專利名稱：一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑及制備方法，屬于動(dòng)物用病毒活疫苗制造領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在疫苗制品的領(lǐng)域中，凍干保護(hù)劑及其制備工藝是活疫苗生產(chǎn)中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，對(duì)疫苗的保存、運(yùn)輸和使用有很大影響。目前，在我國獸用疫苗中，活的凍干疫苗占相當(dāng)大的比例，國內(nèi)常用的保護(hù)劑主要為牛奶、蔗糖、明膠等，組方簡(jiǎn)單，保護(hù)功能差。如果在 2°C-8°C條件下，保存期只有4-6個(gè)月，多需要在-15°C以下保存。加上國內(nèi)傳統(tǒng)的獸用生物制品保護(hù)劑的研制相對(duì)滯后，使成品疫苗的長期保存和運(yùn)輸受限。所以，耐熱凍干保護(hù)劑的研究是非常急需的，在20世紀(jì)80年代，發(fā)達(dá)國家就已開始進(jìn)行耐熱凍干保護(hù)劑的研究。 我國在耐熱凍干保護(hù)劑方面的研究起步較晚，但現(xiàn)在在這方面的研究取得了一定的成果， 傅德霞等(1997)將明膠蔗糖保護(hù)劑用于雞新城疫弱毒凍干苗和雞傳染性支氣管炎弱毒凍干苗，其免疫效果與牛奶蔗糖保護(hù)劑基本相同。王仁耕等(1989)對(duì)雞新城疫I系凍干苗的耐熱保護(hù)劑的研究表明，2_8°C保存M個(gè)月能夠達(dá)到《規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)，主要為牛奶、蔗糖、谷氨酸鈉、甘露醇等。沈銘強(qiáng)等(1990)對(duì)狂犬病凍干苗耐熱保護(hù)劑進(jìn)行了研究，以蔗糖、牛奶、 EDTA、甘露醇等材料為主，經(jīng)2-8°C保存有效期為一年。李道義等(1996)進(jìn)行了豬瘟凍干苗保護(hù)劑的研究，主要成分為CH0、谷氨酸鈉、牛血清、脫脂牛奶等，4-8°C保存15-M個(gè)月， 250C 100天，37°C 7天，經(jīng)檢驗(yàn)，物理性狀、真空度、水分、安全效力等測(cè)定達(dá)部頒標(biāo)準(zhǔn)。王棟等000 已經(jīng)研制出一種耐熱凍干保護(hù)劑，用此保護(hù)劑凍干的疫苗在2°C-8°C條件下，保存M個(gè)月以后，病毒滴度無明顯下降，但仍未達(dá)到全面推廣應(yīng)用。由于凍干保護(hù)劑可影響生物制品的質(zhì)量、效價(jià)和穩(wěn)定性，改變生物制品的生產(chǎn)工藝，提高產(chǎn)品預(yù)測(cè)能力并增大產(chǎn)品批次間的穩(wěn)定性，并且耐熱凍干保護(hù)劑有免疫活性但無藥理活性，可在凍干和保存時(shí)維持疫苗的穩(wěn)定性，初次干燥時(shí)在適宜的溫度下疫苗不倒塌， 企業(yè)低成本即可獲取。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新型豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑及其制備方法， 降低保護(hù)條件，延長使用期并降低使用成本。一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑，以注射用水為溶劑配制溶液，各組分質(zhì)量百分比濃度為明膠3%、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1%、海藻糖3%、甘氨酸3%、山梨醇3%、谷氨酸鈉2% ；均為干物質(zhì)組份。上述豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑的制備方法，(1)對(duì)可高壓滅菌的明膠、 聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121°C滅菌15分鐘；(2)將不耐高溫的物質(zhì)組份山梨醇、谷氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔徑0. 22 μ m的濾膜過濾除菌；然后將(1)、(幻混合，即為耐熱凍干保護(hù)劑，凍干保護(hù)劑中各組分質(zhì)量百分比濃度為明膠3 %、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1 %、海藻糖3%、甘氨酸 3%、山梨醇3%、谷氨酸鈉2%。使用時(shí)按1 1體積比加入病毒抗原液中，分裝后進(jìn)行冷凍干燥。本發(fā)明的活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑，降低保存條件，延長保存期，降低使用成本及其提高疫苗的免疫效力，使活疫苗的儲(chǔ)存、運(yùn)輸和使用都更方便、經(jīng)濟(jì)。本發(fā)明的的制劑在 2_8°C條件下可保存M個(gè)月以上，能達(dá)到《中華人民共和國獸醫(yī)生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定的各項(xiàng)指標(biāo)。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。一種新型豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑，配比為明膠3g、聚乙烯吡咯烷酮 5g、脫水果糖lg、海藻糖3g、甘氨酸3g、山梨醇3g、谷氨酸鈉2g，注射用水80g，可得到IOOg 豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑。豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑的制備方法，(1)對(duì)可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121°C滅菌15分鐘；( 將不耐高溫的物質(zhì)組份山梨醇、谷氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔徑 0.22 μ m的濾膜過濾除菌；分別完成除菌后將(1)、(2)兩種成分混合，即為耐熱凍干保護(hù)劑，使用時(shí)按1 1體積比例加入病毒抗原液中，分裝后進(jìn)行冷凍干燥。技術(shù)參數(shù)及檢測(cè)方法1.產(chǎn)品的物理性狀、無菌檢驗(yàn)、支原體檢驗(yàn)、外源病毒檢驗(yàn)、安全檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定和真空度測(cè)定按《中華人民共和國獸醫(yī)生物制品規(guī)程》的方法及標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。2.凍于周期不超過48h。3.病毒含量測(cè)定及標(biāo)準(zhǔn)用家兔效檢按瓶簽注明頭份，用生理鹽水將每頭份疫苗稀釋750倍或按實(shí)含抗原量稀釋適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，耳靜脈注射家兔2只，每只lmL，根據(jù)家兔體溫變化來確定疫苗的效價(jià)，產(chǎn)品的效力達(dá)5萬倍合格。4、試制3批由本耐熱凍干保護(hù)劑凍干的產(chǎn)品，并設(shè)常規(guī)5%蔗糖脫脂乳保護(hù)劑對(duì)照組，置于37°C、2-8°C條件下保存，不同時(shí)間取樣，測(cè)定病毒含量及其物理性狀等。結(jié)果見表；表1本發(fā)明的豬瘟脾淋源活疫苗凍干后物理性狀等參數(shù)測(cè)定
權(quán)利要求
1.一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑，其特征在于，以注射用水為溶劑配制溶液， 各組分質(zhì)量百分比濃度為明膠3%、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1%、海藻糖3%、甘氨酸3%、山梨醇3%、谷氨酸鈉2% ；均為干物質(zhì)組份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑的制備方法，其特征在于，(1)對(duì)可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121°C滅菌15分鐘；( 將不耐高溫的物質(zhì)組份山梨醇、谷氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔徑0. 22 μ m的濾膜過濾除菌；然后將(1)、(2)混合，即為耐熱凍干保護(hù)劑，凍干保護(hù)劑中各組分質(zhì)量百分比濃度為明膠3%、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1%、海藻糖3%、甘氨酸3%、山梨醇3%、谷氨酸鈉2%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑，以注射用水為溶劑配制溶液，各組分質(zhì)量百分比濃度為明膠3％、聚乙烯吡咯烷酮5％、脫水果糖1％、海藻糖3％、甘氨酸3％、山梨醇3％、谷氨酸鈉2％；均為干物質(zhì)組份。(1)對(duì)可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121℃滅菌15分鐘；(2)將不耐高溫的物質(zhì)組份山梨醇、谷氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔徑0.22μm的濾膜過濾除菌；然后將(1)、(2)混合，即為耐熱凍干保護(hù)劑。本發(fā)明是一種低成本、長效制品及制備方法，為獸醫(yī)生物制品使用解決了長久以來運(yùn)輸、儲(chǔ)存的高成本問題。
文檔編號(hào)A61K39/187GK102526751SQ201210040109
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2012年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月22日
發(fā)明者單虎, 楊瑞梅, 王述柏, 秦曉冰, 范懿娜, 韓先杰, 黃娟 申請(qǐng)人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)