專利名稱：一種治療病毒性肝炎的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療乙肝和各種病毒性肝炎的藥物組合物，還涉及以該組合物制備的藥劑及其生產(chǎn)工藝，本發(fā)明藥物的原料為植物中草藥，屬于中藥領(lǐng)域。
乙肝是我國(guó)發(fā)病率最高、傳播最廣、危害最大的一種流行性傳染病。我國(guó)乙肝病毒攜帶者超過(guò)1.5億人。全國(guó)現(xiàn)有肝病患者1200萬(wàn)人。每年因肝病死亡數(shù)約30萬(wàn)，這給人民健康和國(guó)民經(jīng)濟(jì)帶來(lái)了極大的損失。
就目前醫(yī)學(xué)發(fā)展?fàn)顩r來(lái)看，治療乙肝及其病毒攜帶者尚無(wú)特效的藥物和療法。即便是被國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的抗病毒藥物干擾素，由于其昂貴的藥價(jià)，不能被大多數(shù)病人所接受，況且其療效也不盡人意。據(jù)有關(guān)學(xué)者報(bào)導(dǎo)，該療法有效率僅為43％。停藥后，e抗原陰轉(zhuǎn)及肝功能仍會(huì)出現(xiàn)反跳。盡管目前用于治療肝炎的藥物很多，但由于不同患者的病情不同，這些藥物不能滿足所有類型肝炎患者的需求，有的療效不確切，甚至出現(xiàn)較大的毒副作用。到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)有與本發(fā)明藥物相同的產(chǎn)品。
本發(fā)明目的是提供一種廣譜的抗病毒藥物，用于治療乙肝和各種病毒性肝炎。
本發(fā)明藥物組合物的組成原則是涼血清熱、舒肝解郁、健脾益氣。根據(jù)這一治則組方選藥，以發(fā)揮抑制乙肝病毒復(fù)制的作用。五臟應(yīng)當(dāng)以通為順，藥物舒肝解郁，以保證肝膽正常生理代謝，排出免疫復(fù)合物，結(jié)合健脾益氣以扶正氣，達(dá)到增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、誘生干擾素以治療乙肝的目的。
本發(fā)明藥物組合物的組成按重量份計(jì)如下紫草 15-30份射干 15-20份桑寄生 30-50份黃芩 12-20份地榆 15-20份夏枯草20-30份龍膽草 8-12份郁金 15-20份姜黃 10-15份柴胡 10-14份訶子8-12份丹皮 12-15份薏苡仁 20-40份焦山楂15-30份黃芪 30-90份黃柏 10-20份上述藥物組合物各組份優(yōu)選重量配比范圍是紫草 10-15份射干 10-15份桑寄生 20-40份黃芩 10-15份地榆 10-15份夏枯草10-20份龍膽草 6-10份郁金 10-15份姜黃8-12份柴胡 8-12份訶子8-10份丹皮 8-12份薏苡仁 15-30份焦山楂10-15份黃芪 30-60份黃柏 8-15份本發(fā)明的上述藥物組合物，按照常規(guī)制藥工藝，可以制備成任何一種適合于臨床使用的藥物劑型，該藥劑當(dāng)中應(yīng)多含有治療有效果的藥物組份，這對(duì)于本領(lǐng)域中的制藥人員來(lái)說(shuō)，屬于一般性的常識(shí)，本發(fā)明藥物優(yōu)選膠囊劑型。
本發(fā)明藥物膠囊劑的制備工藝如下1、按上述配料組成精選中藥材，將薏苡仁炒黃、山楂炒焦為度。
2、將郁金、姜黃飲片，用水蒸氣蒸餾法收取揮發(fā)油。
3、蒸餾后之藥渣與其余中藥材合并，按常規(guī)煎法煎煮兩次，首次按藥物總量加水五倍，水煎一小時(shí)，取煎液，再將藥渣加入兩倍水，煎煮30分鐘，棄去藥渣，合并兩次煎液。
4、將合并的藥液用離心沉降法沉降后除去雜質(zhì)。最好用藍(lán)式離心機(jī)或三足離心機(jī)進(jìn)行離心。
5、再用板框壓濾機(jī)過(guò)濾，更換濾材，連續(xù)操作，最后將得到的澄清濾液，濃縮成浸膏粉。
6、將浸膏粉粉碎，把揮發(fā)油均勻噴撒在浸膏粉上，充分?jǐn)嚢?，制粒，裝膠囊，每粒膠囊裝藥0.3克。
本操作步驟必須在室溫零度以下進(jìn)行。
本發(fā)明藥物能涼血清熱、疏肝解郁、健脾益氣。用于乙肝病毒攜帶者和急慢性乙型肝炎，療效顯著，服藥四至六個(gè)月，e抗原及HBV DNA轉(zhuǎn)陰率可達(dá)60-80％，半年至一年后復(fù)查，均未出現(xiàn)反跳。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明藥物用藥1月在鴨體內(nèi)有一定的抗鴨乙型肝炎病毒的作用。本發(fā)明藥物既有良好的抗乙肝病毒的作用，又能保肝、降酶、退黃和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。
實(shí)驗(yàn)例本發(fā)明藥物抗鴨乙型肝炎病毒的實(shí)驗(yàn)研究(一)材料與方法一、動(dòng)物模型采用健康成年的重慶麻鴨產(chǎn)的蛋孵化的1日齡雛鴨，經(jīng)腹腔接種0.1ml DHBVDNA陽(yáng)性病毒血清。接種1周后，分別頸外靜脈抽血，用地高辛標(biāo)記的DHBV DNA探針(標(biāo)記藥盒購(gòu)于德國(guó)Boehringer Mannheim公司)經(jīng)斑點(diǎn)雜交檢測(cè)篩選出感染陽(yáng)性鴨，飼養(yǎng)至1月齡作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
二、實(shí)驗(yàn)分組及用藥將DHBV DNA陽(yáng)性的1月齡鴨53只隨機(jī)分為5組1、病毒對(duì)照組用生理鹽水，腹腔注射，劑量為0.1ml/只/日。
2、陽(yáng)性藥物對(duì)照組用阿昔洛韋(湖北潛江市制藥廠出品，批號(hào)9605074)每日腹腔注射1次，劑量為100mg/kg/日。
3、本發(fā)明藥物膠囊小劑量組劑量為10g/kg/日。
4、本發(fā)明藥物膠囊中劑量組劑量為20g/kg/日。
5、本發(fā)明藥物膠囊大劑量組劑量為30g/kg/日。
給藥方式是每日清晨空服灌服、實(shí)驗(yàn)用藥時(shí)間為1月。
三、觀察指標(biāo)1、血清DHBV DNA改變情況于用藥前、用藥2周、用藥1月，停藥1周分別頸外靜脈抽血，分離血清于-20℃保存待檢。采用斑點(diǎn)雜交法，用地高辛探針將用藥前后的血清統(tǒng)一對(duì)比檢測(cè)，以與探針同源的質(zhì)粒DNA倍比稀釋后點(diǎn)樣于硝酸纖維薄膜上雜交顯示的斑點(diǎn)顏色涂淺為標(biāo)準(zhǔn)，與待檢血清斑點(diǎn)雜交斑點(diǎn)顏色深淺比較來(lái)半定量。
2、于停藥后1周將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別剖殺，各取小塊肝組織固定于10％甲醛溶液，作常規(guī)HE染色病理檢查。其余肝臟冰筒運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，-70℃保存，以供提取鴨肝的總DNA，作Southern Blot檢測(cè)，分析藥物對(duì)病毒DNA復(fù)制的作用。
3、各組于用藥1月、停藥1周分別抽血檢測(cè)鴨血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALT及AST)的變化情況。
結(jié)果一、用藥前、中、后血清DBBV DNA滴度改變情況除病毒對(duì)照組、膠囊小劑量組外，陽(yáng)性藥物對(duì)照組，膠囊中、大劑量組用藥1月分別與同組用藥前比較，均有DHBV DNA滴度總體水平降低其中阿昔洛韋用藥1月血清DBBV DNA滴度比同組藥前血清DHBV DNA滴度的差別在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有極顯著意義(P＜0.01)；中、大劑量膠囊組用藥1月比同組用藥前DNA滴度的差別在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義(P＜0.05)；大劑量組用藥2周后DNA滴度較同組用藥前DNA滴度也有顯著性差別(P＜0.05)。但停藥1周后各用藥組均有DHBV DNA回升現(xiàn)象。見(jiàn)表1。此外，有部份鴨用藥后血清DHBV DNA滴度轉(zhuǎn)陰，見(jiàn)表2及附表1～5。
表1 用藥前后血清DHBV DNA滴度改變情況(X±SH)logDHBV DNA(Pg/ul)±SD組別 例數(shù)(只)用藥前 用藥2周 用藥1月 停藥1周病毒對(duì)照組 10 2.00±1.25 2.20±0.92 1.90±0.74 1.90±0.74陽(yáng)性藥對(duì)照組 10 1.80±1.03 1.30±1.25 1.00±1.05** 1.80±1.62膠囊小劑量組 10 2.00±1.25 2.20±1.23 2.30±1.42 2.40±0.97膠囊中劑量組 12 2.00±1.05 2.00±1.35 1.25±1.36* 1.33±0.98膠囊大劑量組 11 2.36±1.12 1.82±0.98* 1.55±1.64* 2.18±1.40注“*”P(pán)＜0.05 “**”P(pán)＜0.01各組每只鴨用藥前后血清DHBV DNA滴度改變情況見(jiàn)附表1～5，其中“++++”；10.000pg/ul；“+++”1000pg/ul；“++”100pg/ul；“+”10pg/ul；“-”＜1pg/ul；上表所列為各組DNA滴度的對(duì)數(shù)平均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)差，統(tǒng)計(jì)學(xué)采用配對(duì)t檢驗(yàn)。
表2 用藥2周、1月及停藥1周血清DHBV DNA陰轉(zhuǎn)率組別用藥2周 用藥1月 停藥1周病毒對(duì)照組 0.00(0/10) 0.00(0/10)0.00(0/10)陽(yáng)性藥對(duì)照組 30.00(3/10) 40.00(4/10) 30.00(3/10)膠囊小劑量組 0.00(0/10) 10.00(1/10) 0.00(0/10)膠囊中劑量組 8.33(1/12) 25.00(3/12) 16.70(2/12)膠囊大劑量組 0.00(0/11) 36.36(4/11) 18.18(2/11)二、肝臟HE染色病理檢查各組均有不同程度肝細(xì)胞空泡變性、腫脹，部分可見(jiàn)匯管區(qū)及小葉間隔炎病細(xì)胞浸潤(rùn)，末見(jiàn)各實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞壞死與增生現(xiàn)象，這些病理表現(xiàn)用藥組與對(duì)照組無(wú)明顯差異。
三、肝組織Southern Blot檢測(cè)中、大劑量膠囊用藥1月肝組織中DHBV DNA比病毒對(duì)照組(生理鹽水組)有普遍降低，但松弛環(huán)狀DNA(RC)、共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(CCC DNA或SC DNA)降低不明顯。
四、用藥1月、停藥1周血清轉(zhuǎn)氨酶改變情況各實(shí)驗(yàn)組谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)值見(jiàn)表3，各組間有一時(shí)相內(nèi)ALT及AST比較統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著性差異。
表3 用藥1月、停藥1周血清ALT AST改變情況(酶活力單位X±SD)ALT AST組別用藥1月 停藥1周 用藥1月 停藥1周病毒對(duì)照組 12.33±3.67 18.89±3.18 10.00±3.06 20.86±6.91陽(yáng)性藥對(duì)照組 10.50±3.34 19.09±6.16 12.20±1.99 22.89±6.79膠囊小劑量組 13.14±4.60 24.60±8.22 10.40±3.10 28.33±7.42膠囊中劑量組 12.67±3.93 25.50±7.63 12.67±2.46 24.40±5.95膠囊大劑量組 10.86±3.98 17.82±4.33 12.72±2.87 22.80±7.56另我們同時(shí)對(duì)照檢測(cè)了10只與各用藥組相同鴨齡的正常未接種病毒血清鴨的ALT、AST，分別為ALT(28.00±8.94，23.78±6.59)；AST(18.00±5.29，19.00±5.86)。
用DHBV感染鴨用為乙型肝炎動(dòng)物模型來(lái)研究人類乙型肝炎發(fā)病機(jī)理、病毒復(fù)制過(guò)程及篩選有效的治療藥物，已為國(guó)內(nèi)外學(xué)者所公認(rèn)。1-3日齡雛鴨感染DHBV可維持長(zhǎng)期病毒血癥而無(wú)明顯的自然轉(zhuǎn)陰現(xiàn)象，因此，我們應(yīng)用1日齡雛鴨經(jīng)腹腔感染DHBV的方法來(lái)建立鴨乙型肝炎動(dòng)物模型進(jìn)行本發(fā)明藥物抗病毒作用的考核，為治療肝炎病人提供臨床前研究資料。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用中劑量本發(fā)明藥物治療1月及大劑量本發(fā)明藥物治療2周、1月都能使血清DHBV DNA滴度總體水平降低,停藥1周后均有DNA滴度總體水平回升現(xiàn)象，說(shuō)明該藥物在體內(nèi)有一定的抗病毒作用且與劑量大小、用藥時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān),若要達(dá)到較滿意的遠(yuǎn)期抑制病毒的效果還需延長(zhǎng)用藥時(shí)間。
由于鴨乙肝動(dòng)物模型自身的特點(diǎn)。即3日齡內(nèi)雛鴨由于免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善，在感染DHBV后，僅出現(xiàn)單純的病毒攜帶狀態(tài),而肝臟組織病變輕微，肝功能無(wú)明顯異常，我們有實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)各實(shí)驗(yàn)組ALT、AST無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異，雖不能證實(shí)本發(fā)明藥物有改善肝功能的效果，但可以說(shuō)明該藥在這三種劑量下連續(xù)用藥1月對(duì)肝組織無(wú)明顯的毒性損害。
Southern Blot檢查提示用藥1月,本發(fā)明藥物有一定的抑制肝內(nèi)DBBV DNA的作用，但不能清除GCC DNA及RC DNA，這也是停藥后血清DHBV DNA回升的原因。
實(shí)施例紫草 10克射干 10克桑寄生 20克黃芩 10克地榆 10克夏枯草 10克龍膽草 6克郁金 10克姜黃8克柴胡8克訶子8克丹皮8克薏苡仁 15克焦山楂 10克黃芪 30克黃柏8克將郁金、姜黃飲片，用水蒸汽蒸餾法收取揮發(fā)油。蒸餾后之藥渣與其余中藥材合并，按常規(guī)煎煮法共煎兩次，首次按藥物總量加水五倍，水煎1小時(shí)，取蒸液。再將藥渣加入兩倍水煎30分鐘，棄去藥渣，合并兩次煎液，離心沉淀，除去雜質(zhì)。板框過(guò)濾，將濾液濃縮成浸膏粉，粉碎，把揮發(fā)油均勻噴撒在浸膏粉上，充分?jǐn)嚢?，制粒，裝膠囊，每粒膠囊裝0.3克藥粉。
權(quán)利要求
1.一種治療肝炎的藥物組合物，其特征在于它由下列重量份的組份組成紫草 15-30份射干 15-20份桑寄生 30-50份黃芩 12-20份地榆 15-20份夏枯草 20-30份龍膽草 8-12份郁金 15-20份姜黃 10-15份柴胡 10-14份訶子8-12份丹皮 12-15份薏苡仁 20-40份焦山楂 15-30份黃芪 30-90份黃柏 10-20份
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于各組份的重量比為紫草 10-15份射干 10-15份桑寄生 20-40份黃芩 10-15份地榆 10-15份夏枯草 10-20份龍膽草 6-10份郁金 10-15份姜黃8-12份柴胡8-12份訶子8-10份丹皮8-12份薏苡仁 15-30份焦山楂 10-15份黃芪 30-60份黃柏8-15份
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物制備膠囊劑的方法，其特征在于該方法包括先將郁金、姜黃用水蒸汽蒸餾法收取揮發(fā)油，然后將蒸餾后藥渣與其余中藥材合并，加水煎煮兩次，第一次加水五倍，煎1小時(shí)，第二次加水兩倍，煎30分鐘，合并兩次煎液，過(guò)濾，除去雜質(zhì)，將澄清液濃縮成干膏，粉碎，把揮發(fā)油均勻噴撒在浸膏粉上，充分?jǐn)嚢?，制粒。裝膠囊，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療病毒性肝炎的藥物組合物,其組成是紫草、射干、桑寄生、黃芩、地榆、夏枯草、龍膽草、郁金、姜黃、柴胡、訶子、丹皮、薏苡仁、焦山楂、黃芪、黃柏。該藥物膠囊劑既能抗乙肝病毒,又能保肝、降酶、退黃和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1182616SQ9712017
公開(kāi)日1998年5月27日 申請(qǐng)日期1997年11月18日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月18日
發(fā)明者付強(qiáng), 何雪銀, 付巍, 付東, 付春麗 申請(qǐng)人:付強(qiáng)