名稱：銀杏總黃酮的精制方法及制備銀杏達(dá)莫注射液的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種銀杏總黃酮的精制方法及制備銀杏達(dá)莫注射液的方法。
背景技術(shù)：
銀杏總黃酮是一種天然特效藥物原料，從我國(guó)盛產(chǎn)的銀杏葉中提取精制而得，具有很強(qiáng)的降血壓、降血脂、治療腦血栓和心血管疾病，防癌、抗衰老的功能，已廣泛應(yīng)用于藥物、營(yíng)養(yǎng)保健品及高檔化妝品中。
雙嘧達(dá)莫(Dipyridamole)(又名潘生丁、雙嘧哌胺醇、雙嘧啶氨醇、哌醇定、聯(lián)嘧啶氨醇、駢嘧啶氨醇)為一種選抗血小板藥。具有抗血栓形成作用，它可抑制血小板的第一相聚集和第二相聚集。高濃度時(shí)(50ug/ml)可抑制血小板的釋放反應(yīng)。臨床可用于血栓栓塞性疾病。雙嘧達(dá)莫(Dipyridamole)為黃色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭味微苦，在氯仿中易溶，在乙醇中溶解，在丙酮中微溶，在水中幾乎不溶；在稀酸中易溶但不穩(wěn)定。
銀杏達(dá)莫注射液是一種以銀杏總黃酮與雙嘧達(dá)莫配制而成的復(fù)方制劑。現(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有能夠有效提純銀杏總黃酮的方法。市場(chǎng)上也只能買到銀杏總黃酮含量為24％左右的銀杏葉提取物，其余為雜質(zhì)?，F(xiàn)有的銀杏達(dá)莫注射液制備方法都是直接以銀杏葉提取物為原料。在生產(chǎn)過(guò)程中將雙嘧達(dá)莫加入銀杏葉提取物中，溶液立即產(chǎn)生大量難以濾除的沉淀。而且即使將藥液過(guò)濾澄清后，在貯藏過(guò)程中，亦會(huì)慢慢產(chǎn)生沉淀物，使產(chǎn)品的澄清度達(dá)不到要求而成為廢品。
銀杏葉提取物中還含有導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)的大分子物質(zhì)及導(dǎo)致熱原反應(yīng)的細(xì)菌內(nèi)毒素。傳統(tǒng)方法以活性炭吸附細(xì)菌內(nèi)毒素，但這種方法不能除去大分子過(guò)敏物質(zhì)。且同時(shí)活性炭吸附了銀杏總黃酮，降低了有效成份的含量。
由于銀杏總黃酮與雙嘧達(dá)莫均具有明顯的被氧化性，因而在沒(méi)有抗氧劑的條件下即使產(chǎn)品充N2保護(hù)，也會(huì)在較短的時(shí)間內(nèi)顏色加深，含量下降，使產(chǎn)品不合格。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是如何克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，提供一種銀杏總黃酮的精制方法及制備銀杏達(dá)莫注射液的方法。
本發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究發(fā)現(xiàn)銀杏達(dá)莫注射液在現(xiàn)有生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生沉淀的原因銀杏葉提取物中的一部分雜質(zhì)能與雙嘧達(dá)莫發(fā)生沉淀反應(yīng)，尤其是在酸性條件下，而雙嘧達(dá)莫必須在酸性條件下才能溶解。這就導(dǎo)致了在直接以銀杏葉提取物、雙嘧達(dá)莫為原料，生產(chǎn)銀杏達(dá)莫注射液的過(guò)程中，不可避免地會(huì)產(chǎn)生大量難以濾除的沉淀。
基于上述認(rèn)識(shí)，本發(fā)明人將銀杏葉提取物溶解后加入雙嘧達(dá)莫，在酸性條件下加熱，冷藏，使之雜質(zhì)沉淀除去，然后取上清液過(guò)濾，那么這種清液在酸性條件下不再與雙嘧達(dá)莫發(fā)生沉淀。
對(duì)于銀杏葉提取物中的導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)的大分子物質(zhì)及導(dǎo)致熱原反應(yīng)的細(xì)菌內(nèi)毒素，本發(fā)明使用了截留分子量小于一萬(wàn)道爾頓的超濾膜超濾，使銀杏葉提取物溶液中99.9％的大于一萬(wàn)分子量的雜質(zhì)及細(xì)菌內(nèi)毒素被截留于溶液中，而透過(guò)液幾乎沒(méi)有分子量大于一萬(wàn)的物質(zhì)，從而有效地解決了“銀杏達(dá)莫注射液”的過(guò)敏、熱原等重大臨床不良反應(yīng)。
銀杏總黃酮與雙嘧達(dá)莫均具有明顯的被氧化性，因而在沒(méi)有抗氧劑的條件下即使產(chǎn)品充N2保護(hù)，也會(huì)在較短的時(shí)間內(nèi)顏色加深，含量下降，使產(chǎn)品不合格。本發(fā)明加以1‰的NaHSO3作為抗氧劑，有效地解決了上述問(wèn)題。
本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法包括下述步驟一、在銀杏葉提取物中，加入注射用水，加熱并充分?jǐn)嚢柚寥芙?；二、將上述溶液，置于耐酸容器?nèi)，加入雙嘧達(dá)莫、NaHSO3，以鹽酸將溶液PH值調(diào)至3.0-6.5，繼續(xù)加熱至80-100℃；
三、水浴冷卻至室溫，然后置于冷藏柜內(nèi)，0-10℃冷藏12小時(shí)或12個(gè)小時(shí)以上，取沉降后的上清液，以0.45um微孔濾膜為介質(zhì)，板框過(guò)濾；四、將步驟三中所得濾液，用截留分子量為一萬(wàn)道爾頓的超濾器超濾，并將所得超濾液，充分?jǐn)嚢杈鶆?；五、將步驟四所得超濾液以蠕動(dòng)泵輸送至輸液袋中包裝，用高頻熱合機(jī)封口，在108℃下，經(jīng)45分鐘熱壓滅菌。
其特殊之處在于所述雙嘧達(dá)莫、銀杏葉提取物、注射用水的重量比為1-4∶50-100∶800-1000。
利用步驟四中所得超濾液或步驟五中所得銀杏總黃酮溶液制備銀杏達(dá)莫注射液包括下述步驟一、按實(shí)測(cè)含量，取含銀杏總黃酮10.5克的步驟四中所得超濾液或步驟五中所得溶液，加雙嘧達(dá)莫4.2克，NaHSO35克，以注射用水稀釋至10000ml；二、所得溶液經(jīng)0.22um微孔濾膜過(guò)濾，按產(chǎn)品規(guī)格要求分裝，再經(jīng)100℃、45分鐘滅菌，包裝。
以下是對(duì)按照上述方法生產(chǎn)的銀杏達(dá)莫注射液的質(zhì)量穩(wěn)定性的考察情況一、加速試驗(yàn)加速試驗(yàn)的目的是通過(guò)加速藥物的物理化學(xué)變化，探討藥物的穩(wěn)定性，為藥品的使用、包裝、運(yùn)輸及貯存提供必要的依據(jù)，試驗(yàn)方法如下取“銀杏達(dá)莫注射液”5ml規(guī)格(銀杏總黃酮含量為4.5mg-5.5mg，雙嘧達(dá)莫含量為1.8mg-2.2mg)和10ml(銀杏總黃酮含量為9.0mg-11.0mg，雙嘧達(dá)莫含量為3.6mg-4.4mg)規(guī)格各三批，按市售包裝，于溫度為40±2℃、相對(duì)濕度為75±5％的條件下放置6個(gè)月，分別于0、1、2、3、6月末取樣一次，按重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見下表表1“銀杏達(dá)莫注射液”(5ml)加速試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

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表2“銀杏達(dá)莫注射液”(10ml)加速試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，“銀杏達(dá)莫注射液”(5ml規(guī)格和10ml規(guī)格各三批)在溫度為40±2℃、相對(duì)濕度為75±5％條件下放置6個(gè)月，除含量略有下降外，其他質(zhì)量指標(biāo)無(wú)明顯變化，說(shuō)明本品質(zhì)量相當(dāng)穩(wěn)定。
二、長(zhǎng)期試驗(yàn)本試驗(yàn)是為制定藥物的有效期提供依據(jù)，試驗(yàn)方法為取“銀杏達(dá)莫注射液”，市售包裝，于溫度為25±2℃、相對(duì)濕度為60±10％放置12個(gè)月，分別于0、3、6、9、12、18、24、30、36月末取樣測(cè)定，結(jié)果如下表3“銀杏達(dá)莫注射液”(5ml)長(zhǎng)期試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

表4“銀杏達(dá)莫注射液”(10ml)長(zhǎng)期試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，“銀杏達(dá)莫注射液”(5ml規(guī)格和10ml規(guī)格各三批)在溫度為25±2℃、相對(duì)濕度為60±10％的條件下放置18個(gè)月，經(jīng)取樣檢測(cè)，除含量略有下降外，其他質(zhì)量指標(biāo)基本不變，說(shuō)明本品質(zhì)量相當(dāng)穩(wěn)定。長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察仍在繼續(xù)進(jìn)行。
三、考察結(jié)論根據(jù)上述穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果，可以得出如下考察結(jié)論1、加速試驗(yàn)結(jié)果表明“銀杏達(dá)莫注射液”(5ml和10ml各三批)在溫度為40±2℃、相對(duì)濕度為75±5％條件下放置6個(gè)月，含量略有下降，其他質(zhì)量指標(biāo)無(wú)明顯變化，說(shuō)明本品質(zhì)量相當(dāng)穩(wěn)定。
2、長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果表明“銀杏達(dá)莫注射液”(5ml和10ml各三批)在溫度為25±2℃、相對(duì)濕度為60±10％的條件下放置了18個(gè)月，經(jīng)取樣檢測(cè)，含量略有下降，其他質(zhì)量指標(biāo)基本不變，說(shuō)明“銀杏達(dá)莫注射液”質(zhì)量相當(dāng)穩(wěn)定。
3、上述批次的“銀杏達(dá)莫注射液”均為銀杏葉提取物經(jīng)過(guò)新的工藝方法精制后與雙嘧達(dá)莫配合制成注射液的，從試驗(yàn)結(jié)果看，解決了市場(chǎng)上銀杏達(dá)莫注射液長(zhǎng)期存在的顏色變深、澄明度不合格、雙嘧達(dá)莫含量下降嚴(yán)重的問(wèn)題，保證了藥品質(zhì)量，維護(hù)了患者的用藥安全。
綜上所述，本發(fā)明具有下列優(yōu)點(diǎn)①、利用雙嘧達(dá)莫除去銀杏葉提取物中易產(chǎn)生沉淀物的雜質(zhì)，有效解決了產(chǎn)品澄明度問(wèn)題以及貯存過(guò)程中產(chǎn)品緩慢沉淀后澄明度不合格的問(wèn)題。
②、利用分子篩(超濾)技術(shù)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的活性炭，即除去了細(xì)菌內(nèi)毒素，也除去易導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)的大分子物質(zhì)。細(xì)菌內(nèi)毒素截留率達(dá)99.9％，大分子過(guò)敏物質(zhì)被截留除去，而絕大部分銀杏總黃酮被保留下來(lái)，收率超過(guò)95％。
③、加入NaHSO3為抗氧劑，解決了產(chǎn)品易氧化、顏色變深、貯存過(guò)程中有效成份含量下降以及有效期內(nèi)產(chǎn)品含量不合格的問(wèn)題。
本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法填補(bǔ)了現(xiàn)有技術(shù)的空白，以該方法精制的銀杏總黃酮是制備銀杏達(dá)莫注射液及其它銀杏制劑的理想原料；本發(fā)明制備銀杏達(dá)莫注射液的方法是現(xiàn)有銀杏達(dá)莫注射液的理想替代方法。本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法及制備銀杏達(dá)莫注射液的方法分別適用于銀杏總黃酮的精制過(guò)程中和銀杏達(dá)莫注射液的制備過(guò)程中。
具體實(shí)施例方式
下面對(duì)本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法及制備銀杏達(dá)莫注射液的方法分別作進(jìn)一步的說(shuō)明銀杏總黃酮的精制方法實(shí)施方式一本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法，包括下述步驟一、在10Kg銀杏葉提取物中，加入注射用水100L，加熱并充分?jǐn)嚢柚寥芙猓欢?、將上述溶液，置于耐酸容器?nèi)，加入雙嘧達(dá)莫400g、NaHSO3100g，以鹽酸將溶液PH值調(diào)至4.0，繼續(xù)加熱至100℃；三、水浴冷卻至室溫，然后置于冷藏柜內(nèi)，0-10℃冷藏12小時(shí)或12個(gè)小時(shí)以上，取沉降后的上清液，以0.45um微孔濾膜為介質(zhì)，板框過(guò)濾；四、將步驟三中所得濾液，用截留分子量為一萬(wàn)道爾頓的超濾器超濾，并將所得超濾液，充分?jǐn)嚢杈鶆?；五、將步驟四所得超濾液以蠕動(dòng)泵輸送至輸液袋中包裝，用高頻熱合機(jī)封口，在108℃下，經(jīng)45分鐘熱壓滅菌。
實(shí)施方式二本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法，包括下述步驟一、在5Kg銀杏葉提取物中，加入注射用水80L，加熱并充分?jǐn)嚢柚寥芙?；二、將上述溶液，置于耐酸容器?nèi)，加入雙嘧達(dá)莫100g、NaHSO380g，以鹽酸將溶液PH值調(diào)至3.0，繼續(xù)加熱至80℃；三、水浴冷卻至室溫，然后置于冷藏柜內(nèi)，0C冷藏12小時(shí)，取沉降后的上清液，以0.45um微孔濾膜為介質(zhì)，板框過(guò)濾；四、將步驟三中所得濾液，用截留分子量為一萬(wàn)道爾頓的超濾器超濾，并將所得超濾液，充分?jǐn)嚢杈鶆颍晃?、將步驟四所得超濾液以蠕動(dòng)泵輸送至輸液袋中包裝，用高頻熱合機(jī)封口，在108℃下，經(jīng)45分鐘熱壓滅菌。
實(shí)施方式三本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法，包括下述步驟一、在10Kg銀杏葉提取物中，加入注射用水100L，加熱并充分?jǐn)嚢柚寥芙?；二、將上述溶液，置于耐酸容器?nèi)，加入雙嘧達(dá)莫400g、NaHSO3100g，以鹽酸將溶液PH值調(diào)至6.5，繼續(xù)加熱至100℃；三、水浴冷卻至室溫，然后置于冷藏柜內(nèi)，10℃冷藏12個(gè)小時(shí)以上，取沉降后的上清液，以0.45um微孔濾膜為介質(zhì)，板框過(guò)濾；四、將步驟三中所得濾液，用截留分子量為一萬(wàn)道爾頓的超濾器超濾，并將所得超濾液，充分?jǐn)嚢杈鶆颍晃?、將步驟四所得超濾液以蠕動(dòng)泵輸送至輸液袋中包裝，用高頻熱合機(jī)封口，在108℃下，經(jīng)45分鐘熱壓滅菌。
實(shí)施方式四本發(fā)明銀杏總黃酮的精制方法，包括下述步驟一、在7.5Kg銀杏葉提取物中，加入注射用水90L，加熱并充分?jǐn)嚢柚寥芙?；二、將上述溶液，置于耐酸容器?nèi)，加入雙嘧達(dá)莫250g、NaHSO390g，以鹽酸將溶液PH值調(diào)至4.0，繼續(xù)加熱至90℃；三、水浴冷卻至室溫，然后置于冷藏柜內(nèi)，5℃冷藏12個(gè)小時(shí)以上，取沉降后的上清液，以0.45um微孔濾膜為介質(zhì)，板框過(guò)濾；四、將步驟三中所得濾液，用截留分子量為一萬(wàn)道爾頓的超濾器超濾，并將所得超濾液，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?
五、將步驟四所得超濾液以蠕動(dòng)泵輸送至輸液袋中包裝，用高頻熱合機(jī)封口，在108℃下，經(jīng)45分鐘熱壓滅菌。
利用所得超濾液或所得銀杏總黃酮溶液制備銀杏達(dá)莫注射液包括下述步驟一、實(shí)測(cè)含量提取含銀杏總黃酮10.5克的步驟四中所得超濾液或步驟五中所得溶液，加雙嘧達(dá)莫4.2克，NaHSO35克，以注射用水稀釋至10000ml；二、所得溶液經(jīng)0.22um微孔濾膜過(guò)濾，按產(chǎn)品規(guī)格要求分裝，再經(jīng)100℃、45分鐘滅菌，包裝。
所得銀杏總黃酮和銀杏達(dá)莫注射液應(yīng)在常溫下、遮光保存。
權(quán)利要求
1.一種銀杏總黃酮的精制方法，其特征在于包括下述步驟一、在銀杏葉提取物中，加入注射用水，加熱并充分?jǐn)嚢柚寥芙?；二、將上述溶液置于耐酸容器?nèi)，加入雙嘧達(dá)莫、NaHSO3，以鹽酸將溶液PH值調(diào)至3.0-6.5，繼續(xù)加熱至80-100℃；三、水浴冷卻至室溫，然后置于冷藏柜內(nèi)，0-10℃冷藏12小時(shí)或12個(gè)小時(shí)以上，取沉降后的上清液，以0.45um微孔濾膜為介質(zhì)，板框過(guò)濾；四、將步驟三中所得濾液，用截留分子量為一萬(wàn)道爾頓的超濾器超濾，并將所得超濾液，充分?jǐn)嚢杈鶆?；五、將步驟四所得超濾液以蠕動(dòng)泵輸送至輸液袋中包裝，用高頻熱合機(jī)封口，在108℃下，經(jīng)45分鐘熱壓滅菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏總黃酮的精制方法，其特征在于所述雙嘧達(dá)莫、銀杏葉提取物、注射用水的重量比為1-4∶50-100∶800-1000。
3.利用精制后的銀杏總黃酮溶液(步驟四中所得超濾液或步驟五中所得銀杏總黃酮溶液)制備銀杏達(dá)莫注射液的方法包括下述步驟一、按實(shí)測(cè)含量，取含銀杏總黃酮10.5克的步驟四中所得超濾液或步驟五中所得溶液，加雙嘧達(dá)莫4.2克，NaHSO35克，以注射用水稀釋至10000ml；二、將所得溶液經(jīng)0.22um微孔濾膜過(guò)濾，按產(chǎn)品規(guī)格要求分裝，再經(jīng)100℃、45分鐘滅菌，包裝。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種銀杏總黃酮的精制方法及制備銀杏達(dá)莫注射液的方法。現(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有能夠有效提純銀杏總黃酮的方法?，F(xiàn)有的銀杏達(dá)莫注射液制備方法都是直接以銀杏葉提取物為原料。收率低，易變質(zhì)。為此本發(fā)明主要包括將銀杏葉提取物加入雙嘧達(dá)莫并在pH3.0－6.5，溫度100℃的條件下反應(yīng)，低溫沉淀，超濾，滅菌，制得能用于銀杏達(dá)莫注射液的銀杏總黃酮。在銀杏總黃酮精制的過(guò)程中及制備銀杏達(dá)莫注射液的過(guò)程中以NaHSO
文檔編號(hào)A61P7/00GK1919219SQ20051003677
公開日2007年2月28日 申請(qǐng)日期2005年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月26日
發(fā)明者蔡南桂 申請(qǐng)人:蔡南桂