專利名稱：一種甾體化合物、其制備方法及含有它們的藥物組合物和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種新的甾體化合物。本發(fā)明還涉及該化合物的制備方法，以及所述化合物在制備用于預(yù)防和/或治療高血脂、肥胖病和腦中風(fēng)的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)中，多份文獻(xiàn)公開(kāi)了麥冬(化力iopO卵/7力/W/7/c"S)中分離得到皂苷的方法，
以及所述皂苷的用途。例如，CN 200610014213. 5公幵的"一種麥冬總皂苷的制備方法，，，CN 200710024566. 8公開(kāi)的"麥冬皂苷D在制備調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因藥物中的應(yīng)用"，CN 200710024568. 7公開(kāi)的"麥冬皂苷D在制備調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡基因藥物中的應(yīng)用"，CN 200710024567. 2公開(kāi)的"麥冬皂苷D在制備調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞功能基因藥物中的應(yīng)用"，CN 200710024569.1公開(kāi)的"麥冬皂苷D在制備調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞周期基因藥物中的應(yīng)用"，CN 200810022093. 2公開(kāi)的"麥冬皂苷D作為組織因子途徑抑制劑的醫(yī)藥用途"。但均未涉及有關(guān)可治療高血脂和肥胖病的新的甾體化合物(14， 16-二羥基-薯蕷皂苷元)、制備方法及以此甾體化合物獲取的藥物組合，并應(yīng)用于治療高血脂和肥胖病的在先專利申請(qǐng)。
進(jìn)入二十一世紀(jì)，心血管疾病給人類帶來(lái)新的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，全球每年因心血管病死亡約1700萬(wàn)人，成為當(dāng)今世界對(duì)人類健康造成威脅的重大疾病。其中髙膽固醇血癥是主要原因。
在我國(guó)，隨著經(jīng)濟(jì)水平的發(fā)展，人民生活水平提高、飲食結(jié)構(gòu)改變、以及人口迅速老齡化，髙膽固醇血癥發(fā)病率迅速上升，成為全球上升較快的國(guó)家，超過(guò)許多發(fā)達(dá)國(guó)家。衛(wèi)生部心血管病防治研究中心發(fā)布了的《中國(guó)心血管病報(bào)告2005》顯示，血脂異常已達(dá)到1.6億人，超重2億人、肥胖6000萬(wàn)人、每年用于治療該病的醫(yī)療費(fèi)用增長(zhǎng)速度接近我國(guó)國(guó)內(nèi)生產(chǎn)總值增長(zhǎng)速度的2倍，給社會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
然而，可以用于治療高血脂和肥胖病人的藥物并不多。有效治療高血脂藥物之一的他汀類，越來(lái)越多的證據(jù)表明，其安全性問(wèn)題也已經(jīng)受到關(guān)注。有效治療肥胖病的藥物酚氟拉明因?yàn)榘踩詥?wèn)題已經(jīng)退出市場(chǎng)，現(xiàn)有臨床主要藥物西布曲明和奧利司他，也因效果和安全性受到關(guān)注。
自上世紀(jì)70年代之后，應(yīng)用中藥治療高血脂和肥胖的報(bào)道日益增多，且取得一定療效。其優(yōu)越性表現(xiàn)在能夠明顯改善患者癥狀及生活質(zhì)量，并通過(guò)多靶點(diǎn)作用發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，但成分不清楚，作用機(jī)理不明確，療效不穩(wěn)定。
綜上可見(jiàn)，理想的治療高血脂和肥胖病藥物仍缺乏，因此， 一種新的可治療高血脂和肥胖病的化合物仍是人們的尋找方向。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題，即提供一種可治療高血脂和肥胖病的新的甾體化合物及其制備方法；本發(fā)明的另一目的是提供以此甾體化合物獲取的藥物組合，并將其應(yīng)用于治療高血脂和肥胖病。
本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)， 一種由民間傳統(tǒng)中草藥麥冬中分離提取出的甾體化合物具有降血脂、降低機(jī)體總脂肪和抗急性腦缺血等作用，從而為開(kāi)發(fā)一種新的治療高血脂，調(diào)節(jié)肥胖病人體脂和抗腦中風(fēng)藥物提供了可能，本發(fā)明人基于該發(fā)現(xiàn)而得以完成本發(fā)明。
發(fā)明概述
因此，本發(fā)明第一方面提供一種結(jié)構(gòu)式如式I的甾體化合物
或其結(jié)晶型，無(wú)定型，混合提取物。上述式I的甾體化合物，其名稱為14， 16-二羥
基-薯蕷皂苷元(14， 16-Diosgenifi);其化學(xué)式為CsA^ 。
本發(fā)明第二方面提供了制備所述式I甾體化合物的方法，其特征在于，包括如下步驟(1)取麥冬，按7倍重量加水煮沸后，在80-90。C保持2小時(shí)，濾過(guò)，藥渣按4倍重量加水煮沸后在80-9(TC保持1. 5小時(shí)，濾過(guò)，藥渣再按4倍重量，加水煮沸后在80-9(TC保持l小時(shí)，濾過(guò)；再合并3次濾液得到提取液；
(2)將步驟(1)所得的提取液按O. 06-0.13BV/分鐘通過(guò)裝有100g處理好的大孔吸附樹(shù)脂柱，吸附完畢，用8(m乙醇洗脫，洗脫后的乙醇液薄膜減壓濃縮，至無(wú)乙醇，再過(guò)濾、干燥得到干燥物；減壓濃縮條件為真空度IO. 7kPa ,溫度80-90°C;
(3) 取步驟(2)所獲干燥物，按I:IO (重量比)加水溶解，再加入36%鹽酸至濃度為1.8mol/L,在85-95'C下，水解反應(yīng)時(shí)間2-6小時(shí)，濾過(guò)，收集水不溶物；
(4) 采用十八垸基硅烷鍵合硅膠柱，流動(dòng)相乙腈-水之比為35-45 : 65-55，檢測(cè)波長(zhǎng)208nm，室溫條件下對(duì)步驟(3)獲得的水不溶物進(jìn)行樣品制備，收集含14， 16-二羥基-薯蕷皂苷元的樣品溶液；
(5) 對(duì)步驟(4)獲得的樣品溶液進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮條件為真空度10. 7kPa ,溫度80-9(TC;
(6) 然后，對(duì)步驟(5)的減壓濃縮物，在80-90'C條件下，干燥3-5小時(shí)；
(7) 最后，獲得14， 16-二羥基-薯辣皂苷元(14， 16-Diosgenin)。本發(fā)明第三方面提供了所述式I的用途，其特征在于，將所述式I用于制備降總膽固
醇藥物。將所述式I用于用于制備降總甘油三脂藥物。將所述的式I用于制備降低低密度
脂蛋白膽固醇藥物。將所述的式I用于制備升高高密度脂蛋白膽固醇藥物。將所述的式I
用于制備降低機(jī)體總脂肪的藥物。將所述的式I用于制備抗腦缺血的藥物。
本發(fā)明第四方面提供了所述的式I的藥物組合物，其包含預(yù)防和/或治療有效量的至少一種本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述的式I化合物，和任選的藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。
根據(jù)本發(fā)明第四方面所述的藥物組合物，其為單位劑量形式。其中所述的單位劑量形
式選自片齊'j、膠囊劑、顆粒劑、透皮貼劑、軟膏劑、凝膠劑、栓劑、口服溶液、口服混
懸液、注射用乳劑、口服乳劑等、緩釋片劑、控釋片劑等。根據(jù)本發(fā)明第四方面所述的藥
物組合物，其中所述的式I甾體化合物在所述單位劑量形式中的有效量，以式I化合物
(C27H4605)計(jì)，為10 1000mg。根據(jù)本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物，優(yōu)選地，其中所
述的式I甾體化合物在所述單位劑量形式中的有效量，以式I化合物(C27H4605)計(jì)，為20
800mg。根據(jù)本發(fā)明第四方面所述的藥物組合物，進(jìn)一步優(yōu)選地，其中所述的式I甾體化合
物在所述單位劑量形式中的有效量，以式I化合物(CMH4605)計(jì)，為25 500mg。根據(jù)本發(fā)
明第四方面所述的藥物組合物，再進(jìn)一步優(yōu)選地，其中所述的式I甾體化合物在所述單位
劑量形式中的有效量，以式I化合物(C27H4605)計(jì)，為30 250mg。根據(jù)本發(fā)明第四方面所
述的藥物組合物，更進(jìn)一步優(yōu)選地，其中所述的式I甾體化合物在所述單位劑量形式中的
有效量，以式I化合物(C27H4605)計(jì)，為80 150mg。根據(jù)本發(fā)明第四方面所述的藥物組合物，最后優(yōu)選地，其中所述的式I甾體化合物在所述單位劑量形式中的有效量，以式I化合物(C27H4605)計(jì)，為30mg。
如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"治療"具有其一般含義，并且在本文特別地是指對(duì)高血脂患者采用本發(fā)明的式I化合物或藥物組合物進(jìn)行處理，以期對(duì)所述高血脂患者產(chǎn)生治療、治愈、緩解、減輕等作用。類似地，如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"預(yù)防"具有其一般含義，并且在本文特別地是指對(duì)可能罹患本發(fā)明所述高血脂或者對(duì)本發(fā)明所述高血脂具有罹患風(fēng)險(xiǎn)者采用本發(fā)明的式I化合物或藥物組合物進(jìn)行處理，以期對(duì)所述高血脂產(chǎn)生防止、預(yù)防、阻止、隔斷等作用。
如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)可接受的"通常是指制藥領(lǐng)域可使用，對(duì)產(chǎn)品或者對(duì)哺乳動(dòng)物無(wú)害，或具有合理的或可接受的利益/風(fēng)險(xiǎn)比。
如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"載體"和"賦形劑"可以是制藥領(lǐng)域中任何常規(guī)的載體和賦形劑。具體的載體和賦形劑的選擇將取決于用于治療特定患者的給藥方式或疾病類型和狀態(tài)。用于特定給藥模式的合適藥物組合物的制備方法完全在藥物領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)范圍內(nèi)。例如，可以作為藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的載體、賦形劑、稀釋劑、填充劑、溶劑、支持劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體和潤(rùn)滑劑等。必要時(shí)，還可以包括香味劑、防腐劑和甜味劑等。
如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"高血脂"、"肥胖病"和"腦中風(fēng)"具有其醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一般含義。
如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"有效量"是指本發(fā)明所述活性成份的量，該量可以對(duì)本發(fā)明所述高血脂進(jìn)行有效的預(yù)防和/或治療。
如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"藥物組合物"或"藥盒產(chǎn)品"具有其一般含義，并且在本文中可以狹義地指藥物制劑或藥物劑型，其可以包含或不包含藥用輔料?？刹捎弥扑庮I(lǐng)域特別是制劑領(lǐng)域中的常規(guī)技術(shù)，來(lái)制備本發(fā)明的藥物組合物或復(fù)方藥物組合。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物，其為可以適用于口服給藥、胃腸外給藥或局部給藥、外用給藥的藥物劑型。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物，所述的藥物劑型包括但不限于片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑、注射液、注射用粉劑、透皮貼劑、軟膏劑、凝膠劑、栓劑、口服溶液、口服混懸液、注射用乳劑、口服乳劑等、緩釋片劑、控釋片劑等。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
當(dāng)本發(fā)明的藥物組合物或藥盒產(chǎn)品作為藥物施用于受試動(dòng)物患者時(shí)，它們可以以其本身給予，即不加任何的上述藥學(xué)可接受的載體，將本發(fā)明的藥物組合物以原形直接施用于患者；或者可以是以含有例如1一99%(更優(yōu)選例如10—90%)的式I化合物的與藥學(xué)可接受的載體組合成藥物組合物后給予人或動(dòng)物。
在本發(fā)明的式I化合物或藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的活性成分，其實(shí)際的劑量水平和施用的時(shí)程可以改變，以便獲得一種活性成分的量，該量對(duì)于特定的受試個(gè)體、組合物和施用方法而言，可以有效地獲得期望的治療應(yīng)答，而對(duì)受試個(gè)體無(wú)毒性。當(dāng)然，可改變本發(fā)明或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物的實(shí)際劑量水平，以便所得的活性化合物量能有效針對(duì)具體患者、組合物和給藥方式得到所需的治療反應(yīng)。應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明式I化合物或藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物的總?cè)沼昧宽氂芍髟\醫(yī)師在可靠的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)作出決定。對(duì)于任何具體的患者，具體的治療有效劑量水平須根據(jù)多種因素而定，所述因素包括所治療的障礙和該障礙的嚴(yán)重程度；所采用的具體化合物的活性；所采用的具體組合物；患者的年齡、體重、 一般健康狀況、性別和飲食；所采用的具體化合物的纟合藥時(shí)間、給藥途徑和排泄率；治療持續(xù)時(shí)間；與所采用的具體化合物組合使用或同時(shí)使用的藥物；及醫(yī)療領(lǐng)域公知的類似因素。
本發(fā)明的式I化合物或藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物，如上文戶萬(wàn)述，它們的具體劑量可由本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員根據(jù)已有知識(shí)來(lái)確定。如果需要，有效的曰劑量可出于給藥目的分成多劑量；因此，單劑量組合物或藥物制劑單元可含有這種數(shù)量或其分劑量，以構(gòu)成日劑量。對(duì)于本發(fā)明藥盒產(chǎn)品而言，其中的式I化合物依照一定的時(shí)間順序施用于受試個(gè)體，例如將二者同時(shí)施用、以任選順序的間隔施用等。
本發(fā)明藥物組合物中的式I化合物可特別專門(mén)配制成以固體或液體形式f共口服給藥。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物可以與一種或多種無(wú)毒生理可耐受或可接受的稀釋劑、載體、輔料或媒介物(本文可將它們統(tǒng)稱為載體)一起配制成組合物，以固體或液體形式口服給藥或局部給藥等等。
本發(fā)明藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物也可含有輔料，如防腐齊U、濕潤(rùn)劑、乳化劑和分散劑。通過(guò)各種抗細(xì)菌劑和抗真菌劑，例如尼泊金酯類、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可確保防止微生物的作用。還期望包括等滲劑，例如糖類、氯化鈉等。通過(guò)使用能延遲吸收的物質(zhì)，例如單硬脂酸鋁和明膠。
混懸劑中除活性化合物外還可含有懸浮劑，例如乙氧基化異十八醇、聚氧乙烯山梨醇和聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤(rùn)土、瓊脂和黃蓍膠或者這些物質(zhì)的混合物等。
本發(fā)明藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物可以呈供口服給藥的固體劑型，所述供
口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在此類固體劑型中，活性
化合物可與至少一種惰性的藥物可接受賦形劑或載體如檸檬酸鈉或磷酸二f丐和/或以下物質(zhì)混合a)填充劑或增量劑如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合劑如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯樹(shù)膠；C)保濕劑如甘油；d)崩解劑如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉；e〉溶液阻滯劑如石蠟；f)吸收加速劑如季銨化合物；g)濕潤(rùn)劑如鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯；h)吸附劑如高嶺土和膨潤(rùn)土，以及潤(rùn)滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉和它們的混合物。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，所述劑型中也可包含緩沖劑。
本發(fā)明藥物組合物或藥盒產(chǎn)品中的式I化合物可以呈供口服給藥的液體劑型，所述供口服給藥的液體劑型包括藥物可接受的乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。液體劑型除含有活性化合物外還可含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，例如水或其他溶劑，增溶劑和乳化劑例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油類(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫糠醇(tetrahydrofurfuryl alcohol)、聚乙二醇和脫水山梨糖醇的脂肪酸酯及它們的混合物。
本發(fā)明的式I化合物，經(jīng)過(guò)理化性質(zhì)測(cè)定，紫外、紅外、質(zhì)譜和核磁共振波譜解析，最終確證其結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明提供的式I化合物的藥物組合物和藥盒產(chǎn)品經(jīng)過(guò)藥效學(xué)、毒理學(xué)、制備工藝、質(zhì)量檢測(cè)和穩(wěn)定性考察等研究。本發(fā)明人經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明式I所示化合物及其
藥物組合與臨床現(xiàn)有主流藥物比較，還具有下述優(yōu)點(diǎn)
1. 本發(fā)明式I相同劑量本對(duì)高血脂患者，優(yōu)于化學(xué)藥物他汀類藥物。
2. 本發(fā)明式I相同劑量對(duì)動(dòng)物體重和體脂降低效果，優(yōu)于化學(xué)藥物西布曲明。
3. 本發(fā)明式I還具有抗急性腦缺血，抗氧化作用。
4. 本發(fā)明式I為天然產(chǎn)品，安全性好，LD5o為，大鼠飼喂本品3個(gè)月，也未見(jiàn)任何中毒反應(yīng)，有望在制備具有治療高血脂、減肥和腦中風(fēng)的藥物中得到應(yīng)用。
對(duì)于上述優(yōu)點(diǎn)，發(fā)明人將在后述具體實(shí)施方式
里面，還將列舉具體的實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行解釋、說(shuō)明和驗(yàn)證。
具體實(shí)施例方式
為表明本發(fā)明效果，下面通過(guò)具體的實(shí)施例或試驗(yàn)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。但是，應(yīng)當(dāng)理解為，這些實(shí)施例或試驗(yàn)例僅僅是用于更詳細(xì)具體地說(shuō)明之用，而不應(yīng)理解為用于以任何形式限制本發(fā)明。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在 此作盡可能詳細(xì)描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚在下文中，如果未特別說(shuō)明，本發(fā)明所用 材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的。
本發(fā)明的甾體化合物制備實(shí)例
本發(fā)明化合物是從民間傳統(tǒng)中草藥麥冬中分離獲得，經(jīng)過(guò)理化性質(zhì)測(cè)定，紫外、 紅外、質(zhì)譜和核磁共振波譜解析，最終確證該化合物為甾體化合物，其化學(xué)名為14， 16-二羥基薯蕷皂苷元，又名雙醇薯蕷皂素(14， 16-Dihydrodiogenin)，化學(xué)結(jié)構(gòu)如 下
I
其中，對(duì)于如何慈寧宮麥冬中分離出該化合物，具體包括以下步驟
步驟l:取麥冬1000kg，置萃取釜中，按7倍重量加水煮沸后在80-9(TC保持2小時(shí)，濾 過(guò)，藥渣按4倍重量，加水煮沸后在80-90。C保持1.5小時(shí)，濾過(guò)，藥渣再按4倍重量，加水 煮沸后在80-9(TC保持l小時(shí)，濾過(guò)。合并3次濾液；
步驟2:將步驟(1)提取液按0.06-0. 13BV/分鐘通過(guò)裝有100kg處理好的大孔吸附樹(shù) 脂柱，吸附完畢，用50升80%乙醇洗脫，洗脫后的乙醇液薄膜減壓濃縮(真空度IO. 7kPa ， 溫度80-90°C)至無(wú)乙醇，過(guò)濾，干燥；
步驟3:取步驟(2)所獲干燥物，按I:IO (重量比)加水溶解，再加入36%鹽酸至濃 度為1.8mol/L，在85-95。C下，水解反應(yīng)時(shí)間3. 5小時(shí)，濾過(guò)，收集水不溶物；
步驟4:采用十八垸基硅烷鍵合硅膠柱，流動(dòng)相甲醇-水之比為35-65 : 65-35，檢測(cè)波長(zhǎng) 208nm，室溫條件下，對(duì)步驟3獲得的水不溶物進(jìn)行樣品制備，收集含14， 16-二羥基-薯蕷 皂苷元的樣品溶液；
步驟5:對(duì)上述收集樣品溶液進(jìn)行減壓濃縮；
步驟6:在80-9(TC溫度條件下，對(duì)經(jīng)減壓濃縮的樣品，進(jìn)行干燥；
步驟7:最后獲得不低于95%的14， 16-二羥基-薯蕷皂苷元。本發(fā)明化合物是從民間傳統(tǒng)中草藥麥冬中分離獲得，經(jīng)過(guò)理化性質(zhì)測(cè)定，紫外、紅外、 質(zhì)譜和核磁共振波譜解析，最終確證該化合物為甾體化合物，其化學(xué)名為14， 16-二羥基 薯蕷皂苷元，又名雙醇薯蕷皂素(14， 16-Dihydrodiogenin)，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下
I
雙醇薯蕷皂素制劑例l:片劑的制備
以式I為原料，制備雙醇薯蕷皂素片劑，1000粒片劑的配方如下:
雙醇薯蕷皂素片(以(:2孔605計(jì))淀粉
3070
將原、輔料混合，研成細(xì)粉，過(guò)100目篩，按配方取量，壓片成型，包裝即可。
雙醇薯蕷皂素制劑例2:雙醇薯蕷皂素膠囊的制備 以式I為原料，制備雙醇薯蕷皂素膠囊，1000粒膠囊的配方如下
雙醇薯蕷皂素膠囊(以(:27仏605計(jì))淀粉
3070
將原、輔料混合，研成細(xì)粉，過(guò)ioo目篩，按配方取量，制粒、包裝即可。
雙醇薯蕷皂素制劑例3:雙醇薯蕷皂素軟膠囊的制備
以式I為原料，制備雙醇薯蕷皂素軟膠囊制劑，1000粒膠囊的配方如下:
雙醇薯蕷皂素(以C27H4605計(jì))30g
聚乙二醇500ml
將各成分混合，混合配制成藥液，另取明膠100g，甘油55ml，水120ml，混合配成明 膠液，在28土2'C，相對(duì)濕度40%條件下，藥液與明膠用自動(dòng)旋轉(zhuǎn)扎囊機(jī)制成1000粒；并且 在28土2"C，相對(duì)濕度40%條件下，將膠囊干燥20小時(shí)，即得。生物學(xué)實(shí)施例l:雙醇薯蕷皂素降血脂作用
采用脂代謝紊亂模型法，大鼠在SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)喂飼基礎(chǔ)詞料觀察7天后。禁食 16小時(shí)采尾血測(cè)定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低 密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。根據(jù)TC水平將動(dòng)物隨機(jī)分成四組，每組10只。3個(gè)劑量組 在給予高脂飼料的同時(shí)給予不同劑量的受試物。模型對(duì)照組給予高脂飼料和蒸餾水。每天 l次連續(xù)給予30天。每周稱l次體重，調(diào)整灌胃量。于實(shí)驗(yàn)結(jié)束禁食16小時(shí)，取血清測(cè)定TC、 TG、 HDL-C和LDL-C的含量。陽(yáng)性藥物為絡(luò)伐他汀。試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSSll. O軟件包處理。
表l雙醇薯蕷皂素對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響(X土S)
組別劑量動(dòng)物數(shù) TCTGHDL-CLDL-C
(mg/kg)(只)(mmol/L)(mmol/U(mmol/L)(mmol/L)
正常對(duì)照組-101.50±0. 280. 35 ±0. 050. 48±0. 100. 85 ±0. 08
模型組-104. 45 ±0. 980. 54 ±0. 420. 58±0. 122. 89±0. 60
陽(yáng)性藥物組30102. 76 ±0. 36*0. 35±0.170. 63 ±0. 091.64±0. 43
試驗(yàn)藥物組15102. 57 ±0. 62"0. 26 ±0.11**0. 57±0. 071.32 ±0.24
30102. 36 ±0. 73**0. 26 ±0. 10**0. 85 ±0. 06"0. 92 ±0. 02*
60102. 56 ±0. 26**0. 29 ±0. 02'0. 65±0.0440.81±0.14"
注與模型組比較承P〈0 01, * P<0. 05。
表1結(jié)果提示，雙醇薯蕷皂素組試驗(yàn)后的膽固醇、甘油三酯與低密度脂蛋白膽固醇試
驗(yàn)后的模型對(duì)照組比較均有極顯著性降低，同時(shí)還能提高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含 量，并與試驗(yàn)后的模型對(duì)照組比較有極顯著升高。
30例高血脂患者，每天試食本發(fā)明式I 30mg/人，30天后檢査，所有試食人員膽固醇 和甘油三酯全部降至正常水平。
生物學(xué)實(shí)施例2:雙醇薯蕷皂素對(duì)單純營(yíng)養(yǎng)性肥胖動(dòng)物體重和體脂影響
采用營(yíng)養(yǎng)型大鼠和小鼠模型，進(jìn)行雙醇薯蕷皂素對(duì)單純營(yíng)養(yǎng)性肥胖動(dòng)物體重和體脂 影響觀察，陽(yáng)性藥物為西布曲明。試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS11.0軟件包處理。 結(jié)果提示雙醇薯蕷皂素能顯著降低試驗(yàn)動(dòng)物體重和體內(nèi)脂肪(表2、表3和表4)。
表2雙醇薯蕷皂素對(duì)肥胖大鼠體重的影響(I土S)
Sl"~給藥量動(dòng)物數(shù)給藥前重量第l周 1^1 1^1 lil^
_mgZkg (只) (g)_^___(g)
模型組 ^ 102.8±6.2 142.3±11.5 194.4±25.0 244.7±40.3 288.9±48.9陽(yáng)性藥物組20 20 101.4±5.8 137.3±20.3 189.4±32.0 204.8±23.4* 238.9±28.9*
試驗(yàn)藥物組 15 20 103. 1 ±6.0 128. 9± 14. 5* 167.0±22.0* 202.6±32.0* 231.4土47.6'
30 20 101.2±6.0 124. 1土16.2' 165. 8±25. 7* 200. 1±27. 1* 210. 3±22. 0'
_60 20 101.5±6.4 124.1土16.2' 165. 8 ±25. 7' 170. 1 ±24.廣200. 3 ±22. 0'
注與模型組比較*林P<0 001， **P〈0 01, * P<0. 05。
表3雙醇薯蕷皂素對(duì)肥胖小鼠體內(nèi)脂肪重量的影響(I土S)
組別 給藥量動(dòng)物數(shù)脂肪重量脂肪相對(duì)重量
mg/kg(只)(g)(脂肪重/體重X100)
模型組200. 80土0. 182. 03 ±0. 50
陽(yáng)性藥物組20200. 53 ±0.18**1.62±0. 47
試驗(yàn)藥物組10200. 45 ±0.19***1.35±0. 38***
20200. 44 ±0. 32***1. 34±0. 50***
40200. 42 ±0.27***1. 32±0. 44***
注與模型組比較*** P<0 001,**P<0 01,* P<0. 05。
表4雙醇薯蕷皂素對(duì)肥胖大鼠體內(nèi)脂肪重量的影響(:F土s)組別 給藥量動(dòng)物數(shù)脂肪重量脂肪相對(duì)重量
mg/kg(只)(g)(脂肪重/體重X100)
模型組209.97±4. 283. 10±1.15
陽(yáng)性藥物組 30207.18 ±5. 56*2. 61 ±2. 24*
試驗(yàn)藥物組 15204. 61±1.28林*2.05±0. 34**
30204. 03 ±1.79***1.60±0. 64w*
60204. 13 ±1.29***1.70±0. 44***
注與模型組比較*** P<0 001, **P<0 01， * P<0. 05。
生物學(xué)實(shí)施例3:雙醇薯蕷皂素抗急性腦缺血作用
小鼠斷頭法制備完全性全腦缺血模型，健康昆明種小鼠70只，體重18 22g，雄性，隨 機(jī)分4組(10只/組)模型組(給等容量生理鹽水)，陽(yáng)性對(duì)照組(尼膜地平200 mg.kg—1 )， 灌胃給藥，第7天上午給藥后30 min手術(shù)，與模型組相比，雙醇薯蕷皂素能顯著延長(zhǎng)小鼠 斷頭后張口喘息時(shí)間(表5)。
表5雙醇薯蕷皂素對(duì)小鼠斷頭后張口喘息時(shí)間的影響(I ±s)
組別 劑量(mg/kg) 動(dòng)物數(shù)(只) 張口喘息時(shí)間(秒)
模型組 14.32±2.38
陽(yáng)性對(duì)照組 30 10 22.86±2.56
試驗(yàn)藥物組 15 10 21.89±0.96* 30 10 28.48 ±0.13**60
10
24.16 ±0. 86*
注與模型組比較林P〈0 01， * P<0. 05。
結(jié)扎大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈法制備彌散性不完全性全腦缺血模型。模型制備完成120 min 后斷頭取全腦，用濾紙吸干表面水分，精確稱濕重后，-7(TC超低溫冰箱保存。假手術(shù)組 暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈不結(jié)扎。雙醇薯蕷皂素對(duì)大鼠腦缺血后腦指數(shù)、MDA含量、SOD活力、Glu 和GABA含量影響測(cè)定，與模型組比較，差異顯著，提示雙醇薯蕷皂素對(duì)缺血性腦損傷有明 顯保護(hù)作用(表6)。
表6雙醇薯蕷皂素對(duì)大鼠腦缺血的影響(7土s)
組別劑量動(dòng)物數(shù) 腦指數(shù) (mg/kg)(只)(NU/mgprot)
MDA Glu (咖ol/mgprot) (PU)
GABA (PU)
假手術(shù)組 - 10 0.46±0.01 7,
模型組_ 10 0. 59±0. 02 14.
陽(yáng)性對(duì)照組 30 10 0.54土0.0r 10.
試驗(yàn)藥物組 15 10 0.49±0.03 11,
30 10 0.47±0. 01** 7.
60 10 0.48 ±0.02** 10.
40±1.43 0.44±0. 03 0. 41±0. 02 45土4. 40 0. 52±0. 05 0. 52±0. 04 45±1.78* 0. 46±0. 02* 0. 50±0. 03 65±3. 55 0. 48±0. 04 0. 49±0. 03 89±1.32** 0. 45±0. 0廣0. 47±0. 01* 35±2. 73* 0. 44±0. 02林0. 44±0. 01*
注與模型組比較+P〈0 01, * P<0. 05。
本發(fā)明是在發(fā)明人承擔(dān)的重慶重大科技攻關(guān)科研項(xiàng)目中研究發(fā)現(xiàn)的，經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)確 證式I具有降血脂、降肥胖病機(jī)體總脂肪和抗腦缺血作用。目前，高血脂、肥胖病和腦中 風(fēng)病治療一直缺乏有效藥物，對(duì)該化合物開(kāi)發(fā)必將給這些疾病病患者帶來(lái)福音，本發(fā)明工 業(yè)應(yīng)用前景十分看好。
權(quán)利要求
1、一種甾體化合物，其特征在于，其結(jié)構(gòu)式如式I其名稱為14，16-二羥基-薯蕷皂苷元(14，16-Diosgenin)。
2、 一種制備權(quán)利要求l所述甾體化合物的方法，其特征在于，包括如下步驟(1) 取麥冬，按7倍重量加水煮沸后，在80-9(TC保持2小時(shí)，濾過(guò)，藥渣按4倍重量 加水煮沸后在80-9(TC保持1.5小時(shí)，濾過(guò)，藥渣再按4倍重量加水煮沸后在80-9(TC保持1 小時(shí)，濾過(guò)；再合并3次濾液得到提取液；(2) 將步驟(1)所得的提取液按0.06-0.1犯V/分鐘通過(guò)裝有100g處理好的大孔吸附 樹(shù)脂柱，吸附完畢，用80%乙醇洗脫，洗脫后的乙醇液薄膜減壓濃縮，至無(wú)乙醇，再過(guò)濾、 干燥得到干燥物；減壓濃縮條件為真空度IO. 7kPa ，溫度80-90°C;(3) 取步驟(2)所獲干燥物，按I:IO (重量比)加水溶解，再加入3696鹽酸至濃度為 1.8raol/L,在85-95'C下，水解反應(yīng)時(shí)間2-6小時(shí)，濾過(guò)，收集水不溶物；(4) 采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱，流動(dòng)相乙腈-水之比為35-45 : 65-55，檢測(cè)波長(zhǎng) 208nm，室溫條件下對(duì)步驟(3)獲得的水不溶物進(jìn)行樣品制備，收集含14， 16-二羥基-薯蕷皂苷元的樣品溶液；(5) 對(duì)步驟(4)獲得的樣品溶液進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮條件為真空度10.7kPa， 溫度8-90°C;(6) 然后，對(duì)步驟(5)的減壓濃縮物，在80-9(TC條件下，千燥3-5小時(shí)；(7) 最后，獲得14， 16-二羥基-薯蕷皂苷元(14， 16-Diosgenin)。
3、 一種藥物組合物，其特征在于，包含預(yù)防和/或治療有效量的權(quán)利要求1所述的式I化合物，和任選的藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。
4、 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，其為單位劑量形式，其中所述的單位劑量形式包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、透皮貼劑、軟膏劑、凝膠劑、栓劑、口服溶 液、口服混懸液、注射用乳劑、口服乳劑、緩釋片劑、控釋片劑。
5、 如權(quán)利要求l所述的甾體化合物或權(quán)利要求4所述的藥物組合物，用于制備降總 膽固醇藥物。
6、 如權(quán)利要求l所述的甾體化合物或權(quán)利要求4所述的藥物組合物，用于制備降低 低密度脂蛋白膽固醇藥物。
7、 如權(quán)利要求1所述的甾體化合物和或權(quán)利要求4所述的藥物組合物，用于制備降 總甘油三脂藥物。
8、 如權(quán)利要求1所述的甾體化合物或權(quán)利要求4所述的藥物組合物，用于升高高密 度脂蛋白膽固醇藥物。
9、 如權(quán)利要求1所述的甾體化合物或權(quán)利要求4所述的藥物組合物，用于降低機(jī)體 總脂肪的藥物。
10、 如權(quán)利要求l所述的甾體化合物或權(quán)利要求4所述的藥物組合物，用于抗腦缺血 的藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供一種甾體化合物、其制備方法及含有它們的藥物組合物和用途，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。一種甾體化合物，其名稱為14，16-二羥基-薯蕷皂苷元(14，16-Diosgenin)，本發(fā)明還提供了該化合物的制備方法，以及所述化合物在制備用于預(yù)防和/或治療高血脂、肥胖病和腦中風(fēng)的藥物中的用途。本發(fā)明的化合物具有降血脂、降低機(jī)體總脂肪和抗急性腦缺血等作用，從而為開(kāi)發(fā)一種新的治療高血脂，調(diào)節(jié)肥胖病人體脂和抗腦中風(fēng)藥物提供了可能。
文檔編號(hào)A61K31/58GK101591374SQ200910104190
公開(kāi)日2009年12月2日 申請(qǐng)日期2009年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月26日
發(fā)明者傅善權(quán), 曾品濤, 王琳琳, 胥秀英, 鄭一敏 申請(qǐng)人:重慶理工大學(xué)