專利名稱：治療癡呆癥的石菖蒲提取物及其提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，特別是涉及一種治療癡呆癥的石菖蒲提取物及其提取方法。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默病即所謂的老年癡呆癥。是一種進(jìn)行性發(fā)展的致死性神經(jīng)退行性疾病，臨床表現(xiàn)為認(rèn)知和記憶功能不斷惡化，日常生活能力進(jìn)行性減退，并有各種神經(jīng)精神癥狀和行為障礙。據(jù)中國(guó)阿爾茨海默病協(xié)會(huì)2011年的公布調(diào)查結(jié)果顯示，全球有約3650萬(wàn)人患有癡呆癥，每七秒就有一個(gè)人患上此病，平均生存期只有5. 9年，是 威脅老人健康的“四大殺手”之一。老年癡呆根據(jù)其病因主要分為腦變性疾病引起的癡呆——阿爾茨海默病性癡呆(又叫老年性癡呆，Alzheimer’ s Disease，簡(jiǎn)稱AD)、腦血管病引起的癡呆(血管性癡呆，Vascular Dentia,簡(jiǎn)稱VaD)、混合性癡呆(Mixed Dementia,簡(jiǎn)稱MixD)三大類。其次還包括路易小體癡呆(Dementia with Lewy Bodies,簡(jiǎn)稱DLB),額顳葉癡呆(Frontotemporal Dementia,簡(jiǎn)稱 FTD),帕金森病性癡呆(Parkinson，s Disease,簡(jiǎn)稱H))，克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病癡呆(Creutzfeldt-Jakob Disease，簡(jiǎn)稱CJD)，正常顱壓腦積水性癡呆(Normal Pressure Hydrocephalus,簡(jiǎn)稱NPH),韋-科二氏綜合征癡呆(ffernicke-Korsakoff Syndrome,簡(jiǎn)稱WKS),由維生素B12、葉酸缺乏所致的癡呆等。老年癡呆癥多起病于老年期，潛隱起病，病程緩慢且不可逆，臨床上以智能損害為主。病理改變主要為皮質(zhì)彌漫性萎縮，溝回增寬，腦室擴(kuò)大，神經(jīng)元大量減少，并可見(jiàn)老年斑，神經(jīng)原纖維結(jié)等病變，膽堿乙?；讣耙阴Ｄ憠A含量顯著減少。起病在65歲以前者舊稱老年病前期癡呆，或早老性癡呆，多有同病家族史，病情發(fā)展較快，顳葉及頂葉病變較顯著，常有失語(yǔ)和失用。65歲以上發(fā)病者稱晚發(fā)型癡呆，多為散發(fā)，病變發(fā)展較慢，研究發(fā)現(xiàn)，除了發(fā)病年齡早晚有區(qū)別外，它們?cè)谂R床癥狀和腦病理改變方面明顯不同。目前治療老年癡呆的藥物主要有膽堿酯酶抑制劑，腦血管擴(kuò)張藥，鈣拮抗藥，防止Αβ沉積藥，α-分泌酶激動(dòng)劑、分泌酶抑制劑、Y-分泌酶抑制劑和調(diào)控劑等。這些藥物絕大多數(shù)為化學(xué)合成藥物或肽類藥物，由于一些化學(xué)合成藥物在長(zhǎng)期服用過(guò)程中存在的毒副作用，肽類藥物存在的口服生物利用度低、在體內(nèi)易被水解、選擇性不強(qiáng)、分子質(zhì)量較大而不易通過(guò)血腦屏障等缺點(diǎn)，使得它們的研究面臨著巨大的挑戰(zhàn)。這為開(kāi)展從天然產(chǎn)物和中草藥中發(fā)掘具有抗老年性癡呆活性的藥物研究提供了一個(gè)很好的機(jī)會(huì)。如從中草藥蛇足石杉中分離所得到的天然產(chǎn)物石杉?jí)A甲(huperzine A)和從石蒜中提取的加蘭他敏均是膽堿酯酶的可逆抑制劑，有確切的治療效果，具有選擇性高、毒性低和藥效時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，是目前為止國(guó)際上治療老年癡呆較為理想的候選藥物。另外，研究表明Y-分泌酶是決定老年斑形成的關(guān)鍵因素，因此現(xiàn)在的研究多集中于Y -分泌酶抑制劑的設(shè)計(jì)上。石菖蒲為我國(guó)傳統(tǒng)中藥，對(duì)其抗老年癡呆活性分子機(jī)理的研究有重要應(yīng)用前景，石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)為天南星科菖蒲屬植物,異名九節(jié)菖蒲(江蘇、浙江、江西、湖南)、紫耳、石蜈蚣、臭菖(廣東)、水蜈蚣、野韭菜、香草(云南)、夜晚香、回手香、山艾(四川)等，生長(zhǎng)于濕地或溪旁石上，主要分布于我國(guó)黃河以南各省區(qū)。其根莖入藥，具有芳香化濕、開(kāi)竅豁痰、醒神益智的功能，臨床廣泛用于健忘、中風(fēng)失語(yǔ)、耳鳴、老年性癡呆等病癥。石菖蒲的化學(xué)成分的研究比較深入，以揮發(fā)油部位研究居多，非揮發(fā)部位研究較少，主要包括苯丙素類、萜類、生物堿類、醛酸類、醌酮類、留醇類、氨基酸類和糖類等化合物。大量的藥理學(xué)研究表明，石菖蒲對(duì)中樞神經(jīng)、心血管、呼吸和消化等多種系統(tǒng)均具有調(diào)節(jié)作用，但其發(fā)揮藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)一直沒(méi)有明確，多年來(lái)認(rèn)為石菖蒲主要有效成分是揮發(fā)油，故對(duì)其研究也集中在揮發(fā)油部分，對(duì)于其它部位的研究則相對(duì)較少。但部分現(xiàn)代藥理結(jié)果認(rèn)為，非揮發(fā)性組分同樣具有良好的作用，也是有效部位之一。因此，石菖蒲的真正有效成分尚缺乏研究。目前利用石菖蒲防治老年癡呆癥主要是通過(guò)將石菖蒲作為中藥中的一味藥來(lái) 使用，也有利用石菖蒲的提取物制備治療老年癡呆藥物的，例如專利CN101721567B和CN102526383A。CN101721567B公開(kāi)了一種石菖蒲提取物的制備方法包括如下步驟將石菖蒲用水提取，將提取液濃縮得濃縮液，之后上非極性大孔吸附樹(shù)脂柱，梯度洗脫，洗脫梯度為從水至35%乙醇水溶液，收集15 35%的乙醇水溶液的洗脫液，干燥，即可制得石菖蒲提取物；百分比為體積百分比。CN102526383A公開(kāi)了一種石菖蒲水提物，其特征在于所述石菖蒲水提物按照以下方法制備(I)去揮發(fā)油將石菖蒲與水混合，浸泡I. 5 2h，加熱至沸騰并保持6h，收集揮發(fā)油，收集完畢后冷卻，過(guò)濾，保存濾液，濾餅加水回流提取I I. 5h，冷卻，過(guò)濾，合并兩次濾液，獲得一次濾液，最終所得濾餅為一次濾餅，將一次濾餅干燥，一次濾液即為石菖蒲去揮發(fā)油水提液；(2)石油醚提取將步驟(I) 一次濾液用石油醚重復(fù)萃取，分別合并有機(jī)相和水相，獲得一次萃取有機(jī)相和一次萃取水相；將步驟(I) 一次濾餅用石油醚浸泡I 2h，回流提取I I. 5h，重復(fù)提取，過(guò)濾，合并重復(fù)提取過(guò)濾所得濾液，獲得二次濾液，重復(fù)提取后的濾餅為二次濾餅，二次濾餅干燥，將二次濾液和一次萃取有機(jī)相合并，減壓濃縮，獲得濃縮物，即石油醚提取物；(3)乙酸乙酯提取將步驟(2) —次萃取水相用乙酸乙酯重復(fù)萃取，合并重復(fù)萃取的有機(jī)相獲得二次萃取有機(jī)相，重復(fù)萃取后最終水相為二次萃取水相；將步驟(2) 二次濾餅用乙酸乙酯重復(fù)回流提取，過(guò)濾，合并重復(fù)回流提取濾液，獲得三次濾液，重復(fù)回流提取最終的濾餅為三次濾餅，三次濾餅干燥，將三次濾液和二次萃取有機(jī)相合并，減壓濃縮，獲得濃縮物，即乙酸乙酯提取物；(4)正丁醇提取將步驟(3) 二次萃取水相用正丁醇重復(fù)萃取，合并用正丁醇重復(fù)萃取的有機(jī)相獲得三次萃取有機(jī)相，用正丁醇重復(fù)萃取最終余下的水相為三次萃取水相；將步驟(3)三次濾餅用正丁醇重復(fù)回流提取，過(guò)濾，用正丁醇重復(fù)回流提取的濾液為四次濾液，用正丁醇重復(fù)回流提取最終余下的濾餅為四次濾餅，四次濾餅干燥，將四次濾液和三次萃取有機(jī)相合并，減壓濃縮，獲得濃縮物，即正丁醇提取物；(5)乙醇提取將步驟(4)四次濾餅用乙醇重復(fù)回流提取，過(guò)濾，合并用乙醇重復(fù)回流提取得到的濾液，為五次濾液，用乙醇重復(fù)回流提取后最終得到的濾餅為五次濾餅，五次濾餅干燥，將五次濾液減壓濃縮，獲得濃縮物，即乙醇提取物；(6)水提物將步驟(4)三次萃取水相減壓濃縮，獲得濃縮物，即石菖蒲水提物，所述石菖蒲水提物進(jìn)一步分離純化獲得糖苷和生物堿。
這些專利公開(kāi)的石菖蒲的提取物在防治老年癡呆癥上的效果并不理想，可能原因是限于對(duì)石菖蒲中有效成分的提取方法不合理，導(dǎo)致有效成分沒(méi)有被盡可能地提取出來(lái)。由于石菖蒲的提取物是混合物，所以其活性與石菖蒲的提取方法及其相關(guān)，為了獲得本發(fā)明的能夠防治老年癡呆癥藥物，本發(fā)明通過(guò)大量篩選，發(fā)現(xiàn)石菖蒲作為提取防治老年癡呆癥藥物的植物具有優(yōu)異的效果，通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)，獲得了能夠獲得針對(duì)老年癡呆癥具有防治效果的提取方法以及在治療老年癡呆癥中的有效劑量。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物及其用途。具體的，本發(fā)明提供了一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物，該提取物通過(guò)將石菖蒲進(jìn)行超聲提取和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂解析步驟獲得第一部分提取物和對(duì)殘?jiān)ㄟ^(guò)有機(jī)溶 劑提取的第二部分提取物組成，其中超聲提取的溶劑為水，超聲頻率為30-40kHz，陽(yáng)離子換樹(shù)脂柱的解析用氫氧化鈉水溶液，解析液用鹽酸解析，有機(jī)溶劑為石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。優(yōu)選地，上述石菖蒲提取物中，第一部分提取物的制備方法如下(I)將粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I : 30-50，浸泡100-150min，超聲頻率30_40kHz，提取溫度50_60°C，提取時(shí)間110_170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4-8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6-8，在50-60°C減壓濃縮，獲得第一部分石菖蒲提取物。優(yōu)選地，上述石菖蒲提取物中，第二部分提取物的制備方法如下(3)將獲取第一部分提取物時(shí)獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0-30°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5-10ml，提取物合并減壓濃縮獲得第二部分提取物；具體的，本發(fā)明提供了一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物，該提取物通過(guò)如下步驟的方法獲得(I)將粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I : 30-50，浸泡100-150min，超聲頻率30_40kHz，提取溫度50_60°C，提取時(shí)間110_170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4-8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6-8，在50-60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物
I;(3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0-30°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5-10ml，提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ;
(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物混合物。優(yōu)選的，所述石菖蒲提取物通過(guò)如下步驟的方法制備得到(I)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I 30，浸泡lOOmin，超聲頻率30kHz，提取溫度50°C，提取時(shí)間llOmin，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)001X7陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6，在50°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ;(3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔选⒁宜嵋阴ズ驼〈荚?0°C下浸提3小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ; (4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物。優(yōu)選的，所述石菖蒲提取物通過(guò)如下步驟的方法制備得到(I)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I 50，浸泡150min，超聲頻率40kHz，提取溫度60°C，提取時(shí)間170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=8，在60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ;(3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :10ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ;(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物。本發(fā)明還提供了一種從石菖蒲中提取能夠防治老年癡呆癥的藥物的方法，該方法包括如下步驟(I)將粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I : 30-50，浸泡100-150min，超聲頻率30_40kHz，提取溫度50_60°C，提取時(shí)間110_170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4-8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6-8，在50-60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ;(3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0-30°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔选⒁宜嵋阴ズ驼〈嫉闹亓矿w積比為Ig :5-10ml，提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ;(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥的藥物。
本發(fā)明還提供了上述石菖蒲提取物混合物用于制備防治老年癡呆癥疾病的藥物的用途。本發(fā)明提供的石菖蒲提取物作為防治老年癡呆癥疾病具有優(yōu)異的效果，防治老年癡呆癥效果明顯，該提取物的獲得的方法相比較于其他常規(guī)方法也具有優(yōu)異的效果。
具體實(shí)施例方式為了理解本發(fā)明，下面以實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。實(shí)施例I石菖蒲提取物I的制備(I)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I 30，浸泡lOOmin，超聲頻率30kHz，提取溫度50°C，提取時(shí)間llOmin，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物； (2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫海瑢⒃搼腋∫和ㄟ^(guò)001X7陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6，在50°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ;(3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0°C下浸提3小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ;;(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物I。實(shí)施例2石菖蒲提取物2的制備(I)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I 50，浸泡150min，超聲頻率40kHz，提取溫度60°C，提取時(shí)間170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=8，在60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ;(3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :10ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ;(4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物2。對(duì)比實(shí)施例I對(duì)比石菖蒲提取物I(I)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于蒸餾提取器中，石菖蒲與水的重量比為I 50，提取時(shí)間170min，提取后獲得蒸餾液和殘?jiān)麴s液在50°C下減壓濃縮得石菖蒲水提物；(2)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :10ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲有機(jī)提取物；(4)合并石菖蒲水提物和石菖蒲有機(jī)提取物，獲得防治老年癡呆癥疾病的對(duì)比石菖蒲提取物I。對(duì)比實(shí)施例2對(duì)比石菖蒲提取物2(I)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為
1 30，浸泡lOOmin，超聲頻率30kHz，提取溫度50°C，提取時(shí)間llOmin，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物；(2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)001X7陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6，在50°C減壓濃縮，獲得對(duì)比石菖蒲提取物
2；實(shí)驗(yàn)實(shí)施例I為了測(cè)試石菖蒲提取物是否能夠調(diào)節(jié)Αβ水平，將夾心式酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)用于測(cè)定分泌的Αβ (Αβ42和/或Αβ40)水平。在本實(shí)施例中，將表達(dá)野生型ΑΡΡ695的Η4細(xì)胞以200，000個(gè)細(xì)胞/孔接種在6孔平板上并在37°C與5%二氧化碳下孵育過(guò)夜。分別將實(shí)施例I和2的石菖蒲提取物I和2、對(duì)比實(shí)施例1-2的對(duì)比石菖蒲提取物的 1-2 配制成 10mg/l、50mg/l、100mg/l、150mg/l、200mg/l、250mg/l 濃度的 I. 5ml 培養(yǎng)基，用配制的培養(yǎng)基處理細(xì)胞48小時(shí)。將來(lái)自處理的細(xì)胞上清液收集入埃彭道夫管并進(jìn)行分析。測(cè)試各提取物對(duì)H4細(xì)胞中Aβ 42和Αβ 40含量的影響，所述數(shù)值表示與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照后A β 42和A β 40含量變化比率。表I :實(shí)施例I和實(shí)施例2的提取物對(duì)Η4細(xì)胞中A β 42的影響
權(quán)利要求
1.一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物，該提取物通過(guò)將石菖蒲進(jìn)行超聲提取和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂解析步驟獲得第一部分提取物和對(duì)殘?jiān)ㄟ^(guò)有機(jī)溶劑提取的第二部分提取物組成，其中超聲提取的溶劑為水，超聲頻率為30-40kHz，陽(yáng)離子換樹(shù)脂柱的解析用氫氧化鈉水溶液，解析液用鹽酸解析，有機(jī)溶劑為石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的石菖蒲提取物，其中第一部分提取物的制備方法如下 (1)將粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I: 30-50，浸泡100-150min,超聲頻率30_40kHz，提取溫度50_60°C，提取時(shí)間110_170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物； (2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4-8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得 解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6-8，在50-60°C減壓濃縮，獲得第一部分石菖蒲提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的石菖蒲提取物，其中第二部分提取物的制備方法如下 (3)將獲取第一部分提取物時(shí)獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0-30°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔选⒁宜嵋阴ズ驼〈嫉闹亓矿w積比為Ig :5-10ml，提取物合并減壓濃縮獲得第二部分提取物。
4.一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物，該提取物通過(guò)如下步驟的方法獲得 (1)將粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I: 30-50，浸泡100-150min,超聲頻率30_40kHz，提取溫度50_60°C，提取時(shí)間110_170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物； (2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4-8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6-8，在50-60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ; (3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0-30°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5-10ml，提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ; (4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物。
5.一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物，該提取物通過(guò)如下步驟的方法獲得 (1)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I: 30，浸泡lOOmin，超聲頻率30kHz，提取溫度50°C，提取時(shí)間llOmin，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物； (2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)001X7陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=6，在50°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ; (3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0°C下浸提3小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ; (4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物。
6.一種治療老年癡呆癥的石菖蒲提取物，該提取物通過(guò)如下步驟的方法獲得 (1)將IOOg粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I: 50，浸泡150min，超聲頻率40kHz，提取溫度60°C，提取時(shí)間170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物； (2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到pH=8，在60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ; (3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0°C下浸提3-4小時(shí)， 殘?jiān)褪兔选⒁宜嵋阴ズ驼〈嫉闹亓矿w積比為Ig :10ml，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ; (4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥疾病的石菖蒲提取物。
7.—種從石菖蒲中提取能夠防治老年癡呆癥的藥物的方法，該方法包括如下步驟 (1)將粉碎的石菖蒲葉粉置于超聲提取器中，石菖蒲與水的重量比為I: 30-50，浸泡100-150min,超聲頻率30_40kHz，提取溫度50_60°C，提取時(shí)間110_170min，超聲提取后的提取液進(jìn)行抽濾，獲得清液和殘?jiān)?，清液?0-50°C下減壓濃縮得石菖蒲粗提取物； (2)在石菖蒲粗提取物中加入粗提取物重量5-10倍的水?dāng)嚢璩纱痔崛∥飸腋∫?，將該懸浮液通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用4-8%的氫氧化鈉水溶液對(duì)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行解析獲得解析液；用鹽酸酸化所述解析液到PH = 6-8，在50-60°C減壓濃縮，獲得石菖蒲提取物I ; (3)將第(I)步獲得的殘?jiān)来斡檬兔?、乙酸乙酯和正丁醇?0-30°C下浸提3-4小時(shí)，殘?jiān)褪兔?、乙酸乙酯和正丁醇的重量體積比為Ig :5-10ml，提取物合并減壓濃縮獲得石菖蒲提取物II ; (4)合并石菖蒲提取物I和石菖蒲提取物II，獲得防治老年癡呆癥的藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療癡呆癥的石菖蒲提取物及其提取方法，該提取物通過(guò)將石菖蒲進(jìn)行超聲提取和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂解析步驟獲得第一部分提取物和對(duì)殘?jiān)ㄟ^(guò)有機(jī)溶劑提取的第二部分提取物組成，其中超聲提取的溶劑為水，超聲頻率為30-40kHz，陽(yáng)離子換樹(shù)脂柱的解析用氫氧化鈉水溶液，解析液用鹽酸解析，有機(jī)溶劑為石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。本發(fā)明提供的石菖蒲提取物作為防治老年癡呆癥疾病具有優(yōu)異的效果，防治老年癡呆癥效果明顯，該提取物的獲得的方法相比較于其他常規(guī)方法也具有優(yōu)異的效果。
文檔編號(hào)A61K36/888GK102895439SQ20121045467
公開(kāi)日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月13日
發(fā)明者陳 峰 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所, 陳 峰