專利名稱：用于預(yù)防和/或治療敗血癥的腸道組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種包含磷脂、甘油三酯和膽固醇或其前體的腸道組合物及其在預(yù)防和/或治療敗血癥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
敗血癥是一種當(dāng)較大量的微生物或其片段進(jìn)入身體時(shí)發(fā)生的疾病。其也被稱為內(nèi)毒素血癥或內(nèi)毒素性休克。內(nèi)毒素或者脂多糖(LPS)是格蘭氏陰性菌的外細(xì)胞膜的組成成分。脂磷壁酸質(zhì)(LTA)是格蘭氏陽(yáng)性菌的外細(xì)胞膜的組成成分，而格蘭氏陽(yáng)性菌也可導(dǎo)致敗血癥。腸道、特別是結(jié)腸，不僅是LPS和格蘭氏陰性菌的儲(chǔ)藏地，例如通常棲居的Escherichia coli，也是LTA和格蘭氏陽(yáng)性菌的儲(chǔ)藏地。LPS以及LTA可以由腸道通過(guò)直接轉(zhuǎn)移或者通過(guò)格蘭氏陰性菌和/或格蘭氏陽(yáng)性菌的跨腸壁轉(zhuǎn)移進(jìn)入全身循環(huán)中。
格蘭氏陰性菌和/或陽(yáng)性菌以及LPS和/或LTA在腸道中的出現(xiàn)對(duì)于健康人而言是沒(méi)有問(wèn)題的。但是，在罹患腸道功能障礙的人或動(dòng)物中，例如由缺血、手術(shù)、慢性炎癥、放射治療、外傷、使用某些藥物如NSAID或者化學(xué)治療劑、病情嚴(yán)重的患者如重癥監(jiān)護(hù)的人、或者被侵入性病原體感染的人，LPS、LTA、格蘭氏陽(yáng)性菌和/或格蘭氏陰性菌可跨過(guò)腸壁并到達(dá)循環(huán)中。一旦這些細(xì)菌進(jìn)入全身系統(tǒng)中，LPS和/或LTA就被釋放，而該釋放主要是由于吞噬系統(tǒng)的高活性。該感染過(guò)程也可通過(guò)肺(或者在感染期間)或者通過(guò)外周身體部分(例如事故導(dǎo)致的外傷之后，或者在褥瘡期間，在一些懷孕疾病(HELLP綜合癥)的后期，或者在輸血期間)而發(fā)生。
LPS和/或LTA在身體中的釋放可導(dǎo)致急性期應(yīng)答和敗血癥，如果LPS和/或LTA不能被適當(dāng)?shù)刂泻汀４说炔贿m當(dāng)?shù)闹泻妥饔糜锌赡馨l(fā)生在免疫功能不全的動(dòng)物/人中，就如同在營(yíng)養(yǎng)不良、禁食、手術(shù)、缺血情況、嚴(yán)重的燒傷、慢性感染、癌癥治療、肝或脾功能受損之后經(jīng)常發(fā)生的，而且還有可能發(fā)生在患有嚴(yán)重疾病以及在大手術(shù)后直接恢復(fù)的人中發(fā)生。
急性期應(yīng)答可通過(guò)測(cè)量血液中的C反應(yīng)性蛋白的濃度來(lái)確定。C反應(yīng)性蛋白是人中的急性期蛋白，而且是先天免疫系統(tǒng)的重要組成部分。C反應(yīng)性蛋白激活補(bǔ)體的經(jīng)典通道，這是提供宿主防御的主要機(jī)制之一。近來(lái)已認(rèn)識(shí)到，C反應(yīng)性蛋白通過(guò)與Fcγ受體結(jié)合而與免疫系統(tǒng)的細(xì)胞相互作用。其因此有可能銜接先天與適應(yīng)性免疫之間的缺口，并提供早期、有效的抗菌應(yīng)答。另外，當(dāng)其對(duì)抗脂多糖和細(xì)胞因子的破壞性炎性應(yīng)答時(shí)，有可能防止細(xì)菌產(chǎn)物的致命性副作用。如Januszkiewicz等人所述(Clin.Nutr.2001，20(2)，181-182)，敗血癥的風(fēng)險(xiǎn)可通過(guò)體內(nèi)測(cè)量免疫系統(tǒng)之細(xì)胞如T淋巴細(xì)胞中的蛋白合成來(lái)確定。
敗血癥可導(dǎo)致多個(gè)器官衰竭或者死亡。因此，重要的是發(fā)現(xiàn)治療方法，特別是預(yù)防敗血癥的方法。在現(xiàn)有技術(shù)中已有人提出了幾種方法來(lái)緩解癥狀或者預(yù)防或治療敗血癥。
在WO 98/32428中給出了一種方法，其描述了在腸道食物中使用膽堿以降低和/或防止損傷所誘發(fā)的內(nèi)毒素和死亡。給藥量為每日1.5-20g。膽堿是以酒石酸膽堿的形式進(jìn)行給藥。
如US5,434,183中所述，另一個(gè)方法是使用磷脂，該文獻(xiàn)描述了包含ω-3脂肪酸DHA和EPA的磷脂與植物油和/或海洋生物油的組合，在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和敗血癥中具有抗炎和/或免疫抑制作用。這能夠得到非常低濃度的血清膽固醇和血清甘油三脂。
WO96/04916描述了不含蛋白質(zhì)和多肽的靜脈注射液，其包含至少一種磷脂與膽烷酸或膽烷酸鹽的組合，用于預(yù)防和治療與內(nèi)毒素有關(guān)的病癥。任選地，可添加中性脂質(zhì)。
JP 05320043描述了由磷脂(特別是磷脂酰膽堿)、膽固醇以及飽和脂肪酸、特別是肉豆蔻酸組成的脂多糖清除劑。這些成分被轉(zhuǎn)化為脂質(zhì)體，其可以靜脈給藥溶液的形式使用，用于預(yù)防或治療缺血或缺血后的組織損傷。膽固醇∶磷脂酰膽堿∶肉豆蔻酸的合適濃度比為5-10∶5-10∶1-5。
US4,474,773也描述了給藥磷脂、甘油三酯以及膽固醇的組合，可用于例如治療免疫系統(tǒng)的功能障礙，根據(jù)US4,474,773可有利地通過(guò)靜脈給藥。
現(xiàn)有技術(shù)中用于治療敗血癥的組合物具有制劑復(fù)雜的缺陷，例如需要制成脂質(zhì)體。其他缺陷是非胃腸道給藥會(huì)給患者產(chǎn)生更大的風(fēng)險(xiǎn)。因此，仍需要相對(duì)簡(jiǎn)單、有效并且安全的用于預(yù)防和治療敗血癥的制劑。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，敗血癥可通過(guò)包含磷脂、甘油三酯和膽固醇或其前體的腸道組合物來(lái)有效地預(yù)防和/或治療。
本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)通過(guò)摻入脂蛋白如LDL(低密度脂蛋白)、VLDL(非常低密度脂蛋白)、乳糜微粒和HDL(高密度脂蛋白)中，特別是乳糜微粒，可在循環(huán)中使LPS和/或LTA脫毒。發(fā)明人相信，乳糜微粒在吸收和運(yùn)輸親脂性物質(zhì)方面扮演著重要的作用，所述親脂性物質(zhì)例如是食品成分和毒素(例如LPS和/或LTA)，它們可通過(guò)腸道進(jìn)入體內(nèi)，但是也可在部分體內(nèi)在消除死亡細(xì)胞的殘余部分時(shí)形成。乳糜微粒被釋放在與淋巴樣組織相關(guān)的腸道(GALT)中，并吸收LPS和/或LTA，而后者是在腸細(xì)胞、特別是淋巴結(jié)中的細(xì)菌發(fā)生溶解后被釋放的。該乳糜微粒通過(guò)胸管(ductus thoracicus)被轉(zhuǎn)運(yùn)至左靜脈角，而左靜脈角則將乳糜微粒以及其他的脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)至心臟，然后再轉(zhuǎn)運(yùn)至網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(特別是脾臟)和肝臟(Kupffer細(xì)胞)中。因此，乳糜微粒也可用作肝臟中轉(zhuǎn)運(yùn)脂溶性物質(zhì)的載體，由此可防止吸收不良導(dǎo)致的丟失。
不僅保持血漿中的乳糜微粒的天然濃度，而且特別是保持GALT(例如在相對(duì)較長(zhǎng)的該腸道部分)中的乳糜微粒的天然濃度，能夠確保在身體的多個(gè)部位處，例如在肺和腸道中釋放的LPS和/或LTA被中和，大大降低了局部產(chǎn)生高濃度LPS和/或LTA的風(fēng)險(xiǎn)。
鑒于以上發(fā)現(xiàn)，與現(xiàn)有技術(shù)相反，根據(jù)本發(fā)明最根本的是以腸道組合物而不是靜脈組合物給藥磷脂、甘油三酯和膽固醇的組合。磷脂、甘油三酯和膽固醇的組合在腸道中被消化，確保了在GALT中長(zhǎng)時(shí)間地、相對(duì)恒定地釋放乳糜微粒，因?yàn)樵摦a(chǎn)物的消化相對(duì)較慢。另外，根據(jù)本發(fā)明之磷脂、甘油三酯和膽固醇的組合具有以下優(yōu)點(diǎn)所有成分無(wú)需特殊的預(yù)處理，例如形成脂質(zhì)體，這使制造過(guò)程更有效，而且成本較低。再者，通常腸道給藥該組合物是簡(jiǎn)單且安全的。
與提供了靜脈給藥磷脂、甘油三酯和膽固醇的US4,474,773相比，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，如以上所解釋的，腸道給藥有利于在GALT中形成乳糜微粒，由此有效地預(yù)防和/或治療敗血癥。在此方面，據(jù)信US4,474,773的教導(dǎo)有損于所述預(yù)防和/或治療作用。的確，US4,474,773提出了通過(guò)增加淋巴細(xì)胞的形成來(lái)刺激免疫系統(tǒng)。但是，該刺激作用所產(chǎn)生的問(wèn)題是會(huì)形成細(xì)胞因子，而細(xì)胞因子與產(chǎn)生敗血癥的促炎應(yīng)答有關(guān)(Intensive CareMed.200，26 Suppl.，1S124-88，Immunomodulatory therapy in sepsis，KoxWJ等人)。這進(jìn)一步被以下文獻(xiàn)證實(shí)Inflamm.Res.1998年5月，47(5)201-10，″The inflammatory basis of trauma/shock associated multiple organfailure″，Yao YM等人)。該文獻(xiàn)描述了免疫系統(tǒng)的活化可產(chǎn)生一般性的炎癥，并最終導(dǎo)致持續(xù)的炎癥以及多個(gè)器官損傷。因此，雖然遵從US4,474,773的教導(dǎo)，可對(duì)免疫系統(tǒng)進(jìn)行刺激，但有損于敗血癥的治療和/或預(yù)防。
Wang X.D.等人(Scand.J.Gastroenterol 19941117-1121)描述了在大鼠90％肝切除后腸道給藥磷脂可顯著地降低細(xì)菌轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。他們描述到，在某些病癥中，細(xì)菌轉(zhuǎn)移有可能導(dǎo)致敗血癥和菌血癥。并得出以下結(jié)論減少細(xì)菌轉(zhuǎn)移有可能是磷脂滋養(yǎng)了腸粘膜并維持腸屏障的結(jié)果，或者作為粘膜表面活性劑起到了屏障功能。但是，該文章沒(méi)有提及乳糜微粒，更不用說(shuō)其與預(yù)防或治療敗血癥的關(guān)系。
WO 01/19356提出了另一個(gè)用于預(yù)防敗血癥的方法，該方法是腸道給藥中等鏈長(zhǎng)的甘油三酯和脂質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，其提供磷脂、甘油三酯與膽固醇或其前體的組合在制備用于治療和/或預(yù)防敗血癥的腸道組合物中的應(yīng)用。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，其提供一種包含磷脂、甘油三酯和膽固醇的腸道組合物，其中該組合物包含占組合物重量45-91％的磷脂。
根據(jù)本發(fā)明的再一個(gè)方面，其提供一種包含磷脂、甘油三酯和膽固醇的腸道組合物，其中膽固醇在組合物中的量為組合物重量的0.5-3％。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的根本成分是磷脂。在此所用的磷脂選自于以下組中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸以及它們的混合物。
優(yōu)選地，磷脂是以磷脂混合物的形式給藥，特別是包含磷脂酰膽堿以及磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酸中的一種或多種的混合物。更優(yōu)選的是，本發(fā)明的組合物至少包含磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺。
通常情況下，用于本發(fā)明中的磷脂在組合物中的量為組合物重量的45-91％?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的組合物中存在高濃度的磷脂進(jìn)一步增加乳糜微粒的形成，并由此進(jìn)一步提高對(duì)敗血癥的預(yù)防和/或治療作用。因此，優(yōu)選高的磷脂含量，使得在本發(fā)明的組合物中磷脂的濃度為48-78重量％，更優(yōu)選為55-69重量％。但是，在希望甘油三酯為主要成分時(shí)，磷脂在組合物中的濃度則優(yōu)選為組合物重量的10-45％。
作為磷脂的來(lái)源，可以使用富含特殊磷脂或者包含較純(合成)磷脂的制劑。雖然在合成磷脂、甚至溶血磷脂的消耗后可在體內(nèi)形成乳糜微粒，但優(yōu)選使用天然來(lái)源的磷脂，特別是蛋和大豆卵磷脂。的確，這些磷脂是經(jīng)濟(jì)的，為消費(fèi)者喜歡的，而且有時(shí)也是更為穩(wěn)定的。已發(fā)現(xiàn)以下天然來(lái)源的磷脂是非常合適的以總磷脂含量計(jì)，在此優(yōu)選使用的大豆卵磷脂包含35-50重量％的磷脂酰膽堿和25-40重量％的磷脂酰乙醇胺。
在此優(yōu)選使用的蛋磷脂提取物包含50-70重量％的磷脂酰膽堿和15-22重量％的磷脂酰乙醇胺。
磷脂中的脂肪酸特別地包含低于30％的二十二碳六烯酸和/或二十碳五烯酸。
磷脂的給藥量為每次給藥0.01-1.5g/kg體重。對(duì)于人，這導(dǎo)致約每次給藥0.6-80g。每24小時(shí)至少給藥一次上述劑量，但優(yōu)選每2-12小時(shí)、更優(yōu)選每3-8小時(shí)給藥一次，或者甚至連續(xù)給藥。
磷脂的日劑量按照以下方式選擇使低濃度的脂蛋白恢復(fù)至在正常飲食的健康人中所觀察到的濃度，或者與健康人相比甚至在短時(shí)間內(nèi)將其濃度增加120％或者150％以上，和/或增加磷脂/脂蛋白在血液中的比例。的確，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)磷脂高的重量/摩爾比是優(yōu)選的。磷脂含量高的乳糜微粒(以及其他脂蛋白)具有更高的中和內(nèi)毒素的能力。另外，磷脂含量高將有助于甘油三酯的吸收，并提高胃腸道屏蔽功能。
具體而言，磷脂的劑量對(duì)于患者類型以及給藥類型優(yōu)選是特定的。因此，患者可分為三個(gè)組
組1該組的患者可給藥腸道營(yíng)養(yǎng)而且可消耗常規(guī)量的甘油三酯和膽固醇；組2該組的患者營(yíng)養(yǎng)不良，或者腸細(xì)胞的代謝能力受損；組3該組的患者極為虛弱，通常需要非胃腸道途徑給藥。
組1和組2的患者可從各種類型的營(yíng)養(yǎng)中獲益。但是，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間使用管飼法時(shí)，優(yōu)選使用本發(fā)明之甘油三酯為主要成分的組合物(即、甘油三酯的含量超過(guò)50重量％)，這是因?yàn)槟c道中存在的脂質(zhì)是由組合物給藥提供的。因此，對(duì)于完全的腸道營(yíng)養(yǎng)組合物并考慮2000kcal的消耗，對(duì)于長(zhǎng)期管飼法，磷脂的日劑量?jī)?yōu)選為4-30g，更優(yōu)選為6-28g。
當(dāng)使用短期管飼法時(shí)，優(yōu)選使用本發(fā)明之磷脂作為主要成分的組合物，因?yàn)闅埩舻母视腿ト钥捎筛绲氖澄锎嬖谟谀c道中，而且腸細(xì)胞中的膽固醇合成不會(huì)受到大的損害。因此，對(duì)于完全的腸道營(yíng)養(yǎng)組合物并考慮2000kcal的消耗，對(duì)于長(zhǎng)期管飼法，磷脂的日劑量?jī)?yōu)選為20-75g，更優(yōu)選為28-60g。
當(dāng)使用補(bǔ)充劑時(shí)，已發(fā)現(xiàn)組1和組2，雖然組2的程度較低，都受益于磷脂為主要成分的補(bǔ)充劑(即、磷脂的含量為45重量％以上)，因?yàn)檫@將使組1的患者能夠消化常規(guī)飲食的甘油三酯和膽固醇，而對(duì)于組2的患者，這將使他們能夠消耗對(duì)于他們的機(jī)體必需的元素。因此，對(duì)于磷脂為主要成分的補(bǔ)充組合物并考慮200-600ml的消耗以及約5％的脂質(zhì)含量，補(bǔ)充劑中磷脂的日劑量?jī)?yōu)選為5-28g，更優(yōu)選為15-25g，而對(duì)于甘油三酯為主要成分的補(bǔ)充組合物，補(bǔ)充劑中磷脂的日劑量?jī)?yōu)選為1-13g，更優(yōu)選為2-8g。
還發(fā)現(xiàn)對(duì)組3的患者給藥少量(50-400ml)的以甘油三酯為主要成分的本發(fā)明組合物將是有益的。
本發(fā)明的另一個(gè)基本成分是甘油三酯。本發(fā)明的甘油三酯具體地選自于用長(zhǎng)鏈脂肪酸酯化的甘油。對(duì)于長(zhǎng)鏈脂肪酸，是指包含至少18個(gè)碳原子的脂肪酸。相對(duì)于甘油三酯中的脂肪酸的總量，長(zhǎng)鏈脂肪酸的量應(yīng)至少為50％，更優(yōu)選為60％以上，以在體內(nèi)觀察到明顯的乳糜微粒形成。優(yōu)選的長(zhǎng)鏈脂肪酸是stearidonic、油酸、α-亞麻酸、亞油酸、γ-亞麻酸、結(jié)合亞油酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸和花生四烯酸。更優(yōu)選的是使用多不飽和脂肪酸，其將產(chǎn)生更有效的乳糜微粒，即、更適合于清除LPS和/或LTA的乳糜微粒。甘油三酯部分中的肉豆蔻酸的量?jī)?yōu)選低于40重量％，更優(yōu)選低于25重量％。
甘油三酯例如是植物油如豆油、玉米油、橄欖油、葵花油、芝麻油、紅花油、麥芽油、花生油、月見(jiàn)草油、蛋黃油或者它們的混合物，但海洋生物的油如魚(yú)油和海藻油也是合適的，它們?nèi)芜x與一種或多種植物油混合。
通常情況下，用于本發(fā)明目的的甘油三酯是以低于7重量％-低于80重量％的量存在于甘油三酯、膽固醇和磷脂的混合物中。當(dāng)磷脂的含量高時(shí)，甘油三酯的使用量或者在組合物中的含量?jī)?yōu)選是7-50重量％。但是，如果希望甘油三酯是主要成分，則組合物中的甘油三酯濃度優(yōu)選為組合物重量的50％以上至80％。
甘油三酯的給藥量為0.01-1g/kg體重。這將導(dǎo)致每個(gè)病人一次給藥約0.6-60g甘油三酯。
本發(fā)明另一個(gè)基本成分是膽固醇或其前體。的確，除磷脂和甘油三酯外，發(fā)現(xiàn)如果存在膽固醇對(duì)于它們的組合是有利的，因?yàn)榕c僅包含磷脂和甘油三酯的組合相比將產(chǎn)生更多的乳糜微粒，并進(jìn)而對(duì)敗血癥產(chǎn)生更好的預(yù)防和/或治療作用。
具體而言，可以使用一種或多種膽固醇或諸如在天然提取物(蛋)中形成的膽固醇酯以及合成來(lái)源的膽固醇酯，例如與有機(jī)酸形成的酯，如膽固醇乙酸酯、膽固醇半琥珀酸酯、膽固醇正丁酸酯、膽固醇油酸酯，或者與磷脂形成的酯。優(yōu)選的是，使用由蛋中分離出來(lái)的富含膽固醇的部分。
通常情況下，用于本發(fā)明目的的膽固醇或其等價(jià)物在甘油三酯、膽固醇和磷脂的混合物中以組合物重量的0.5-8％的量存在。還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)膽固醇的含量在0.5-3重量％、優(yōu)選0.7-1.5重量％的特定范圍內(nèi)時(shí)，在組合物的穩(wěn)定性方面有最好的應(yīng)答，特別是使用大豆卵磷脂時(shí)，并得到乳糜微粒的產(chǎn)生。本發(fā)明之包含卵膽固醇和蛋卵磷脂的組合物有時(shí)會(huì)產(chǎn)生非所希望的組合物乳狀液分層現(xiàn)象。使用此等特定的膽固醇濃度并組合大豆磷脂可解決上述問(wèn)題。
以膽固醇計(jì)算，該成分的給藥量?jī)?yōu)選為每次給藥2-120mg/kg體重，優(yōu)選為每次給藥14-80mg/kg體重，在人中產(chǎn)生0.1-7g的劑量，優(yōu)選每次給藥1-5.5g。
本發(fā)明組合物的成分(膽固醇、磷脂和甘油三酯)以其天然形式或者以分離成分的形式存在。這意味著本發(fā)明無(wú)需形成脂質(zhì)體。
在本發(fā)明的制劑中，膽固醇∶磷脂∶甘油三酯的重量比優(yōu)選為1∶3-80∶3-90，更優(yōu)選為1∶3-20∶3-90，更優(yōu)選為1∶6-16∶6-60，最優(yōu)選為1∶6-12∶12-40。如上所述，如果在本發(fā)明的組合物中存在高濃度的磷脂，膽固醇∶磷脂∶甘油三酯的重量比優(yōu)選為1∶20-80∶3-80，更優(yōu)選為1∶20-75∶20-75。
作為本發(fā)明之磷脂、膽固醇和甘油三酯組合的來(lái)源，還可以使用蛋，例如蛋黃油和蛋粉形式的蛋。蛋、特別是其脂質(zhì)部分，已包含所希望的成分。取決于組合物的最終用途以及所用的脂質(zhì)提取物的類型，所有成分或者一些成分(膽固醇、磷脂和甘油三酯)需要額外補(bǔ)充以落入所示范圍內(nèi)，使得患者的飲食包含準(zhǔn)確量的這些成分。特別有利的是，如果蛋是在其飼料中具有特定脂質(zhì)混合物的動(dòng)物的蛋，該蛋具有更高含量的α-亞麻酸、結(jié)合油酸以及二十二碳六烯酸。
除了包含本發(fā)明的合適成分外，蛋的優(yōu)點(diǎn)是還包含有益的蛋白質(zhì)。蛋的蛋白質(zhì)部分包含能夠與細(xì)菌相互作用的免疫球蛋白。在腸道中存在免疫球蛋白、特別是IgY以及本發(fā)明的各成分，將提供非常有效的系統(tǒng)，該系統(tǒng)防止細(xì)菌通過(guò)腸壁的轉(zhuǎn)移。
優(yōu)選的是，這些免疫球蛋白、特別是IgY已被制成適合于特異性地結(jié)合那些對(duì)于導(dǎo)致敗血癥為最大風(fēng)險(xiǎn)的細(xì)菌菌株。此等免疫球蛋白可在禽中誘導(dǎo)并根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法轉(zhuǎn)移至卵中。因此，特別適合于根據(jù)本發(fā)明使用的產(chǎn)物是經(jīng)過(guò)超免疫的蛋，它們可在例如光消毒之后使用，該消毒法可以保存主要為未變性及活性狀態(tài)的免疫球蛋白。
對(duì)于每次給藥，本發(fā)明的組合物優(yōu)選包含至少0.02g、優(yōu)選0.08-1.6g、更優(yōu)選0.08-0.9g的蛋白/kg體重。當(dāng)所用的蛋白質(zhì)是源于經(jīng)過(guò)超免疫的禽類的蛋，則IgY的日給藥劑量?jī)?yōu)選為0.2-120mg。當(dāng)與本發(fā)明的組合物組合使用時(shí)，發(fā)現(xiàn)IgY的效力可更好地防止細(xì)菌的轉(zhuǎn)移，IgY的日給藥劑量更優(yōu)選在0.2-800mg的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在10-600mg的范圍內(nèi)。該成分的給藥量?jī)?yōu)選為每次給藥0.1-10mg/kg體重。
如本發(fā)明所述治療人/動(dòng)物時(shí)的給藥量是每kg體重的劑量。因此，給藥量可根據(jù)待治療患者的重量來(lái)確定。日劑量可通過(guò)給藥量乘以每日進(jìn)行給藥的次數(shù)來(lái)計(jì)算。給藥方案可例如通過(guò)每2-12小時(shí)、優(yōu)選每3-8小時(shí)重復(fù)給藥或者甚至通過(guò)連續(xù)給藥進(jìn)行調(diào)節(jié)，以在淋巴中維持高濃度的乳糜微粒。對(duì)于患者組，推薦腸道管飼法。
腸道組合物可另外包含乳酸菌、乳酸菌的產(chǎn)物、益生素、額外的L-谷氨酸和/或L-精氨酸、纖維、碳水化合物、多糖、維生素、礦物質(zhì)如鋅、以及其他正常存在于腸道補(bǔ)充物中的成分，其中鋅能夠促進(jìn)脂溶性物質(zhì)的吸收。
具體而言，本發(fā)明的組合物包含脂溶性物質(zhì)。這些物質(zhì)特別是選自于以下組中維生素K(甲基萘醌類)、泛醌、類胡蘿卜素如維生素A、特殊的脂肪酸如結(jié)合亞油酸、硫辛酸和維生素D。在本發(fā)明的脂質(zhì)混合物中包含一種或多種這些成分有效地降低敗血癥的發(fā)生率，降低急性期應(yīng)答，并提高手術(shù)或者外傷后的恢復(fù)。
當(dāng)與本發(fā)明的脂質(zhì)混合物以及任選的鋅鹽一起包括在腸道制品中時(shí)，低含量的這些脂溶性物質(zhì)比現(xiàn)有技術(shù)更為有效。
還優(yōu)選的是在制劑中以每次給藥10-100、優(yōu)選20-50mg/kg體重的量加入黃連素或者Berberis aristata或Coccinia fenestratum的提取物。
本發(fā)明的腸道組合物優(yōu)選用于預(yù)防和/或治療敗血癥、菌血癥和/或內(nèi)毒素血癥(內(nèi)毒素性休克)，以及用于延遲急性期應(yīng)答。具體而言，經(jīng)歷大手術(shù)的患者、嚴(yán)重疾病的患者、罹患炎性腸道疾病(IBD)的患者、罹患HELLP綜合癥的患者、細(xì)菌轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)增強(qiáng)以及通常敗血癥的患者，特別是那些患有大的外傷、燒傷、肺炎(特別是細(xì)菌導(dǎo)致的或者伴隨有細(xì)菌感染的)、褥瘡、在放療/化療期間或者免疫系統(tǒng)不全(早產(chǎn)兒)或老年性疾病的患者。
在手術(shù)時(shí)，據(jù)信內(nèi)毒素血癥的風(fēng)險(xiǎn)與患者需要術(shù)前禁食以及手術(shù)后僅攝入非常少的食物有關(guān)。其結(jié)果是，減少了乳糜微粒的正常量，這使得患者更易于受到LPS的損傷。通常情況下，這些患者可在手術(shù)前3小時(shí)或者手術(shù)后短時(shí)間內(nèi)服用本發(fā)明的組合物，但是本發(fā)明還包括在手術(shù)前更短的時(shí)間內(nèi)服用組合物的選擇。在此情況下，組合物中總的脂質(zhì)濃度通常每次給藥在5-70g、優(yōu)選在15-50g的范圍內(nèi)。該給藥量可通過(guò)口服給藥的方式提供，優(yōu)選相對(duì)較小體積的液體，例如100-700、優(yōu)選150-600ml。
本發(fā)明的組合物也可被允許攝入有限體積的患者服用，例如罹患神經(jīng)性厭食的患者或者諸如癌癥或AIDS等疾病的晚期的患者，但也包括許多老年人。在此情況下，組合物中的甘油三酯濃度在0.7-30、優(yōu)選2-15g/給藥劑量的范圍內(nèi)，給藥體積相對(duì)較低。
通常易受感染的哺乳動(dòng)物，例如由于不規(guī)律的喂養(yǎng)方案，如牛或豬，特別是幼豬，這可導(dǎo)致低的食物質(zhì)量，也可用本發(fā)明的組合物治療。運(yùn)輸期間的壓力也可導(dǎo)致動(dòng)物中的細(xì)菌轉(zhuǎn)移。
本發(fā)明的腸道組合物可通過(guò)口服或者管飼法給藥，優(yōu)選用管飼法給藥?？诜幬锟梢允且后w、膠囊或粉末狀的完全藥物或者藥物補(bǔ)充劑。優(yōu)選的液體劑型是分散液。由于以上所述的原因，靜脈組合物不包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
因此，本發(fā)明還提供包含以下物質(zhì)的腸道藥物(一個(gè)劑量)8-120g、優(yōu)選12-80g的膽固醇、磷脂和甘油三酯組合，5-100g、優(yōu)選12-60g的蛋白質(zhì)部分，以及1.2-400g、優(yōu)選5-200g的碳水化合物部分。
腸道藥物的例子包括可通過(guò)管子給藥于患者(例如經(jīng)歷心臟手術(shù)的患者)的藥物，其在完全腸道藥物中通常存在的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、纖維及其他成分存在時(shí)包含0.5-7％(w/v)、優(yōu)選3-6％(w/v)的磷脂。在手術(shù)前24小時(shí)開(kāi)始給藥，這取決于患者的病癥，可通過(guò)飲用或者管飼法給藥，并可在手術(shù)后通過(guò)管飼法持續(xù)24-72小時(shí)。管飼法也可直接在十二指腸中進(jìn)行，由此可有利地保持空胃并防止手術(shù)期間的吸入。用本發(fā)明的組合物連續(xù)治療是本發(fā)明的一個(gè)重要且優(yōu)選的方面。的確，連續(xù)治療，例如在手術(shù)前開(kāi)始，并持續(xù)4-5天，可持續(xù)產(chǎn)生乳糜微粒，由此對(duì)微生物感染、特別是引起敗血癥的微生物感染產(chǎn)生更好且持續(xù)的抵抗作用。
包含根據(jù)本發(fā)明之脂質(zhì)混合物的膠囊或粉末狀食品補(bǔ)充劑可給藥于罹患炎性腸疾病的患者。該補(bǔ)充劑可進(jìn)一步包含纖維、寡糖、維生素(特別是脂溶性維生素)、益生素、抗氧劑、草藥或植物提取物、蛋白質(zhì)或肽等。該補(bǔ)充劑可給藥于恢復(fù)中的患者，以防止炎癥的復(fù)發(fā)或者在復(fù)發(fā)時(shí)緩解炎癥。
磷脂濃度為1-5％(w/v)的液體飲劑藥物可例如給藥于將要進(jìn)行手術(shù)的阻塞性黃膽患者。在藥物中可存在蛋白質(zhì)、脂肪、多糖和微量營(yíng)養(yǎng)物。該藥物可在手術(shù)前24-12小時(shí)給藥，并且在手術(shù)后盡可能早地持續(xù)進(jìn)行24-72小時(shí)。
本發(fā)明的組合物還適合于新生以及早產(chǎn)兒或動(dòng)物。
以下是進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的非限制性實(shí)施例。
實(shí)施例1每100ml完全食物包含能量 125kcal蛋白質(zhì)6g(3g卵白蛋白，3g全乳蛋白)N-乙?；腚装彼? 0.04g脂質(zhì) 4.5g，包括磷脂 1.2g甘油三酯 3.1g膽固醇0.2g碳水化合物15.5g纖維 0.2g本領(lǐng)域已知的礦物質(zhì)、微量元素和維生素維生素K 30μg輔酶Q10 5mg生育酚1mgαTE類胡蘿卜素0.1mg實(shí)施例2用作補(bǔ)充劑的液體食物，每100ml包含
能量100kcal蛋白質(zhì) 9g脂質(zhì)2.1g，包括磷脂0.9g植物油 1.05g(芝麻油和橄欖油1∶3)膽固醇 0.36g碳水化合物 15.5g礦物質(zhì)、微量元素、維生素以及本領(lǐng)域已知的其他成分，例如Na、K、Cl、Ca、Mg、Fe、Cu、P、Zn、I、維生素A、D、C、E、B1、B2、B6、B12、葉酸、泛酸、煙酸、生物素。
實(shí)施例3管飼食物，每100ml包含蛋白質(zhì)(酪蛋白) 4.0g碳水化合物 12.3g脂肪 3.9g，包括磷脂 1g甘油三酯 2.9g膽固醇 32mg還包括根據(jù)食品常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)量的維生素、礦物質(zhì)、膽堿、以及微量元素。
實(shí)施例4蛋的制備當(dāng)仍為小母雞時(shí)，向它們注射一次或者多次已知在敗血癥中扮演重要作用的人病原體，由此使這些母雞超免疫。收集蛋，并如現(xiàn)有技術(shù)中所述制造完整的內(nèi)容物，以得到經(jīng)過(guò)消毒并經(jīng)過(guò)噴霧干燥的產(chǎn)物，該產(chǎn)物富含對(duì)抗所述病原體的免疫球蛋白、特別是IgY。合適的方法可參見(jiàn)US5,585,098。
實(shí)施例5還可根據(jù)Juneja L.R.的方法(Egg Yolk Lipids，CRC Press 1997，0-8493-4005，p.73-98)提取根據(jù)實(shí)施例4的液體蛋，以得到液體部分以及富含IgY的部分。
實(shí)施例6制造液體產(chǎn)物，每400ml包含16g全乳蛋白8g 紅花油2g 玉米油1g 經(jīng)過(guò)除臭的魚(yú)油8g 卵磷脂1g 膽固醇(以液體混合物計(jì)為5重量％)30g麥芽糖糊精還包括根據(jù)食品常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)量的維生素、礦物質(zhì)、以及微量元素。
實(shí)施例7用于手術(shù)患者的制劑制造液體制劑，每400ml包含20g蛋清蛋白24g蛋黃油
25g 麥芽糖糊精800μg葉酸100μg維生素B123mg 吡多辛40mg 硫酸鋅還包括根據(jù)食品常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)量的維生素、礦物質(zhì)、以及微量元素。
實(shí)施例8用于癌癥患者的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑具有咸和草藥味道的小吃棒每25g的棒包含6g卵脂質(zhì)，每100g脂肪酸包含＞0.5g DHA和＞1.7g AA400μg葉酸5μg cyanobalamine2mg吡多辛2g卵蛋白200μm碳酸鎂15mg氧化鋅100mg硫酸鈣約2g形成咸或草藥味道的添加劑用葡萄糖糖漿補(bǔ)充至25g，然后按照本領(lǐng)域已知的方法制成棒。
實(shí)施例9用于早產(chǎn)兒的配方，根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制成易于使用的配方，每
100ml包含1.2％的全乳蛋白3.0％由以下成分組成的部分78％的植物油混合物20％的大豆磷脂2％的膽固醇8％的碳水化合物，包括乳糖80μg RE維生素A20μg維生素K實(shí)施例10用于嚴(yán)重腹瀉患者的制劑具有咸和草藥味道的小吃棒每25g的棒包含8g全蛋粉400μg葉酸5μg cyanobalamin2mg吡多辛200μm碳酸鎂15mg氧化鋅100mg硫酸鈣0.2mg維生素K0.2mg RE維生素A約2g形成咸或草藥味道的添加劑用葡萄糖糖漿補(bǔ)充至25g，然后按照本領(lǐng)域已知的方法制成棒。
實(shí)施例11管飼藥物，每100ml包含蛋白質(zhì) 7.5g碳水化合物 14.5g脂肪 4.17g，包括磷脂 1g膽固醇 21mg還包括根據(jù)食品常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)量的維生素、礦物質(zhì)、膽堿、以及微量元素。
權(quán)利要求
1.磷脂、甘油三酯與膽固醇或其前體的組合在制備用于治療和/或預(yù)防敗血癥的腸道組合物中的應(yīng)用。
2.一種包含磷脂、甘油三酯和膽固醇的腸道組合物，其中該組合物包含占組合物重量45-91％的磷脂。
3.一種包含磷脂、甘油三酯和膽固醇的腸道組合物，其中膽固醇在組合物中的量為組合物重量的0.5-3％。
4.如權(quán)利要求1-3所述的應(yīng)用或組合物，其中磷脂的給藥量為每次給藥0.01-1.5g/kg體重。
5.如權(quán)利要求1-4所述的應(yīng)用或組合物，其中磷脂為磷脂混合物的形式，優(yōu)選包括磷脂酰膽堿以及以下組中的一種或多種磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酸。
6.如權(quán)利要求1-5所述的應(yīng)用或組合物，其中甘油三酯包含至少50重量％的長(zhǎng)鏈脂肪酸、特別是長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸。
7.如權(quán)利要求1-6所述的應(yīng)用或組合物，其中甘油三酯選自于植物油、海洋生物油、以及它們的混合物，優(yōu)選選自于豆油、玉米油、橄欖油、葵花油、芝麻油、紅花油、麥芽油、花生油、月見(jiàn)草油、蛋黃油、魚(yú)油、海藻油以及它們的混合物。
8.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中甘油三酯的給藥量為0.01-1g/kg體重。
9.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中膽固醇及其前體選自于膽固醇和膽固醇酯及其酯和/或鹽。
10.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中膽固醇或其前體的每次給藥量為2-120mg/kg體重。
11.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中膽固醇∶磷脂∶甘油三酯的比例為1∶3-80∶3-90，優(yōu)選為1∶3-20∶3-90，更優(yōu)選為1∶6-16∶6-60。
12.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中膽固醇∶磷脂∶甘油三酯的比例為1∶20-80∶3-80，更優(yōu)選1∶20-75∶20-75。
13.如權(quán)利要求1或4-12之一所述的應(yīng)用，其中組合物包含占組合物重量45-91％的磷脂。
14.如權(quán)利要求1或4-13之一所述的應(yīng)用，其中膽固醇在組合物中的含量為組合物重量的0.5-3％。
15.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中組合物包含蛋或部分蛋。
16.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中組合物進(jìn)一步包含免疫球蛋白、優(yōu)選IgY。
17.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中組合物包含大豆卵磷脂。
18.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中腸道組合物是口服藥物、管飼藥物或者嬰兒配方，優(yōu)選是管飼藥物。
19.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中組合物包含至少1.0g的蛋白質(zhì)或肽。
20.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其中組合物進(jìn)一步包含一種或多種脂溶性物質(zhì)，優(yōu)選選自于維生素K(甲基萘醌類)、泛醌、類胡蘿卜素如維生素A、特殊的脂肪酸如結(jié)合亞油酸、硫辛酸和維生素D以及它們的混合物。
21.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其是用于治療和/或預(yù)防內(nèi)毒素血癥、敗血癥或菌血癥。
22.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其是用于治療經(jīng)歷大手術(shù)的患者、嚴(yán)重疾病的患者、罹患炎性腸道疾病(IBD)的患者、罹患HELLP綜合癥的患者、細(xì)菌轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)增強(qiáng)以及通常敗血癥的患者，特別是那些患有大的外傷、燒傷、肺炎、尤其是細(xì)菌導(dǎo)致的或者伴隨有細(xì)菌感染的、褥瘡、在放療/化療期間或者免疫系統(tǒng)不全的患者。
23.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其是用于治療允許攝入有限體積的患者，特別是罹患神經(jīng)性厭食、癌癥或AIDS的患者以及老年患者。
24.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其是用于治療新生兒。
25.如前述任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用或組合物，其是用于在屠宰之前治療農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物或者幼豬，優(yōu)選治療幼豬。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包含磷脂、甘油三酯和膽固醇的腸道組合物，其可用于治療敗血癥。用本發(fā)明的組合物，可維持自然水平的乳糜微粒，特別是在與淋巴樣組織有關(guān)的腸道(GALT)中，這確保體內(nèi)釋放的大多數(shù)LPS和/或LTA能夠被中和，大大減少了局部形成高濃度LPS和/或LTA的風(fēng)險(xiǎn)以及由此形成敗血癥的風(fēng)險(xiǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/203GK1561218SQ02819203
公開(kāi)日2005年1月5日 申請(qǐng)日期2002年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月27日
發(fā)明者羅伯特·約翰·約瑟夫·哈格曼, 格爾斯克·斯皮爾曼斯, 阿德里安烏斯·約翰內(nèi)斯·瑪麗亞·弗里斯埃瑪 申請(qǐng)人:努特里奇亞有限公司