專利名稱：金屬硫蛋白在制備治椎間盤突出及骨質增生癥的藥中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥用途領域，涉及一種金屬硫蛋白在制備治椎間盤突出及骨質增生
癥的藥中的應用。
背景技術：
目前在治療骨質增癥及椎間盤突出癥方面，西醫(yī)采用非甾體類抗炎藥、肌松弛劑 及鎮(zhèn)靜劑等藥物療法，髓核溶解法及臭氧氧化療法，嚴重者采用手術療法。中醫(yī)采用理療 法，推拿療法，針剌療法，針刀、藥物外帖療法，穴位埋線療法等。目前對于骨質增生癥治療 只能改善局部循環(huán)，時段緩解癥狀，手術切除成功的最終結果是致殘(腰椎患者自覺其一 腿短至2-3Cm)，復發(fā)率極高，不能達到骨吸收而痊愈。對于椎間盤突出癥治療只能改善局部 循環(huán)，時段緩解癥狀，手術切除成功的最終結果是致殘(腰椎患者自覺其一腿短至2-3Cm)， 髓核溶解法及臭氧氧化療法加重病灶代謝障礙，復發(fā)率極高，不能達到收縮髓核，修復椎間 盤而痊愈。 金屬硫蛋白(Metallothionein)簡稱MT，是一類低分子量、富含半胱氨酸的金屬 結合蛋白。1957年Margoshes. M和Vallee. B. L首次從馬腎中分離出該物質，當時并未引 起重視。直到80年代之后，逐步發(fā)現其具有多種重要的生物學功能，才引起科學家們的重 視?，F已發(fā)現MT存在于所有的生物體中，包括哺乳動物、各種低等動物、植物和微生物中。 從廣義上講，金屬硫蛋白和其類似物可分為三大類第一類即人，哺乳動物具有全部金屬硫 蛋白結構和特性；第二類存在于較低等動、植物和微生物中的類似金屬硫蛋白；第三種廣 泛地存在于低等植物中的根部。第一類的金屬硫蛋白的生物功能效果最強，尤其是人，其次 是各種哺乳動物。目前市場上銷售的多為兔肝金屬硫蛋白，它主要有兩種異構體，分別稱之 為MT-I與MT-II。它們共有非常相似的結構與功能，只有十分微小的差異，所以作為化妝 品、營養(yǎng)保健品添加劑，可以不必將它們彼此分開。當然從豬、牛、羊等哺乳動物肝臟中也可 制得兔肝類似MT，但由于其中對兔肝MT研究得最深，且易獲得，所以還是使用兔肝MT比較 安全可靠。 兔肝MT與其它哺乳動物MT —樣，是由68個氨基酸構成的一個單肽鏈蛋白質分 子，分子量約為6500道爾頓，分子中富含7個二價金屬，主要為鋅，其次為銅，鈷等。在有毒 環(huán)境下也會含有毒重金屬如汞、鎘、鉛等。它也能與一價金屬如一價銅、金、銀結合。在正 常體內主要為鋅，少量的銅，鈷等，其分子最大特點是富含半胱氨酸，即占全部氨基酸中約 30% (即20個左右)，它們在分子中都是以金屬_巰基簇形式存在，使整個分子結構十分緊 密和牢固，穩(wěn)定。在金屬存在下，它可以有效地抵抗高溫和蛋白酶對其的分解。但在酸性條 件下極不穩(wěn)定，在pH4.0以下，就易脫掉金屬，暴露自由巰基而使整個分子松馳(變性態(tài))， 此時易受蛋白酶的攻擊而被降解，導致生物活性的喪失。所以MT不能口服，否則易被胃液 所破壞導致失效，因此，制成腸溶衣膠囊不失為一種有效的方法，人體對MT吸收最有效的 途徑是舌下或皮下粘膜。
金屬硫蛋白是一種誘導蛋白，在體內主要由肝臟合成，通常情況下含量甚微，但當 受環(huán)境剌激下，諸如鋅和重金屬，烷基化試劑，某些細胞因子(如干擾素，白介素)和細菌， 病毒的侵入，也可因在對機體嚴重不利的情況下(諸如極度寒冷，高溫，緊張，危急，饑餓 等)會加速其體內的生物合成，所以這也可被看作是機體的一種自衛(wèi)手段。
金屬硫蛋白(MT)具有多種生物學作用 1、參與體內微量金屬元素的運輸、儲存和代謝等。研究表明體內很多參與新陳代 謝的酶類，包括參與體內蛋白質、核酸生物合成的多種酶，參與體內能量合成的某些酶，參 與體內解毒作用的酶，以及參與體內蛋白質分子折疊(保持蛋白質的天然構象與生物功能 的蛋白質分子)，以及參與體內金屬代謝的蛋白質、酶類，都需要有某種一定量的金屬參與， 否則就不會有生物活性和功能。類似老年人與兒童缺鋅、缺鐵等等都會引起某些疾病的發(fā) 生和影響健康。但如單純補鋅補微量元素，體內多數被吸收而被排出，如在肝臟內富有MT， 它就可從食物中吸收和固定金屬元素，貯藏下來， 一旦機體需要，它就可以將其運輸和緩慢 釋放，起到"銀行""倉庫"的作用，尤其是老年人、幼兒的補鋅。 2、抗氧化，抗衰老作用。通過分子、細胞和整體動物水平研究發(fā)現，它是自然界抗 氧化、抗衰老的最有效的生物活性物質之一。在細胞內發(fā)現它具有大幅度地提高抗氧化活 性物質谷胱甘肽、谷胱甘肽過氧化物酶，S0D等含量，反之，卻能降低氧化作用產物如肝臟脂 質過氧化物，心肌脂褐素的含量。通過抗小鼠D-半乳糖擬老化(衰老)效應模型試驗結果 發(fā)現，MT可明顯改善小鼠的學習記憶能力，降低MDA(丙二醛，一種致癌促衰老化學物質)的 含量及提高S0D活性，說明MT對D-半乳糖的致衰老效應有很好的對抗作用。同時還發(fā)現 MT對D-半乳糖誘導果蠅壽命縮短具有保護作用(延緩壽命1/10)，其它諸如抗靜態(tài)缺氧效 應，對小鼠尾靜脈栓子LD50的影響，對大鼠腦多發(fā)性栓塞致死效應的影響以及對小鼠腦栓 塞記憶功能衰退的影響等都顯示出良好的抗衰老作用。 3、參與抗輻射，保護機體，尤其是細胞核，DNA的輻射受損進行修復。實驗證明，它 不單可修復受損細胞DNA，而且還可預防，效果顯著，它能減緩甚至逆轉因輻射而引起的淋 巴細胞、白細胞的下降，且呈量效關系，高劑量的MT可以抵御高劑量的輻射；同樣動物因輻 射的死亡率也大大下降，提高了存活率和存活時間。因而MT明顯地具有提高機體抵抗放射 性輻射的能力，由此可見可被用于預防輻射損傷的各行業(yè)人員的勞保和預防，也可用于腫 瘤病人放療中的保護。 4、清除自由基，尤其是羥基自由基。經研究發(fā)現，MT具有很強的清除自由基能力， 值得注意的是它尤其對危害人類健康最甚的羥基自由基，遠遠強于S0D，是目前最強的天然 產物。這與上述MT具有強抗氧化作用是一致的，可用于抗腫瘤、糖尿病、心血管疾病及神經 退行性病變(如老年性癡呆癥等)的改善和緩解。有關MT對這些老年性疾病的關系，尚在 進行研究，將有可能成為這方面的醫(yī)藥產品(目前尚無醫(yī)藥產品)。 5、促進細胞生長，機體發(fā)育和能量代謝等。這很顯然與MT本身的結構與功能有 關。由于它是體內多種參與代謝的蛋白質，酶的活性必須成份-微量金屬元素的供應者和 運輸者，由它才能調節(jié)體內物質的新陳代謝，包括能量代謝與細胞的生長、分化。另外又根 據對利用蛋白質組學技術的研究，發(fā)現它還能抑制細胞凋亡和促進蛋白質正確折疊(使具 有正常的生物學功能)和抗氧化作用，即抗衰老作用。因而可以判斷MT將可發(fā)展成為營養(yǎng) 保健，抗衰老和治療藥物。
另外要提出的是某些金屬代謝失常癥，如銅代謝失常癥_肝痘狀病是一種嚴重的 先天性遺傳性疾病，其生下來就不能代謝銅而造成肝中毒，最后導致死亡(最多20歲左 右)，據目前臨床醫(yī)學證明只有MT能治療此病。 對MT的研究已傾向于臨床應用，且已不單局限于它對抗氧化、清除自由基和抗輻 射方面的基礎研究，而更大程度傾向于具體疾病中的應用，尤其是一些老年性疾病心腦血 管，糖尿病和老年性癡呆癥等，將在人類保健、治療中發(fā)揮越來越大的作用。由于MT易被胃 液破壞，所以市售一些口服制劑，如口服液是無效的，制成腸溶衣膠囊方可。人體對MT吸收 最理想的途徑是舌下或皮下粘膜。 目前在國內外，有關MT的研究主要已涉及醫(yī)學和環(huán)保，尤其是老年性疾病。但是， 金屬硫蛋白(MT)在用于治療椎間盤突出及骨質增生癥尚無這方面的應用報道。

發(fā)明內容
所要解決的技術問題本發(fā)明的目的是提供一種金屬硫蛋白的新用途，即在制備 治椎間盤突出及骨質增生癥的藥中的新應用。 本發(fā)明的技術方案為金屬硫蛋白在制備治椎間盤突出及骨質增生癥的藥中的應 用。 本發(fā)明采用金屬硫蛋白(MT)介入人體穴位內能直接吸收并發(fā)揮其生理作用。在 治療骨質增生癥及椎間盤突出癥中，是通過清除體內及病灶垃圾(自由基)，為細胞提供 良好的潔凈的生理環(huán)境，分化年輕細胞；使體內腺體組織得于修復活化，分泌大量的生理物 質，如；酶類(激活成骨酶)及激素類等。金屬硫蛋白(MT)參與體內微量金屬元素的運輸、 儲存和代謝，使人體內金屬元素特別是Ca元素的重新分配。對治療骨質增生起著至關重要 的作用，使人體代謝處于動態(tài)平衡來實現的。 對于治療骨質增生癥，是激活成骨酶，加快骨吸收。對Ca的儲存和代謝重新分配， 修復關節(jié)面至正常生理型態(tài)。對于治療椎間盤突出癥，是清除椎間盤內垃圾(改善代謝)， 維持細胞正常分化，收縮髓核，修復纖維環(huán)，使椎間盤恢復至正常生理型態(tài)。
細胞是組成人體最基本的單位，一切生命活動都在細胞之間完成，能量的供給最 終是為細胞服務。只有健康的細胞，人體才能發(fā)揮正常的生理功能。人體在生命活動過程 中，不斷地進行新陳代謝，在代謝過程中不斷產生代謝產物(垃圾)。代謝產物存在于細胞 間質之間，如得不到及時的清除則成為內毒素不斷攻擊健康細胞，致使細胞脂質過氧化而 成病態(tài)。 金屬硫蛋白(MT)從上世紀50年代發(fā)現至今，越來越多的科學家被奇特的金屬硫 蛋白(MT)吸引，對金屬硫蛋白(MT)的結構，性質，生理功能及其在生物，醫(yī)學，環(huán)境等方面 的應用進行了廣泛的研究，目前金屬硫蛋白(MT)在世界上召開過五次國際研討會議。
本發(fā)明人從事臨床醫(yī)學二十余年，對金屬硫蛋白(MT)的臨床應用已有十余年，自 2003年起把金屬硫蛋白(MT)作為強抗氧化劑和金屬離子緩沖劑應用于治療骨質增癥及椎 間盤突出癥至今，收到非常理想的治療效果。修復和骨吸收，療效已超過國家標淮。治療椎 間盤突出不是把椎間盤突出消除與否作為治療標準。國家統一的治愈標準是非手術療法 治療后癥狀消失。手術治療后傷口愈合，功能完全或基本恢復。金屬硫蛋白(MT)無毒，無 不良反應。金屬硫蛋白(MT)穴位介入比任何西藥或中草藥制劑的穴位介入都安全。因此，為盡快解除廣大患者的疾苦，應使之臨床普及應用。 金屬硫蛋白(MT)在治療疾病過程中，雖及部穴位介入，但對整體器官組織的代謝 改善非常顯著。金屬硫蛋白(MT)使用一個細胞周(90天使用MT150mg至300mg)后，體內 環(huán)境空前潔凈，既冶愈了疾病，患者又顯得明顯的年輕化。金屬硫蛋白(MT)是自然界抗氧 化、抗衰老的最有效的生物活性物質，是目前最理想的細胞保護劑之一。
金屬硫蛋白(MT)是目前最理想的極強的抗氧化劑，對人體全身各組織器官的代 謝性疾病有顯著療效。也是對骨質增生及椎間盤突出癥保守治療的首選的理想制劑。
具體實施方式

實施例1 椎間盤突出癥穴位介入治療 金屬硫蛋白(MT)為通過特殊的誘導技術處理后的兔肝為原料，經分離、純化，制
得純度大于95%的凍干粉的兔肝金屬硫蛋白，可以在市場上選購。 兔肝金屬硫蛋白(MT)溶劑滅菌注射用水。 兔肝金屬硫蛋白(MT)凍干粉與溶劑稀釋配比5-10mg/ml。(每毫升溶液中含5-10
毫克金屬硫蛋白)。
用法 A、用2-5ml —次性注射器吸取金屬硫蛋白(MT)稀釋液。 B、天應穴(局部病灶)斜剌深至0. 5寸行針至氣至，退至皮下介入5-10mg(即金 屬硫蛋白凍干粉稀釋后的溶液l-2ml)至復蓋病灶。 C、懸鐘穴(髓會穴)直剌0.5寸行針至氣至，退至皮下介入5-10mg(即金屬硫蛋 白凍干粉稀釋后的溶液l-2ml)。 用量一個療程90天。分15次穴位介入前5次，1次/3天；后10次，1次/7天， 10-20mg/次。 一般一個療程即可治愈。 發(fā)明人把金屬硫蛋白(MT)應用于治療椎間盤突出癥86例，隨訪到62例，治療效 果如下。 臨床資料 本組隨訪到62例，其中男34例，女28例，平均年齡41. 66歲(26 83歲)。病
程20天至4 9年。 CT或脊碘造影示腰椎間盤突出54例(L3 4， 4例；L4 5， 25例；L5 Sl， 21例； L3 4、L4 5、L5 S1，4例。)，椎間盤向左側后方突出16例，右側后方突出20例，中央 突出IO例，膨出8例。并可見椎間隙變狹窄17例，側隱窩狹窄19例，黃韌帶肥厚18例。臨 床表現急性期13例，腰腿疼痛劇烈、活動受限，壓痛、叩痛明顯，直腿抬高試驗30。以下。 緩解期41例，腰腿疼痛能忍，局部壓痛伴放射痛，直腿抬高試驗30。 60° 。
各型頸椎間盤突出癥8例。臨床表現頭痛頭暈、耳鳴、眼花、流淚、咽痛、手臂麻
木、上肢抬舉后展困難。
治療結果 腰椎間盤突出癥療效評定標準。痊愈經一個療程治療后腰腿痛消失，局部無壓 痛，直腿抬高70。以上(-)，已恢復原工作。有效經二個療程治療后腰痛顯著減輕，局部有輕壓痛，直腿抬高60。 (士)，行走活動正常。無效經三個療程治療后，癥狀、體征無改善。 復發(fā)愈后六個月原病灶恢復原來癥狀。
頸椎間盤突出癥療效評定標準。痊愈經一個療程治療后上肢麻痛消失，局部無壓 痛，已恢復原工作。有效經二個療程治療后頸部及所累部位癥狀顯著減輕，生活能自理。 無效經三個療程治療后，癥狀、體征無改善。復發(fā)愈后六個月原病灶恢復原來癥狀。
治療結果經上述方法治療，根據療效評定標準，痊愈58例，有效4例，無效0例， 復發(fā)3例，總有效率100%。 病例1 :王某，女，48歲，廣東省興寧市人，從事房屋裝修。自述患腰椎間盤突出已 八年余，在多家醫(yī)院采用多種藥品內服和外用外治方法均未治愈。腰至右腿酸痛難忍，只能 靠牽引理療時段維持，已喪失治療信心。 2003年3月15日檢查L4椎間盤明顯高于棘突，紅腫。用手觸?；继幖春敉礃O。 痛點放射至右腳背。CT檢查生理曲度正常，L4、L5椎間盤向右后方突出。
診斷腰椎間盤突出癥。 治療采用金屬硫蛋白(MT) 10mg溶于2ml注射用水穴位皮下介入。取穴天應穴， 懸鐘穴各介入lml。前五次每3天1次，后十次每7天1次。治療三周后患者自述疼痛大 減，行走不覺腿痛，十五次穴位介入完成后，L4椎間盤已回復至棘突內，用手摸不及，用中指 掘曲用力壓之，自覺有點酸感，工作、生活正常，痊愈。至今未復發(fā)。 病例2 :李某，男，40歲，廣東省珠海市人，珠海市房地產開發(fā)公司職工?；颊咦允?患腰椎間盤突出已5年余，每年至少一至二次大發(fā)作，發(fā)作時全身動彈不得，稍有改變體位 即痛極難忍，每次都用門板保持體位抬至醫(yī)院，牽引腰椎后即時緩解，經多方治療未痊愈。
2005年7月15日檢查L3至L5椎間盤后左側明顯突出，用手壓患處即呼痛極。 痛點放射至左腳背。CT檢查生理曲度正常，L3， L4， L5椎間盤向左后方突出。
診斷腰椎間盤突出癥。 治療采用金屬硫蛋白(MT) 10-20mg溶于2ml注射用水穴位皮下介入；取穴天應 穴，懸鐘穴各介入lml 。前五次每3天1次，每次20mg，后十次每7天1次，每次10mg。治 療三周后患者自述麻痛大減，行走不覺腿痛，十五次穴位介入完成后，L3至L4椎間盤已基 本回復，用手摸不及，用中指掘曲用力壓之，自覺有點酸感，工作，生活正常，痊愈。2008年3 月15日電話隨訪未復發(fā)。
實施例2 骨質增生癥穴位介入治療 金屬硫蛋白(MT)為通過特殊的誘導技術處理后的兔肝為原料，經分離、純化，制
得純度大于95%的凍干粉的兔肝金屬硫蛋白，可以在市場上選購。 兔肝金屬硫蛋白(MT)溶劑；滅菌注射用水。 兔肝金屬硫蛋白(MT)凍干粉與溶劑稀釋配比5-10mg/ml。(每毫升溶液中含5_10
毫克金屬硫蛋白)。
用法 A、用2-5ml —次性注射器吸取金屬硫蛋白(MT)稀釋液。 B、天應穴(局部病灶)斜剌深至0. 5寸行針至氣至，退至皮下介入5-10mg(即金 屬硫蛋白凍干粉稀釋后的溶液l-2ml)至復蓋病灶。[OO59] C、大杼穴(骨會穴)斜剌0. 8寸行針至氣至，退至皮下介入5-10mg(即金屬硫蛋 白凍干粉稀釋后的溶液l-2ml)。 用量一個療程90天。分15次穴位介入前5次，1次/3天。后10次1次/7 天，10-20mg/次。 一般一個療程即可治愈。 發(fā)明人把金屬硫蛋白(MT)應用于治療骨質增生癥97例，隨訪到79例，治療效果
報告如下。 臨床資料 本組隨訪到79例，其中男49例，女30例，平均年齡38. 7歲(25 78歲)。病 程15天至3 12年。 CT或x光影示腰椎骨質增生癥50例(L3 4， 9例；L4 5， 20例；L5 Sl， 15例; L3 4、L4 5、L5 Sl，6例。)，臨床表現急性期28例，腰腿疼痛劇烈、活動受限，壓痛、 叩痛明顯，直腿抬高試驗30。以下。緩解期22例，腰腿疼痛能忍，局部壓痛伴放射痛，直腿 抬高試驗30。 60° 各型頸椎骨質增生癥29例，臨床表現頭痛頭暈、耳鳴、眼花、流淚、咽痛、手臂麻
木、上肢抬舉后展困難。
治療結果 腰椎骨質增生癥療效評定標準。痊愈經一個療程治療后腰腿痛消失，局部無壓 痛，直腿抬高70。以上(_)，已恢復原工作。有效經二個療程治療后腰痛顯著減輕，局部有 輕壓痛，直腿抬高60。 (士)，行走活動正常。無效經三個療程治療后，癥狀、體征無改善。 復發(fā)愈后六個月原病灶恢復至原來癥狀。
頸椎骨質增生癥療效評定標準。痊愈經一個療程治療后上肢麻痛消失，局部無壓 痛，已恢復原工作。有效經二個療程療后頸部及所累部位癥狀顯著減輕，生活能自理。無 效經三個療程治療后，癥狀、體征無改善。復發(fā)愈后六個月原病灶恢復原來癥狀。
治療結果經上述方法治療，根據療效評定標準，痊愈73例，有效6例，無效0例， 復發(fā)2例，總有效率100%。 病例l :寧某，男，43歲，江西省九江市人，農民。自述患腰椎骨質增生癥臥床不起， 1996年在江西省九江市人民醫(yī)院進行手術。術后20天后腰部疼痛如前，不能勞作，行走時 自覺左腿短了 2Cm，下蹲后不能起身，甚是痛苦。經多方治療均無效。 2006年6月10日檢查腰部手術域疼痛，下蹲后不能起身，小便困難，大便七天一 次，秘結。各大關節(jié)酸痛。 X線提示腰椎生理曲度尚可，序列正常，各椎體邊緣不光滑，前后緣見唇樣骨贅 形成，關節(jié)突關節(jié)面硬化。
診斷腰椎骨質增生，退變。拌有前列腺炎，慢性結腸炎，風濕癥。 治療采用金屬硫蛋白(MT) 10mg溶于2ml注射用水穴位皮下介入。取穴天應穴，
大杼穴各介入lml。前五次每3天1次，后十次每7天1次。治療三周后患者自述腰部疼痛
大減，下蹲后能自行起身，甚是高興。十五次穴位介入完成后，行走不覺腿短，小便順暢，1-2
天大便一次，各大關節(jié)酸痛基本消失。精神飽滿，年輕許多，工作，生活正常，痊愈。至今未復發(fā)。 病例2:林某，男，45歲，廣東省揭陽市人，經營綱材的老板，自述頸部疼痛，兩肩酸、重、麻感，放射至尾指已有半年多，后去本市中醫(yī)院骨傷科就診，X線拍片診斷為頸椎骨 質增生。 2007年2月8日檢查揭去頸部鎮(zhèn)痛膏，頸部肌肉強硬，皮膚黑色。按壓頸椎呼痛， 兩肩部至尾指有較強酸、重、麻感，雙手均持物無力。 CT檢查頸椎生理曲度正常，各關節(jié)表面毛糙，4、5、6、7節(jié)增生。
診斷頸椎骨質增生 治療采用金屬硫蛋白(MT)20mg溶于2ml注射用水穴位皮下介入。取穴天應穴， 大杼穴各介入lml。前五次每3天1次，后十次每7天1次。治療七次后患者已把頸部鎮(zhèn)痛 膏揭去，頸部痛感消失，兩肩如卸重擔，雙手均有勁力。十五次穴位介入完成后，癥狀全部消 失。頸部皮膚常色，年輕許多，工作，生活正常，痊愈。2009年2月8日電話隨訪未復發(fā)。
權利要求
金屬硫蛋白在制備治椎間盤突出及骨質增生癥的藥中的應用。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥用途領域，公開了一種金屬硫蛋白在制備治椎間盤突出及骨質增生癥的藥中的應用。金屬硫蛋白作為強抗氧化劑和金屬離子緩沖劑應用于治療骨質增癥及椎間盤突出癥，治療效果好。本發(fā)明對整體器官組織的代謝改善非常顯著，體內環(huán)境空前潔凈，既治愈了疾病，患者又顯得明顯的年輕化。本發(fā)明對提高中醫(yī)在治椎間盤突出及骨質增生癥的地位，將起到巨大的社會效應和經濟效益。
文檔編號A61K38/17GK101693106SQ20091019320
公開日2010年4月14日 申請日期2009年10月20日 優(yōu)先權日2009年10月20日
發(fā)明者劉添如 申請人:劉添如;