專(zhuān)利名稱(chēng)：桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及桔?？傇碥赵谒幬镏械膽?yīng)用。
背景技術(shù)：
桔梗為桔?？浦参锝酃latycodon grandiflorum(Jacq. )A. DC.的根，是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，藥用歷史悠久，應(yīng)用廣泛。其味苦、辛，性平。主歸肺經(jīng)。具有宣肺化痰，利咽，排膿的功效，臨床主要用于咳嗽痰多，胸悶不暢，咽痛音 ，肺癰吐膿等癥的治療。桔梗的現(xiàn)代研究始于20世紀(jì)40年代，其主要有效成分為齊墩果酸型五環(huán)三萜皂苷。國(guó)內(nèi)外研究學(xué)者先后發(fā)現(xiàn)桔?？傇碥站哂锌寡趸⒖寡祖?zhèn)痛、祛痰鎮(zhèn)咳、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用，而關(guān)于其抗肺炎支原體作用的研究目前尚未見(jiàn)報(bào)道。肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniea,MP)是引起非典型肺炎的主要病原體之一， 也是呼吸道感染常見(jiàn)的病原體。MP引起的支原體肺炎約占肺炎發(fā)病率的22%，居非典型肺炎首位，且近年來(lái)發(fā)病率呈逐年遞增的趨勢(shì)。MP感染人群以?xún)和癁橹?，臨床表現(xiàn)多種多樣， 可引起呼吸系統(tǒng)輕癥感染，亦可引起嚴(yán)重的爆發(fā)性肺炎導(dǎo)致死亡。此外，MP感染尚可引起多系統(tǒng)、多器官的肺外并發(fā)癥，如腦膜炎、心包炎、心肌炎、免疫性溶血性貧血等。MP亦可感染羊、牛、豬、雞等家畜，引起動(dòng)物肺炎等疾病。對(duì)于群養(yǎng)家畜，MP可在種群內(nèi)、外迅速傳播、爆發(fā)，導(dǎo)致家畜大量死亡，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前臨床對(duì)于MP感染的治療主要以抗生素為主。MP沒(méi)有細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌素天然耐藥，而四環(huán)素類(lèi)、氨基糖甙類(lèi)較大的毒副作用不適合生長(zhǎng)發(fā)育期的青少年使用，故臨床常以大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)為首選抗MP治療藥物。但大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗菌素應(yīng)用時(shí)可引起惡心、嘔吐、黃疸、轉(zhuǎn)氨酶增高等副作用，同時(shí)由于MP易引起反復(fù)感染及抗生素的不規(guī)范使用，結(jié)果導(dǎo)致近年來(lái)MP耐藥菌株感染率逐年增加。而耐藥菌株的不斷增加又導(dǎo)致臨床抗感染治療不徹底，一但機(jī)體免疫力低下又引起復(fù)發(fā)，形成惡性循環(huán)。因此，有必要從中藥著手， 探索具有抗肺炎支原體作用的藥物，以避免抗生素引起的不良反應(yīng)及耐藥性。在家畜MP感染治療上，由于MP感染治療療程較長(zhǎng)(約需2周)，長(zhǎng)期服用抗菌素會(huì)使其在動(dòng)物體內(nèi)大量積蓄，導(dǎo)致動(dòng)物肌肉、脂肪、內(nèi)臟等組織及副產(chǎn)品奶、蛋等中抗菌素含量超標(biāo)，直接影響經(jīng)濟(jì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用。桔梗總皂苷在治療和預(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔梗總皂苷為桔梗酸類(lèi)、遠(yuǎn)志酸類(lèi)、 桔梗二酸類(lèi)、桔梗酸A內(nèi)酯類(lèi)皂苷中的一種或幾種的組合物。桔梗作為藥食同源植物，其市場(chǎng)需求量極大，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了其新的藥理活性，將進(jìn)一步擴(kuò)大其藥用范圍及市場(chǎng)需求。同時(shí)本發(fā)明將打破支原體肺炎治療市場(chǎng)抗生素的壟斷局面，避免了抗生素對(duì)人體的毒副作用及耐藥性。本發(fā)明桔梗總皂苷在治療和預(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用中，桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，發(fā)現(xiàn)具有抗肺炎支原體作用；體外試驗(yàn)表明，其抗MP的MIC值為16-64 μ g/ml ；MBC為64-1 μ g/ml ；體內(nèi)試驗(yàn)證明， BALB/C小鼠經(jīng)滴鼻感染MP后，分別灌胃8mg/Kg和16mg/Kg桔?？傇碥?0天后，均可明顯減輕小鼠肺臟的病理?yè)p害，調(diào)解機(jī)體免疫功能，對(duì)MP感染具有治療作用。本發(fā)明中桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分， 將桔?？傇碥罩苽涑沙Ｒ?guī)劑型后，對(duì)MP引起的感染性疾病是有效的；本發(fā)明中桔?？傇碥兆鳛轱暳咸砑觿┗蛑委熕幬铮瓤煞乐渭倚驧P感染，又避免了抗菌素超標(biāo)問(wèn)題。


圖1為具體實(shí)施方式
一中桔梗總皂苷體外抗MP時(shí)效曲線(xiàn)圖，其中 表示MBC，·表示MIC，▲表示1/2MIC，X表示空白；圖2為具體實(shí)施方式
一中小鼠肺臟病理組織學(xué)實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照組的病變情況圖；圖3為具體實(shí)施方式
一中小鼠肺臟病理組織學(xué)實(shí)驗(yàn)中模型對(duì)照組的病變情況圖；圖4為具體實(shí)施方式
一中小鼠肺臟病理組織學(xué)實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照藥組的病變情況圖；圖5為具體實(shí)施方式
一中小鼠肺臟病理組織學(xué)實(shí)驗(yàn)中桔梗高劑量組的病變情況圖；圖6為具體實(shí)施方式
一中小鼠肺臟病理組織學(xué)實(shí)驗(yàn)中桔梗低劑量組的病變情況圖。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔?？傇碥諡榻酃Ｋ犷?lèi)、遠(yuǎn)志酸類(lèi)、桔梗二酸類(lèi)、桔梗酸A內(nèi)酯類(lèi)皂苷中的一種或幾種的組合物。桔?？傇碥諡閮煞N或兩種以上物質(zhì)組成時(shí)按任意比混合。桔?？傇碥阵w外抗MP試驗(yàn)如下1實(shí)驗(yàn)材料肺炎支原體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株(ATCCFH15531)，購(gòu)自美國(guó)菌種保藏中心。桔?？傇碥?，實(shí)驗(yàn)室提取，提取物總皂苷含量在80%以上。PPLO培養(yǎng)基、96孔板、加樣器、恒溫培養(yǎng)箱。2方法和結(jié)果2. 1桔?？傇碥盏奶崛〖昂繙y(cè)定2. 1. 1桔梗總皂苷的提取a、取桔梗飲片(市售)，加8倍體積75%乙醇，加熱回流提取3次，每次池，濾過(guò)，合并濾液；b、濾液減壓回收乙醇至稠膏狀，得桔梗提取物；C、再將桔梗提取物加生藥量10倍量的水溶解，上于AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，依次以4倍柱體積的水、20%、30%、40%、50%乙醇洗脫，合并40%、50%乙醇洗脫液，減壓回收至無(wú)醇味，即得桔梗有效部位；d、將該桔梗有效部位以水溶解，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次，棄萃取液，再用水飽和正丁醇萃取5 次，合并正丁醇液，減壓回收，蒸干，即得桔?？傇碥铡?br> 2. 2桔?？傇碥盏暮繙y(cè)定2. 2. 1對(duì)照品溶液的制備稱(chēng)取經(jīng)60°C減壓干燥至恒重的桔梗皂苷D8. OOmg, M 70 %甲醇適量溶解，置50mL容量瓶中，用70 %甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2. 2. 2供試品溶液的制備稱(chēng)取桔?？傇碥?. Omg,加70%甲醇適量溶解，置IOmL 容量瓶中，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2. 2. 3檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇量取對(duì)照品溶液1. 5mL及供試品溶液lmL，于70°C水浴蒸發(fā)至干，加入5%香草醛-冰醋酸(臨用新配)0. 20mL,高氯酸0. 80mL,于60°C水浴顯色 15min后冰水冷卻lOmin。加入冰醋酸5mL，搖勻。立即在紫外分光光度計(jì)下與400 800nm 波長(zhǎng)下掃描，同時(shí)以空白溶液作參比。結(jié)果，對(duì)照品及供試品的最大吸收波長(zhǎng)均在475nm，故選擇475nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。2. 2. 4線(xiàn)性關(guān)系考察量取對(duì)照品溶液0. 6,1. 5,2. 4,3. 3,4. 2mL,置具塞試管中， 于70°C水浴蒸發(fā)至干，加入5%香草醛-冰醋酸(臨用新配)0. 20mL，高氯酸0. 80mL，于60°C 水浴顯色15min后冰水冷卻lOmin。各加入冰醋酸5mL，搖勻，以同法平行處理的空白溶劑為空白，在475nm處測(cè)定吸光度。結(jié)果見(jiàn)表1。表1吸光度A與對(duì)照品質(zhì)量C (mg)的關(guān)系
權(quán)利要求
1.桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用桔梗總皂苷作為治療和預(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔?？傇碥諡榻酃Ｋ犷?lèi)、遠(yuǎn)志酸類(lèi)、桔梗二酸類(lèi)、桔梗酸A內(nèi)酯類(lèi)皂苷中的一種或幾種的組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔梗總皂苷片劑的制備如下一、 稱(chēng)取50g桔梗總皂苷、IOOg淀粉、50g糊精、20g微晶纖維素、40ml體積濃度為80%的乙醇溶液和8g羧甲基淀粉鈉；二、稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的淀粉、糊精、微晶纖維素和5g羧甲基淀粉鈉混合，再加入稱(chēng)取的乙醇溶液，混合后制成軟材，經(jīng)制顆、干燥和整粒后加入余量的羧甲基淀粉鈉混勻，然后壓片，包薄膜衣，干燥即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔梗總皂苷膠囊劑的制備如下 一、稱(chēng)取50g桔梗總皂苷、IOOg淀粉、50g糊精、30ml體積濃度為80 %的乙醇溶液和IOg微粉硅膠；二、稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的淀粉和糊精混合，再加入稱(chēng)取的乙醇溶液，混合后制成軟材，經(jīng)制顆、干燥和整粒后加入稱(chēng)取的微粉硅膠混勻，裝入膠囊即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔梗總皂苷采用口服給藥，口服給藥所用桔?？傇碥疹w粒劑的制備如下 一、稱(chēng)取50g桔?？傇碥?、800g蔗糖、IOOg糊精和180ml體積濃度為80%的乙醇溶液；二、 稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的蔗糖和糊精混合，再加入稱(chēng)取的乙醇溶液，混合后制成軟材，經(jīng)制顆、干燥和整粒后即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔梗總皂苷在治療和預(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥瘴⑼鑴┑闹苽淙缦?一、稱(chēng)取IOOg桔?？傇碥铡?00g糊精和50g淀粉；二、稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的糊精混合，再加入稱(chēng)取的淀粉，混勻制得藥丸坯料，然后再制丸機(jī)中制成中藥微丸， 干燥，整粒，包薄膜衣，干燥即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥哲浤z囊劑的制備如下 一、稱(chēng)取IOOg桔?？傇碥蘸?00g大豆油；二、稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的大豆油混合，用膠體磨研細(xì)，制成軟膠囊1000粒，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥湛诜旱闹苽淙缦?一、稱(chēng)取15g桔梗總皂苷、3g苯甲酸鈉和Ig甜蜜素；二、稱(chēng)取的桔梗總皂苷過(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的苯甲酸鈉和甜蜜素混合，加水至1000ml，攪勻，灌裝，滅菌，即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔梗總皂苷采用粘膜給藥，粘膜給藥所用桔?？傇碥账▌┑闹苽淙缦乱?、 稱(chēng)取150g桔?？傇碥铡?50g聚乙二醇600和IOOOg聚乙二醇PEG6000 ；二、稱(chēng)取的桔梗總皂苷過(guò)100目篩，然后與50°C熔融的聚乙二醇600、聚乙二醇PEG6000混合，澆膜，冷卻，制成 1000粒，即得。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎煤粑澜o藥，呼吸道給藥所用桔梗總皂苷噴霧劑的制備如下一、稱(chēng)取15g桔?？傇碥?、0. 5g阿斯巴甜、Ig薄荷香精和0. 5g對(duì)羥基苯甲酸乙酯；二、稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與稱(chēng)取的阿斯巴甜、薄荷香精及對(duì)羥基苯甲酸乙酯混合， 加純化水至1000ml，搖勻，濾過(guò)，分裝至噴霧瓶中，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于桔?？傇碥詹捎米⑸浣o藥，注射給藥所用注射用桔?？傇碥諆龈煞鄣闹苽淙缦乱?、稱(chēng)取5g桔?？傇碥?；二、稱(chēng)取的桔?？傇碥者^(guò)100目篩，然后與950ml水混合，調(diào)節(jié)pH值至7. 0，濾過(guò)，再加注射用水至1000ml，滅菌，冷藏，濾過(guò)，濃縮，冷凍干燥，制成粉末， 分裝，即得。
全文摘要
桔?？傇碥赵谥委熀皖A(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應(yīng)用，它涉及桔?？傇碥赵谒幬镏械膽?yīng)用。應(yīng)用桔梗總皂苷作為治療和預(yù)防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔梗總皂苷為桔梗酸類(lèi)、遠(yuǎn)志酸類(lèi)、桔梗二酸類(lèi)、桔梗酸A內(nèi)酯類(lèi)皂苷中的一種或幾種的組合物。本發(fā)明中桔?？傇碥站哂锌狗窝字гw作用；體外試驗(yàn)表明，其抗MP的MIC值為16-64μg/ml；MBC為64-128μg/ml；體內(nèi)試驗(yàn)證明，BALB/C小鼠經(jīng)滴鼻感染MP后，分別灌胃8mg/Kg和16mg/Kg桔?？傇碥?0天后，均可明顯減輕小鼠肺臟的病理?yè)p害，調(diào)解機(jī)體免疫功能，對(duì)MP感染具有治療作用。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102274264SQ20111022578
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月8日
發(fā)明者姚琳, 張俊威, 王偉明, 王昶, 許慶瑞, 譚思思, 高菲 申請(qǐng)人:黑龍江省中醫(yī)研究院