專利名稱：維生素d 3 類似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及維生素D3類似物，特別是下式的維生素D3的20-表-16-烯類似物
其中R是氫，氟，或羥基，R2是氫，低級烷基或鹵素，X是＝CH2或當(dāng)R是羥基時，X是(H，H)或＝CH2，而A是-C≡C-，
或-CH2-CH2-，條件是當(dāng)A為-CH2-CH2-時，R2是氫或低級烷基。
本文所用的，“低級烷基”指含有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，叔丁基等等。優(yōu)選的低級烷基是甲基或乙基。鹵素意指氟，碘，溴或氯，優(yōu)選氟。
式I化合物誘導(dǎo)分化作用并抑制各種皮膚和癌細(xì)胞系地增生。因而，式I化合物可用作治療過度增生的皮膚病，如牛皮癬的藥劑。式I化合物也可用于治療腫瘤病，如，白血病或乳腺癌和皮脂腺疾病，如，粉刺或皮脂溢性皮炎。式I化合物，特別是1α-氟-25-羥基-16，23E-二烯-26，27-雙高-20-表-膽鈣化甾醇，可用于骨質(zhì)疏松癥的治療。
而且，當(dāng)將式I化合物局部施用于患者的皮膚時，可以逆轉(zhuǎn)與光傷害有關(guān)的病癥。因此，通過將式I化合物局部施用于由于陽光曝曬而傷害的患者的皮膚，可以逆轉(zhuǎn)起皺，彈性組織變性和早衰，導(dǎo)致皮膚外觀的改善。換句話說，通過式I化合物的局部給藥，促進(jìn)了表皮傷害的修復(fù)，使皮膚更光滑，外觀更年輕。
本發(fā)明也涉及包含式I化合物和藥用載體的藥物組合物。這類組合物可被用于誘導(dǎo)分化作用并抑制皮膚和癌細(xì)胞系增生，特別是用于治療過度增生皮膚病，如牛皮癬；腫瘤病，如白血病；皮脂腺疾病，如粉刺；以及逆轉(zhuǎn)與光傷害有關(guān)的病情，特別是用于局部治療由于陽光曝曬的皮膚傷害，起皺，彈性組織變性和早衰。本發(fā)明也涉及式I化合物在制備用于治療上述疾病和病癥的醫(yī)藥的用途。本發(fā)明還涉及制備式I化合物和式XII中間體的方法。
在優(yōu)選的方案中，R是羥基。在式I化合物中，R2優(yōu)選地是氫或氟。優(yōu)選的式I化合物是1，25-二羥基-16-烯-23-炔-20-表-膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇；1α-氟-25-羥基-26，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇；1α-氟-25-羥基-16-烯-23-炔-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-16，23Z-二烯-19-降-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇。
式I化合物如后面圖解I-V和實(shí)施例所述制備。
制備式I化合物的方法中的最后一步包括將含有甲硅烷基保護(hù)的羥基的相應(yīng)化合物脫保護(hù)。
圖解I
其中R2如上所述。
圖解II
其中R，X和R2如上所述。
圖解III
其中R，X如上所述，而R2是氫或低級烷基。
圖解IV
其中R，X和R2如上所述。
圖解V
其中R，X和R2如上所述。
在上面圖解I中，式II化合物，一個已知化合物(B.M.Trost，P.R.Bernstein，P.C.Funfschilling，J.American Chemical Society 101，4378(1979))，通過與乙酸酐，吡啶和二甲基氨基吡啶在氯代烴溶劑，如二氯甲烷中反應(yīng)而轉(zhuǎn)化為式III化合物。該反應(yīng)在0℃至50℃，優(yōu)選室溫，優(yōu)選地在氬氣氛中進(jìn)行。
式III化合物通過與堿，如，碳酸鈉在醇溶劑，如甲醇中，在優(yōu)選地，氬氣氛中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式IV化合物。
式IV化合物通過與草酰氯和二甲亞砜在氯代烴溶劑，如二氯甲烷中，在氬氣氛中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式V化合物。
式V化合物通過與亞芐基丙酮在Pd/C催化劑存在下反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式VI化合物。
式VI化合物通過與3-三甲基甲硅烷基丙醛和Lewis酸如二甲基氯化鋁在氯代烴溶劑，如二氯甲烷中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式VII化合物。
式VII化合物通過相應(yīng)的苯基硫羰碳酸酯與三正丁基氫化錫和三乙基硼烷在甲苯中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式VIII化合物。
式VIII化合物通過與堿，如氫氧化鈉在醇溶劑，如乙醇中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式IX化合物。反應(yīng)在50℃至100℃的范圍，優(yōu)選80℃的溫度進(jìn)行。
式IX化合物通過與1-(三甲基甲硅烷基)咪唑在氯代烴溶劑，如無水二氯甲烷中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式X化合物。
式X化合物通過與相應(yīng)的式
其中R2′是氫，或低級烷基的化合物在堿如正丁基鋰存在下反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式XI化合物。反應(yīng)優(yōu)選地在-78℃進(jìn)行。
當(dāng)制備其中R2是鹵素的式I化合物時，式X化合物與鹵代丙酮，如六氟丙酮在堿如正丁基鋰存在下反應(yīng)。
式XI化合物通過與氟化四丁基銨在醚溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為式XII的相應(yīng)化合物。
如圖解II中提出的，式XII化合物通過與氧化劑如，重鉻酸吡啶鎓在氯代烴溶劑如無水二氯甲烷中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XIII化合物。
式XIII化合物通過與1-(三甲基甲硅烷基)咪唑在氯代烴溶劑，如無水二氯甲烷中反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XIV化合物。
式XIV化合物通過與〔3S-(1Z，3α，5β)〕-2-〔3，5-雙〔〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚類溶劑如四氫呋喃中，在正丁基鋰作為堿存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是＝CH2的相應(yīng)式Ia化合物。
另外，式XIV化合物通過與〔5S，Z〕-2-〔2-〔2-亞甲基-5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚類溶劑如四氫呋喃中，在正丁基鋰作為堿存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氫的相應(yīng)式Ia化合物。
另外，式XIV化合物通過與〔3S-(3α，5β，Z)〕-2-〔2-〔2-亞甲基-3-氟-5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚類溶劑如四氫呋喃中，在正丁基鋰作為堿存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氟的相應(yīng)式Ia化合物。
另外，式XIV化合物通過與〔3R-(3α，5β，Z)-3，5-雙〔〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚類溶劑如四氫呋喃中，在正丁基鋰作為堿存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基的相應(yīng)式Ia化合物。
在上面圖解III中，式XII化合物通過與氫和Lindlar催化劑在有機(jī)溶劑如，乙酸乙酯，己烷和乙醇的混合物中，在喹啉存在下反應(yīng)，還原為相應(yīng)的式XV化合物。
式XV化合物通過與氫在催化劑如1，4-雙(二苯基膦基)丁烷1，5-環(huán)辛二烯銠四氟硼酸鹽和汞在氯代溶劑，如，二氯甲烷中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XVI化合物。
式XVI化合物通過與重鉻酸吡啶鎓鹽在氯代溶劑，如，二氯甲烷中反應(yīng)，氧化為相應(yīng)的式XVII化合物。
式XVII化合物通過與1-(三甲基甲硅烷基)咪唑在氯代溶劑，如，二氯甲烷中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XVIII化合物。
式XVIII化合物通過與〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在正丁基鋰作為堿存在下，優(yōu)選地在-78℃，在作為溶劑的無水四氫呋喃中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是＝CH2的相應(yīng)式Ib化合物。
另外，式XVIII化合物通過與〔3R-(3α，5β，Z)〕-3，5-雙〔〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在正丁基鋰作為堿存在下，在作為溶劑的無水四氫呋喃中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是氫的相應(yīng)式Ib化合物。
另外，式XVIII化合物通過與〔3R-(3α，5β，Z)〕-2-〔2-〔2-亞甲基-3-氟-5-〔1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在正丁基鋰作為堿存在下，在作為溶劑的四氫呋喃中，在-78℃的溫度下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氟的相應(yīng)式Ib化合物。
另外，式XVIII化合物通過與〔5S，Z〕-2-〔2-〔2-亞甲基-5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在正丁基鋰作為堿存在下，在作為溶劑的四氫呋喃中，在-78℃的溫度下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氫的相應(yīng)式Ib化合物。
在上面的圖解IV中，式XII化合物通過與還原劑如，氫化鋁鋰，在醚溶劑，如，四氫呋喃，在甲醇鈉作為堿存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XIX化合物。
式XIX化合物通過與氧化劑如，重鉻酸吡啶鎓鹽，在氯代溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XX化合物。
式XX化合物通過與1-(三甲基甲硅烷基)咪唑在氯代溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XXI化合物。
式XXI化合物通過與〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚溶劑，如四氫呋喃中，在堿，如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是＝CH2的相應(yīng)式Ic化合物。
另外，式XXI化合物通過與〔3R-(3α，5β，Z)-3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚溶劑，如四氫呋喃中，在堿，如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是氫的相應(yīng)式Ic化合物。
另外，式XXI化合物通過與〔5S，Z〕-2-〔2-〔2-亞甲基-5-〔〔(1，l-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚溶劑，如四氫呋喃中，在堿，如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氫的相應(yīng)式Ic化合物。
另外，式XXI化合物通過與〔3S-(3α，5β，Z)〕-2-〔2-〔2-亞甲基-3-氟-5-〔〔1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚溶劑，如四氫呋喃中，在堿，如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氟的相應(yīng)式Ic化合物。
如上面圖解V提出的，式XII化合物通過用Lindlar催化劑在喹啉存在下，在混合溶劑，如乙酸乙酯，己烷和乙醇的混合物中氫化，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XXII化合物。
式XXII化合物通過與氧化劑如，重鉻酸吡啶鹽，在氯代溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XXIII化合物。
式XXIII化合物通過與1-(三甲基甲硅烷基)咪唑在氯代溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XXIV化合物。
式XXIV化合物通過與〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚溶劑，如四氫呋喃中，在堿如丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是CH2的相應(yīng)式Id化合物。
另外，式XXIV化合物通過與〔3R-(3α，5β，Z)-3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在四氫呋喃中，在堿如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是羥基而X是氫的相應(yīng)式Id化合物。
另外，式XXIV化合物通過與〔5S，Z〕-2-〔2-〔2-亞甲基-5-〔〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚類溶劑如四氫呋喃中，在堿如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氫的相應(yīng)式Id化合物。
另外，式XXIV化合物通過與〔3S-(3α，5β，Z)〕-2-〔2-〔2-亞甲基-3-氟-5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在醚類溶劑如四氫呋喃中，在堿如正丁基鋰存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為其中R是氟的相應(yīng)式Id化合物。
式I化合物可以，例如，以片劑，包衣片劑，糖錠，硬或軟明膠膠囊，溶液，乳化液或懸浮液形式口服給藥。然而，給藥也可以，例如，以栓劑形式直腸內(nèi)進(jìn)行，或例如，以注射溶液形式非腸胃內(nèi)給藥。
本發(fā)明的組合物可以用用于生產(chǎn)片劑，包衣片劑，糖錠和硬明膠膠囊的藥用惰性，無機(jī)或有機(jī)賦形劑加工。乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其鹽，等等，可被用作這類賦形劑，例如，用于片劑，糖錠和硬明膠膠囊。用于軟明膠膠囊的合適賦形劑有，例如，植物油，蠟，脂肪，半固體和液體多元醇，等等；取決于活性成份的性質(zhì)。然而，在軟明膠膠囊的情況下，通常不需要賦形劑。用于制備溶液和糖漿的合適賦形劑有，例如，水，多元醇，蔗糖，轉(zhuǎn)化糖，葡萄糖等等。
用于注射溶液的合適賦形劑有，例如，水，醇類，多元醇，甘油，植物油，等等。
用于栓劑的合適賦形劑有，例如，天然或硬化的油，蠟，脂肪，半液體或液體多元醇等等。
而且，藥物制劑可含有防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定化劑，濕潤劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，調(diào)味劑，用于改變滲透壓的鹽，緩沖劑，掩蔽劑或抗氧化劑。
上述式I化合物可以口服或通過注射給藥，用于治療需要這種治療的溫血動物的腫瘤疾病，如白血病。更具體地，上述式I化合物可以對成人以每天約0.25至50μg范圍的劑量口服給藥，用于治療腫瘤疾病如白血病或乳腺癌。
上述式I化合物可以對需要這類治療的溫血動物口服給藥，用于治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化病，和角化病。更具體地，上述式I化合物可對成人以每天約0.25至50μg的范圍的劑量口服給藥，用于治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化疾病，和角化病。這些化合物可以以每天約0.25至50μg；優(yōu)選每天0.5至5μg的劑量口服給藥，用于治療人的粉刺。
上述式I化合物可以對需要這類治療的溫血動物局部給藥，用于治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化疾病，和角化病。更具體地，上述式I化合物可以以每天每克局部制劑約0.5至約100μg的劑量局部給藥，用于治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化疾病，和角化病。
上述式I化合物也可局部給藥用于治療皮脂腺疾病如粉刺或皮脂溢性皮炎。
式I化合物作為治療腫瘤疾病的藥劑的有用活性可由如下試驗(yàn)過程證明。HL-60細(xì)胞分化作用
HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用是通過測量氮藍(lán)四唑(NBT)的還原反應(yīng)中的氧化突現(xiàn)電位(oxidative burst potential)而測定的。
HL-60細(xì)胞保持在用10％胎牛血清(FCS)，2mM L-谷氨酰胺，1mM丙酮酸鈉，10％非必需氨基酸，50U/ml青霉素和50μg/ml鏈霉素補(bǔ)充的RPMI1640培養(yǎng)基(RPMI/FCS)中。HL-60細(xì)胞(30000細(xì)胞/90μl RPMI/補(bǔ)充的培養(yǎng)基)被接種入平底微量滴定孔中。接種后，立即將10μl用補(bǔ)充的RPMI培養(yǎng)基稀釋的試驗(yàn)化合物同時加入孔中，產(chǎn)生最終濃度在10-11至10-6M之間(從在乙醇中的10-2M貯存溶液開始，在-20℃貯存，避光)。3天后，培養(yǎng)基用多道移液管從孔中吸走，并用100μlNBT溶液(1mg/ml在磷酸緩沖的鹽水(PBS)含有200nM豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA))替換。在37℃再溫育1小時后，接著移走NBT溶液并加入100μl在0.01N HCl中的10％十二烷基硫酸鈉(SDS)。已還原的NBT的量在540nm用自動板讀數(shù)器定量分光光度測定。計(jì)算了孔平均值。S.E.M.在5至10％之間。數(shù)值被表達(dá)為在相同實(shí)驗(yàn)中用100-1000nM降血鈣三醇達(dá)到的最大分化作用的百分?jǐn)?shù)。達(dá)到此最大值的50％時的濃度(nM)被圖解測定并以ED50在表I中給出。
表I在T47-D和MCF-7乳腺癌細(xì)胞中的抗增生活性
用于這些實(shí)驗(yàn)中的兩個細(xì)胞系和其生長需要列在下面1，T47-D乳腺癌細(xì)胞在用10g/ml牛胰島素，和10％胎牛血清補(bǔ)充的RPMI1640培養(yǎng)基中生長。2，MCF-7乳腺癌細(xì)胞在用非必需氨基酸，1mM丙酮酸鈉，10μg/ml牛胰島素，和10％胎牛血清補(bǔ)充的MEM(Eagles)中生長。
細(xì)胞在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中生長至對數(shù)生長晚期(～80％鋪滿)。T47-D或MCF-7細(xì)胞然后被胰蛋白化，并分別接種在4000或2000細(xì)胞/孔中。接種后24小時，在相同培養(yǎng)基中制備系列乙醇增溶的藥物的稀釋液，并以1000至0.1nM和0.1％乙醇的最終濃度加到三份孔中。在藥物加入的第3至第7天，將50μl 5mg/mlMTT溶液(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物在磷酸緩沖的食鹽水中的溶液)加到各個孔中，并繼續(xù)在37℃溫育2.5小時。板然后通過在800×g離心5分鐘而簡短旋轉(zhuǎn)，將培養(yǎng)基從孔中吸走，將50μl乙醇/孔加入以溶解在用MTT溫育期間形成的甲_。搖動15分鐘后，在570和660nm用自動板讀數(shù)器測定每孔的光學(xué)密度。通過比較用試驗(yàn)化合物處理的細(xì)胞與只用0.1％乙醇處理的細(xì)胞的光學(xué)密度而計(jì)算細(xì)胞生長的抑制百分?jǐn)?shù)。基于Reed和M uench公式(Reed，L. J.and H.Muench，A Simple method of estimating fifty percent endpoint.Am.J.Hyg.27493-497(1938))測定IC50值，結(jié)果列于下表II。
表II
式I化合物作為治療過度增殖皮膚病藥劑的有用活性由下文證明。抑制角質(zhì)形成細(xì)胞增殖
HaCaT細(xì)胞系-使用無限增殖的人細(xì)胞系HaCaT。在試驗(yàn)化合物的存在下培養(yǎng)6天后在指數(shù)生長的培養(yǎng)物中測量3H-胸苷的摻入。
細(xì)胞培養(yǎng)-在含4.5g/l葡萄糖并補(bǔ)充有1-0％胎牛血清(Gibco，F(xiàn)CS)，L-各氨酰胺(Gibco，2mM)，青霉素(Gibco，50UI/ml)，鏈霉素(Gibco，50/μg/ml)，EGF(10ng/ml)，氫化可的松(400ng/ml)，霍亂毒素(8.5ng/ml)和胰島素(5ng/ml)的Du1becco改進(jìn)的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)和NutrientMixture Ham′s F12(F12)，31(v/v，ICN)中培養(yǎng)HaCaT細(xì)胞。細(xì)胞維持于含5％CO2和95％空氣的潮濕環(huán)境中，每隔3-4天傳代-次。
3H-胸苷攝取抑制-HaCat細(xì)胞(在完全培養(yǎng)的培養(yǎng)基中的250細(xì)胞)被接種到96-孔培養(yǎng)皿中，并在37℃用5％CO2和95％空氣溫育6天。以10x濃度溶于1％乙醇中的抑制劑在試驗(yàn)的開始立即加入。將3H-胸苷(5Ci/mmol，Amersham)以1μCi/孔的濃度加入，將細(xì)胞在生長周期的最后6小時脈沖標(biāo)記。然后將細(xì)胞在37℃，劇烈攪拌下胰蛋白化10分鐘，并用Micro Mate 196細(xì)胞收獲器(Packard)收獲到96-孔GF/C過濾板(Uni Filter，Packard)上。在40℃真空干燥20-30分鐘后，加入20μl MicroScint O閃爍計(jì)算劑(Packard)，結(jié)合在過濾器上的放射活性在TOP COUNT(Packard)上計(jì)數(shù)。結(jié)果列于表III中。
表III
式I化合物作為治療皮脂腺疾病的藥劑的有用活性可通過如下證明。人皮脂細(xì)胞增生的體外抑制
皮脂細(xì)胞通過結(jié)合酶法和機(jī)械法(Doran et al.，Characterization of Human Sebaceous Cells In Vitro，J.Invest.Dermatol.96341-8(1991))從成人皮脂腺分離出來。細(xì)胞在生長停滯的3T3鼠成纖維細(xì)胞層上，在含10％胎牛血清和4μg/ml地塞米松的Iscove′s培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細(xì)胞被平鋪于沒有試驗(yàn)化合物的培養(yǎng)基中，然后在啟動平鋪之后24-48小時在新鮮培養(yǎng)基中加入試驗(yàn)化合物。將培養(yǎng)物每48小時給含試驗(yàn)化合物的新鮮培養(yǎng)基。在收獲的那天，培養(yǎng)物用PBS(磷酸緩沖的鹽水)中的0.03％EDTA(乙二胺四乙酸)清洗，只除去3T3成纖維細(xì)胞，接著在0.05％胰蛋白/0.03％EDTA中溫育。將細(xì)胞懸浮，劇烈混合以制備單細(xì)胞懸浮液，并用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。
化合物的貯存溶液以在脫氣的100％乙醇中的10-2M溶液補(bǔ)償，并在-20℃暗處貯存。在實(shí)驗(yàn)應(yīng)用期間，已被等分的溶液被升至室溫，并通過直接稀釋到完整的培養(yǎng)基中成適當(dāng)?shù)臐舛榷鴳?yīng)用。
將化合物在10-6，10-7和10-8M試驗(yàn)體外皮脂細(xì)胞生長的增生抑制。結(jié)果列于表IV中，為與載體處理的培養(yǎng)物相比抑制50％皮脂細(xì)胞增生(ED50)所需化合物的量(nM)。
表IV在鼠中的鈣耐受試驗(yàn)
鈣穩(wěn)定的深刻變化強(qiáng)烈地影響鼠的體重發(fā)展
鼠(25-30g體重)連續(xù)4天接受化合物的每日皮下給藥。在5天處理周期剛開始之前和結(jié)尾登記體重?！白罡吣褪軇┝俊?HTD)是在此處理期間導(dǎo)致零體重增長的劑量。結(jié)果列于表V。
表V
式I化合物當(dāng)局部施用于皮膚時，逆轉(zhuǎn)與光傷害有關(guān)的狀況，因而減緩和阻止由日光曝曬引起的皮膚傷害。由日光曝曬引起的傷害包括早衰，彈性組織變性和起皺。此傷害在老年患者身上更明顯。通過以有效量對皮膚局部施用式I化合物逆轉(zhuǎn)與光傷害有關(guān)的狀況，達(dá)到皮膚修復(fù)的加速，增強(qiáng)皮膚的光滑性并顯得更年輕。式I化合物將被施用到被光傷害影響或需要治療的皮膚的部分或區(qū)域。根據(jù)本發(fā)明的式I化合物的應(yīng)用可提供抗老化和抗皺作用，以及促進(jìn)太陽傷害的皮膚的修復(fù)。
式I化合物，或式I化合物的組合可以根據(jù)本發(fā)明以常規(guī)局部組合物施用于人皮膚。這些組合物可被用于將式I化合物施用于身體的皮膚，尤其是臉，腿，胳膊和手。優(yōu)選的將式I化合物局部施用以產(chǎn)生最佳效果的方法將在當(dāng)患者年齡在30至55歲之間開始，當(dāng)彈性組織變性開始出現(xiàn)時，并變得更明顯。據(jù)此，此組合物可被連續(xù)地施用于患者以減少與陽光曝曬有關(guān)的作用和傷害。一般地，優(yōu)選地當(dāng)患者達(dá)到大約30歲時開始治療，并貫穿其一生繼續(xù)治療，以減少彈性組織變性作用并預(yù)防光傷害的進(jìn)一步發(fā)展。
式I化合物可以根據(jù)本發(fā)明以任何常規(guī)的合適局部制劑給藥，即，與可用于局部給藥的任何合適的普通載體結(jié)合。因此，式I化合物可以根據(jù)本發(fā)明以任何合適的局部組合物如乳膏，軟膏，肥皂，溶液，洗劑，乳劑，洗發(fā)水等等給藥。一般地，為了最有效的結(jié)果，這些局部組合物含有整個組合物重量的約0.00001％至約0.1％的式I化合物，而含組合物重量的約0.0001％至約0.1％的量是特別優(yōu)選的。如果需要，可以根據(jù)性質(zhì)和彈性組織變性的程度應(yīng)用更高的濃度。
在配制這些組合物時，可以應(yīng)用任何使式I化合物穩(wěn)定的常規(guī)無毒的，皮膚可接受的基質(zhì)或載體。用于本發(fā)明的優(yōu)選的組合物是常規(guī)的美容組合物，可以含有對人皮膚局部給藥以產(chǎn)生美容作用的美容活性成份。在可被用于此組合物的常規(guī)美容活性物中包括防曬劑，穿透阻滯劑，溫化劑，表面活性劑，潤滑劑，著色劑，調(diào)理劑，殺菌劑，收斂劑，洗滌劑，等等。如果需要，本發(fā)明的局部組合物可以含有合適的防曬劑。任何常規(guī)防曬劑都可被用于配制含有根據(jù)本發(fā)明可被應(yīng)用的式I化合物的制劑。
這些含有式I化合物的局部組合物可含有常用于制備局部組合物的任何常規(guī)賦形劑和佐劑。在常規(guī)佐劑或賦形劑中，根據(jù)本發(fā)明可被用于制備這些美容組合物的有防腐劑，增稠劑，香料等等。另外，常規(guī)抗氧化劑，如丁基化的羥基茴香醚(BHA)，抗壞血酸棕櫚酸酯，棓酸丙脂，檸檬酸，丁基化的羥基甲苯(BHT)，ethoxyquin，生育酚，等等可被摻入這些組合物中。這些局部組合物可以含有用于局部應(yīng)用的常用于這些組合物中的常用載體。這些組合物可含有增稠劑，濕潤劑，乳化劑和粘度穩(wěn)定化劑，如常用的那些。另外，這些組合物可含有常用于制備美容組合物的調(diào)味劑，著色劑，和香料。
含有式I化合物的局部組合物可被用于皮膚，并且優(yōu)選地每天施用于皮膚一次。為了得到彈性組織變性的逆轉(zhuǎn)以給予皮膚光滑和年輕的外觀，局部組合物優(yōu)選地施用6個月的周期。之后，應(yīng)連續(xù)施用含有式I化合物的組合物以保持更年輕和更光滑的皮膚的效果。這些制劑可以根據(jù)患者的需要由開處方的醫(yī)生確定施用。在任何情況下，用于將此組合物施用于患者的具體制度將典型地取決于個體的年齡，重量和皮膚狀況。
式I化合物用于逆轉(zhuǎn)陽光曝曬的皮膚的光傷害的有用活性可以如下證明由式I化合物修復(fù)無毛鼠身上的UVB-誘導(dǎo)的表皮傷害
將裸鼠(雌性，HRS/J系，Jackson Labs，在實(shí)驗(yàn)開始時5-7周齡) 籠罩于黃光中，并用放在動物上方約20cm的一排8個Westing-house Sunlamps(FS72T12HO，峰輻射在313nm)每周照射三次。用SEE240檢測器在International Light ResearchRadiometer，IL 1700型上測量UVB輸出。用此裝置，燈泡輸出約3.5m W/cm2，對0.06J/cm2的曝曬時間是約17秒；1MED是約0.03J/cm2。精確的劑量通過IL 844A Phototherapy ExposureControl輸送。日劑量0.03J/cm2兩周，0.06J/cm2兩周，此后0.08J/cm2，直至積累總劑量大約4J/cm2。為了實(shí)施表皮傷害的修復(fù)，將UVB輻射中斷，動物被分成約8組，每周用各種濃度的溶于乙醇中的維生素D類似物處理三次。所有用藥都在黃光下進(jìn)行。包括只用丙酮處理的對照組。將背部皮膚的兩-cm條在照射(和處理)區(qū)域中心的下方縱向取下。將彈性硬蛋白纖維用Luna′s醛品紅和膠原由Van Gieson染色。在此模型中，修復(fù)由從表皮延伸至壓縮的彈性硬蛋白層的正?；钠つw的外觀定義。修復(fù)的程度由此區(qū)域的寬度反映。在這些研究中，因?yàn)閹捗黠@變化，在標(biāo)準(zhǔn)長度的組織橫斷面上的區(qū)域面積通過圖像分析測量?；衔镌谌齻€劑量試驗(yàn)并計(jì)算近似ED50。
結(jié)果在表VI中給出。
表VI
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001對載體對照化合物A是1，25-二羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇。
下面實(shí)施例用于進(jìn)一步描述本發(fā)明，并不在任何意義上限制本發(fā)明。
實(shí)施例1
在氬氣氛中，往電磁攪拌的14.06g(25mmol)〔1R-〔1α(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕八氫-4-羥基-β，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醇在75ml二氯甲烷中的溶液中加入47ml(33.8g，331mmol)乙酐，接著加入53.5ml吡啶和1.0g二甲基氨基吡啶。3.5小時后，加入25ml甲醇。15分鐘后，將反應(yīng)混合物倒入750ml 1M磷酸中，加入400ml二氯甲烷。分相，水相用500ml二氯甲烷萃取多于2次。有機(jī)相用250ml水洗，接著用750ml 1M碳酸氫鈉洗，用Na2SO4干燥后，過濾，并蒸發(fā)，給出19.85g(定量)〔1R〔1α(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-4-(乙酰氧基)八氫-β，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醇乙酸酯白色固體。
實(shí)施例2
在氬氣氛中，往電磁攪拌的20.81g(20.6mmol)〔1R-〔1α(S*)，3aα，4β，7a，β〕〕-4-(乙酰氧基)八氫-β，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醇乙酸酯在200ml甲醇中的溶液中加入8.18g(77.2mmol)碳酸鈉。將懸浮液攪拌16小時，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上將絕大部分甲醇減壓除去。將濃縮物分配在300ml水和250ml乙醚之間。水相用250ml乙醚萃取多于3次，醚相用300ml水洗，Na2SO4干燥，過濾，并蒸發(fā)給出18.02g粗產(chǎn)物。中壓層析LC(Waters 500)，用2∶1己烷-乙酸乙酯洗脫，給出1.42g未水解的二乙酸酯，16.08g(90％產(chǎn)率)〔1R〔1α(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-4-(乙酰氧基)-八氫-β，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醇無色油。
實(shí)施例3
將配有磁攪拌器，溫度計(jì)，和滴液漏斗并保持在氬氣氛中的二升三頸燒瓶中裝入6.62ml(75.8mmol)草酰氯在50ml二氯甲烷中的溶液。燒瓶在干冰-丙酮浴中冷至-65℃；然后在保持溫度為-62°至63°時，以超過20分鐘的速度滴加10.7ml(151mmol)二甲亞砜在125ml二氯甲烷中的溶液。加完后，反應(yīng)物再攪拌5分鐘；然后保持溫度在-65°，超過20分鐘滴加16.0g〔1R-〔1α(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-4-(乙酰氧基)-八氫-β，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醇在200ml二氯甲烷(在40_分子篩上干燥)中的溶液。在加入期間形成沉淀。在-70°另外20分鐘后，15分鐘內(nèi)加42.1ml(302mmol)三乙胺在75ml干燥的二氯甲烷中的溶液。將懸浮液攪拌45分鐘，移走冷浴，使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫(1.5小時)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上減壓(室溫浴)除去絕大部分二氯甲烷，剩余物用500ml水和750ml乙醚分配。水相用750ml乙醚萃取3次，醚相用500ml水以逆流方式洗滌，用Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸發(fā)給出l5.36g粗產(chǎn)物。中壓硅膠層析，用4∶1己烷-乙醚作洗脫劑(在氮?dú)夥罩惺占闯鲆?給出14.95g(94％產(chǎn)率)〔1R-〔1α(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-4-(乙酰氧基)-八氫-α，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醛無色油。
實(shí)施例4
在氬氣氛中，往電磁攪拌的2.0g(7.95mmol)〔1R-〔1α(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-4-(乙酰氧基)-八氫-α，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醛在10ml乙醚中的溶液中加入100m Pd/C。室溫20分鐘后，將懸浮液過濾。將濾液減壓蒸發(fā)。往剩余物中加入1.40g(9.5mmol)亞芐基丙酮和200mg Pd/C。懸浮液通過抽空脫氣，用氬氣再充滿燒瓶。然后將燒瓶部分浸漬于230℃油浴中30分鐘。冷卻后，燒瓶的內(nèi)容用100g硅膠快速層析，從Δ17E，Δ172，Δ16，和Δ20茚烯烴的平衡混合物，它們分別以65∶4∶27∶4的比率存在，中除去更極性的亞芐基丙酮和其還原產(chǎn)物(芐基丙酮)。用硝酸銀浸漬的硅膠柱(兩道)中壓層析以較少極性(以洗脫順序?yàn)棣?72，Δ16，和Δ20)的烯烴分出所需產(chǎn)物(Δ17E)。純化可以接著用tlc板，該板在使用前用10％硝酸銀的乙腈溶液噴霧并晾干。這樣，得到總共976mg(55％產(chǎn)率)〔3aR-(1E，3aα，4β，7aβ)〕-1-乙亞基八氫-7a-甲基-1H-茚-4-醇乙酸酯無色油。
更極性的混合物(420mg，24％產(chǎn)率)可以通過加到后續(xù)醛裂解反應(yīng)中普通地再平衡。
實(shí)施例5〔3aS-〔3(1R*，2R*S*，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔2-羥基-1-甲基-4-(三甲基甲硅烷基)-2-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇乙酸酯
往配有攪拌器，滴液漏斗，溫度計(jì)、和氫氣通頭的火焰干燥的兩升三頸燒瓶中裝入22.3g(100mmol)〔3aR-(1E，3aα，4β，7aβ)〕-1-亞乙基八氫-7a-甲基-1H-茚-4-醇乙酸酯和干燥的二氯甲烷。將溶液用根據(jù)需要加入干冰的丙酮浴冷卻至-20°。此時，將試劑增量加入。開始，在5分鐘內(nèi)快速滴加200ml(200mmol)1M氯化二甲基鋁的己烷溶液，10分鐘后，接著在1小時內(nèi)慢慢滴加50ml用干燥的二氯甲烷稀釋至260ml的55.5g(500mmol)3-三甲基甲硅烷基丙醛溶液。試劑的加入以此方式重復(fù)多于4次，用100ml(100mmol)1M二甲基氯化鋁的己烷溶液，接著在1小時內(nèi)慢慢加入50ml 3-三甲基甲硅烷基丙醛。最后加完后，TLC(CH2Cl2-Et2O，98∶2)確證原料烯烴不存在，在劇烈攪拌下將反應(yīng)混合物例入2L 20％Rochelle鹽溶液中，往其中加入約500g冰(最終溫度為20°)。通過加入25ml 4N氫氧化鈉使混合物成堿性，并加入1 L乙醚。分相，乙醚相用500ml食鹽水洗滌。水相用1.5升乙醚以逆流方式萃取，用Na2SO4干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，給出78g油。由于產(chǎn)物與副產(chǎn)物4-三甲基甲硅烷基-3-丁炔-2-醇分開困難而使中壓硅膠層析復(fù)雜化。隨后，最好是揮發(fā)4-三甲基甲硅烷基-3-炔-2-醇而將其從層析洗出液中除去。這樣，得到25.54g更極性的純的主要異構(gòu)體，2.07g主要和次要異構(gòu)體87∶13混合物(由NMR估計(jì))，和0.53g純的次要異構(gòu)體?？偖a(chǎn)率為79％(主要異構(gòu)體77％產(chǎn)率)。
從乙酸乙酯-己烷中得到主要異構(gòu)體的分析樣品，〔3aS-〔3(1R*，2S*，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔2-羥基-1-甲基-4-(三甲基甲硅烷基)-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇乙酸酯，m.p.66-67°，白色固體。
得到次要異構(gòu)體的分析樣品，〔3aS-〔3(1R*，2R*，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔2-羥基-1-甲基-4-(三甲基甲硅烷基)-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇乙酸酯無色油。
實(shí)施例6
往磁攪拌的24.2 g(69mmol)〔3aS-〔3(1R*，S*，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔2-羥基-1-甲基-4-(三甲基甲硅烷基)-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇乙酸酯在300ml干燥的二氯甲烷和23.3ml干燥的吡啶中的溶液中加入25.0g(145mmol)氯代硫代甲酸苯基酯。形成琥珀色。將反應(yīng)混合物攪拌3小時，然后加入10ml甲醇。15分鐘后，將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到含1升乙醚的分液漏斗中。醚相依次用2×250ml 1M磷酸，500ml水，和500ml 1M碳酸氫鈉洗滌。水相用500ml乙醚以逆流方式萃取。合并的乙醚相用Na2SO4干燥，過濾，并減壓蒸發(fā)結(jié)出47g粗產(chǎn)物。用500g硅膠快速層析給出33.4g(定量產(chǎn)率)硫代羰基碳酸酯。
往配有攪拌器，滴液漏斗，溫度計(jì)，和氬氣導(dǎo)管的兩升三頸燒瓶中裝入在500ml甲苯中的33.4g(69mmol)上述硫代羰基碳酸酯，在5分鐘內(nèi)快速滴加135ml(500mmol)三正丁基氫化錫，接著在15分鐘內(nèi)加入276ml(276mmol)三乙基硼烷。1.3小時后，加入額外的15ml(56mmol)三正丁基氫化錫。50分鐘后，將反應(yīng)混合物倒入500ml10％碳酸氫鈉中，并加入500ml乙醚。醚相用250ml水以逆流方式洗三次。用Na2SO4干燥后，過濾，減壓蒸發(fā)，給出粗產(chǎn)物，將其用500g硅膠快速層析。含有在二氯甲烷溶液中的洗出部分的產(chǎn)物用10％碳酸鈉洗滌以除去在反應(yīng)中形成的苯酚。中壓層析需要幾次通過以除去副產(chǎn)物并給出16.13g純的〔3aS-〔(1S*，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔1-甲基-4-(三甲基甲硅烷基)-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇乙酸酯無色油。實(shí)施例7〔3aS-〔1(S*)，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔1-甲基-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇
往5.01g(15mmol)3aS-〔(1S*，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔1-甲基-4-(三甲基甲硅烷基)-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇乙酸酯在50ml乙醇中的溶液中加入30ml(60mmol)2N氫氧化鈉，并在80℃加熱4小時。然后用500ml K-食鹽水(1∶1)稀釋，用乙酸乙酯充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(4∶1)快速層析給出3.14g(95.4％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例8
〔3aS-〔(1S*)，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔1-甲基-3-丁炔基〕-3a-甲基-7-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-1H-茚
往3.14g(14.4mmol)〔3aS-1(S*)，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔1-甲基-3-丁炔基〕-3a-甲基-1H-茚-7-醇在30ml無水二氯甲烷中的溶液中加入4.22ml(28.8mmol)1-(三甲基甲硅烷基)咪唑，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時。然后通過加入碎冰淬滅，并攪拌15分鐘。用水和食鹽水稀釋后，用己烷充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-二氯甲烷(40∶1)快速層析，給出3.55g(85％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例9
〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-4-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3H-茚
在氬氣氛中，-78℃，往612mg(2.10mmol)〔3aS-〔1(S*)，3aβ，7β，7aα)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-〔1-甲基-3-丁炔基〕-3a-甲基-7-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-1H-茚在15ml無水乙醚中的溶液中加入1.6ml(2.52mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。在-78℃攪拌1小時后，加入1.5ml(21mmol)無水丙酮，繼續(xù)攪拌1小時。將反應(yīng)用水-鹽水(1∶1)淬滅，并用乙酸乙酯充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。通過用己烷-乙酸乙酯(9∶1)快速層析再生166mg(27％)原料，并給出521mg(71％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例10
〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇
往攪拌的521mg(1.50mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-4-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3H-茚在10ml無水四氫呋喃中的溶液中加入3ml(3mmol)1M氟化四丁基銨。混合物在室溫?cái)嚢?.5小時，然后用水和食鹽水稀釋，并用乙酸乙酯充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物是晶體。將其用己烷重結(jié)晶給出360mg(87％)標(biāo)題化合物，m.p.115-116℃(從己烷中得來)。
實(shí)施例11
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-4H-茚-4-酮
往240mg(0.868mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇在7ml無水二氯甲烷中的溶液中加入980mg(2.6mmol)重鉻酸吡啶鎓。此混合物在室溫?cái)嚢?小時，然后再加入500mg(1.33mmol)重鉻酸吡啶鎓，繼續(xù)攪拌2.25小時。加入30ml乙醚后，攪拌15分鐘，將混合物濾過硅藻土，硅藻土墊用3×50ml乙酸乙酯洗滌。合并的濾液用20ml 1N HCl，水，40ml 2N碳酸氫鉀，和水和食鹽水1∶1洗滌。水層用2×100ml乙酸乙酯再萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯2∶1快速層析，給出214mg(89％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例12
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-己炔基)-7a-甲基-4H-茚-4-酮
往214mg(0.78mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-4H-茚-4-酮在7ml無水二氯甲烷中的溶液中加入750mg(4.7mmol)1-(三甲基甲硅烷基)咪唑。混合物在室溫下在氬氣氛中攪拌17小時，然后用5ml水淬滅，攪拌20分鐘。然后用3×100ml乙酸乙酯萃取。萃取液被合并，用5×50ml水和食鹽水混合物洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(12∶1)快速層析給出255mg(94％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例131，25-二羥基-16-烯-23-炔-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往攪拌的730mg(1.25mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦，一個已知化合物，在7ml無水四氫呋喃中的溶液中滴加0.78ml(1.25mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，往這樣得到的紅色溶液中在10分鐘的期間滴加255mg(0.736mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-己炔基)-7a-甲基-4H-茚-4-酮在4.5ml無水四氫呋喃中的溶液，反應(yīng)混合物在-78℃攪拌90分鐘。反應(yīng)然后通過加入10ml 1∶1的2N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀混合物而淬滅，并使其溫?zé)嶂潦覝亍Ｔ偌尤?0ml Rochelle鹽/碳酸氫鉀溶液，反應(yīng)混合物用3×100ml乙酸乙酯萃取。萃取液用鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯40∶1快速色譜純化給出467mg(89％)三甲基甲硅烷基化的中間體。往三甲基甲硅烷基化的中間體(467mg)在4.5ml無水四氫呋喃中的溶液中加入7ml(7mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。此混合物在氬氣氛中室溫下攪拌17小時。反應(yīng)然后通過加入5ml水而淬滅，并攪拌20分鐘。真空除去四氫呋喃，剩余物用水稀釋并用3×100ml乙酸乙酯萃取。萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯1∶5快速層析純化給出250mg(83％)晶狀標(biāo)題化合物。將其從1.5ml四氫呋喃通過加入7ml甲酸甲酯重結(jié)晶；m.p.148-149℃。
實(shí)施例14
〔1(S*)，3a R-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3Z-己烯基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇
1.02g(3.6mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇，13.5ml乙酸乙酯，34ml己烷，1.3ml無水乙醇，0.067ml喹啉和225mgLindlar催化劑的混合物在室溫下攪拌3.5小時。將反應(yīng)混合物濾過硅藻土墊，隨后將墊用乙酸乙酯洗滌。合并的濾液用1N HCl，水，2N碳酸氫鉀，水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯3∶2用硅膠制備性HPLC純化。給出954mg(92.6％)標(biāo)題化合物，m.β.88-90℃(得自CH2Cl2-己烷)。
實(shí)施例15〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基己基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇
往601mg(2.16mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3Z-己烯基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇在35ml無水二氯甲烷中的溶液中加入120mg1，4-雙(二苯基膦基)丁烷1，5-環(huán)辛二烯銠四氟硼酸鹽和1滴汞，然后用Paar裝置在室溫和50p.s.i.壓力下氫化1.25小時。TLC(己烷-乙酸乙酯，3∶2)顯示反應(yīng)已完成。將反應(yīng)混合物濾過硅藻土墊，然后將該墊用乙酸乙酯洗滌。合并的濾液被蒸發(fā)至干。通過用己烷-乙酸乙酯3∶2快速層析而純化，然后通過用硅膠柱用己烷-乙酸乙酯3∶2，100ml/分制備性HPLC純化。給出550mg(91％)晶狀標(biāo)題化合物。
實(shí)施例16
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基己基)-7a-甲基-4-茚-4-酮
往270mg(0.963mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，4β，7aβ)〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基己基)-7a-甲基-3H-茚-4-醇在7ml無水二氯甲烷中的溶液中加入1.58g(4.2mmol)重鉻酸吡啶鎓。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?.75小時。然后用25ml乙醚稀釋，再攪拌15分鐘，濾過硅薄土墊。將該墊用3×50ml乙醚洗滌。合并的濾液用40ml2N碳酸氫鉀和水-鹽水混合物洗滌。水層用2×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(2∶1)快速層析純化給出254mg(95％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例17
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)基〕-7a-甲基-4H-茚-4-酮
往254mg(0.912mmol)〔1(S*)，3aR-(3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基己基)-7a-甲基-4H-茚-4-酮在6ml無水二氯甲烷中的溶液中加0.8ml(5.45m mol)1-(三甲基甲硅烷基)咪唑。反應(yīng)混合物在室溫下，氬氣中攪拌4.25小時。然后通過加入5ml水并攪拌5分鐘淬滅，用3×90ml乙酸乙酯萃取。萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(12∶1)快速層析純化，給出308mg(96％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例181，25-二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往攪拌的850mg(1.46mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在9ml無水四氫呋喃中的溶液中滴加0.91ml(1.46mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，往這樣得到的紅色溶液中在10分鐘內(nèi)滴加308mg(0.878mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-1-(1，5-二甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕己基)-7a-甲基-4H-茚-4-酮在4.5ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時，然后通過加入10ml1∶1的2N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀混合物并溫?zé)嶂潦覝囟銣?。加?0ml Rochelle鹽/碳酸氫鉀后、混合物用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用鹽水洗，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物通過用己烷-乙酸乙酯50∶1快速層析給出541mg甲硅烷基化的中間體。
往此中間體在5ml無水四氫呋喃中的溶液中加入5.5ml(5.5mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，溶液在室溫下氬氣中攪拌23小時。反應(yīng)用5ml水淬滅并攪拌20分鐘。加入25ml食鹽水后，用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物首先通過用己烷-乙酸乙酯(1∶9)快速層析，然后通過HPLC(硅膠柱)用乙酸乙酯純化，給出296mg(81％)晶狀標(biāo)題化合物，m.p.124-125℃(甲酸甲酯)。
實(shí)施例19
〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-4-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3H-茚
在配有導(dǎo)氣管的100ml心形燒瓶內(nèi)放入1g(3.44mmol)〔3aS-〔1(S*)，3aβ，7β，8aα〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3-(1-甲基-3-丁炔基〕-3a-甲基-7-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-1H-茚在25ml無水四氫呋喃中的溶液。冷卻至-78℃后，在10分鐘內(nèi)滴加3.2ml(5.16mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液，產(chǎn)生的混合物被攪拌30分鐘。加入10ml無水四氫呋喃后，將六氟丙酮?dú)饬鞴娜牖旌衔镏?分鐘。攪拌1小時15分鐘后，TLC顯示反應(yīng)約70％完成。此時通過加入25ml飽和食鹽水淬滅反應(yīng)，接著溫?zé)嶂潦覝?。然后用己烷萃取。合并的有機(jī)萃取液用食鹽水洗，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(10∶1)快速層析純化。給出270mg(27％)原料和1.15g(73％)標(biāo)題化合物。
在第二個實(shí)驗(yàn)中，在氬氣氛中，-78℃，往起始的炔1.38g(4.75mmol)在20ml無水四氫呋喃中的溶液在10分鐘內(nèi)滴加4.5ml(7.2mmol)1.6M正丁基鋰己烷溶液。攪拌30分鐘后，以低速鼓入六氟丙酮2分鐘。攪拌30分鐘，再鼓入1分鐘，攪拌60分鐘，最后鼓入30秒并攪拌30分鐘。此時TLC顯示反應(yīng)完成。在此實(shí)驗(yàn)中，反應(yīng)用2N Rochelle鹽淬滅，并通過用己烷-乙酸乙酯(14∶1)快速層析純化。給出1.97g(91％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例20
〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-3H-茚-4-醇
往1.17g(2.56mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7 a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-4-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3H-茚在20ml無水四氫呋喃中的溶液加入7.12ml(7.12mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，并在氬氣氛中攪拌3.5小時。反應(yīng)混合物然后用250ml水-食鹽水1∶1混合物稀釋，并用乙酸乙酯充分萃取。萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過快速層析純化給出946mg(96％)標(biāo)題化合物；從己烷重結(jié)晶后m.p.75-76℃。
實(shí)施例21
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-4H-茚-4-酮
往284mg(0.74mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-3H-茚-4-醇在10ml無水二氯甲烷中的溶液分批加入2.15g(5mmol)重鉻酸吡啶鎓，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時。加入50ml乙醚并攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物濾過硅藻土墊，該墊隨后用3×50ml乙酸乙酯洗滌。合并的濾液用2NHCl，水，2N碳酸氫鉀，水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(3∶1)快速層析純化，給出259mg(91％)晶狀標(biāo)題化合物。
實(shí)施例22
1，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往攪拌的987mg(1.69mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在10ml無水四氫呋喃中的溶液滴加1.05ml(1.69mmol)1.6M正丁基鋰己烷溶液。攪拌15分鐘后，往這樣得到的紅色溶液中滴加259mg(0.677mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-4H-茚-4-酮在5ml無水四氫呋喃中的溶液，這樣得到的反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時。然后通過加入2N Rochelle鹽溶液并溫?zé)嶂潦覝卮銣绶磻?yīng)。加入飽和食鹽水后，用乙酸乙酯充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物通過用己烷-乙酸乙酯(9∶1)快速層析純化，給出370mg中間體二甲硅烷基醚。
往此中間體(370mg)在10ml無水四氫呋喃中的溶液加入3ml(3mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，這樣得到的反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。然后用水和食鹽水稀釋，用4×50ml乙酸乙酯充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(1∶4)快速層析給出標(biāo)題化合物泡沫。
實(shí)施例23
〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3E-己炔基〕-3H-茚-4-醇
在氬氣中，冰浴冷卻下，往攪拌的165mg(4.34mmol)氫化鋁鋰在15ml無水四氫呋喃中的懸浮液首先加入235mg(4.34mmol)固體甲醇鈉，然后滴加溶于10ml無水四氫呋喃的334mg(0.87mmol)〔3aR-1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-3H-茚-4-醇。這樣得到的反應(yīng)混合物被加熱回流(80℃)2.5小時，TLC指示反應(yīng)完成。將混合物在冰浴中冷卻，然后小心地用1ml水和1ml2N氫氧化鈉淬滅。加入20ml乙醚后，將其攪拌0.5小時，加入2.2g硫酸鎂，攪拌0.5小時，過濾并蒸發(fā)至干。給出335mg(100％)晶狀標(biāo)題化合物(TLC純)。
實(shí)施例24
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3E-己烯基〕4H-茚-4-酮
往256mg(0.66mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3E-己烯基〕-3H-茚-4-醇在10ml無水二氯甲烷中的溶液分批加入1.12g(3mmol)重鉻酸吡啶鎓，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時。加入25ml乙醚并攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物濾過硅藻土墊，將該墊隨后用3×20ml乙酸乙酯洗滌。合并的濾液用2N碳酸氫鉀，水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用二氯甲烷-乙酸乙酯(9∶1)快速層析純化，給出230mg(90％)晶狀標(biāo)題化合物。
實(shí)施例25
〔1(S*)，3aR(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-(三甲基甲硅烷基)氧基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3E-己烯基〕-4H-茚-4-酮
在室溫下，往攪拌的268mg(0.697mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3E-己烯基〕-4H-茚-4-酮在8ml無水二氯甲烷中的溶液加入0.92ml(6.27mmol)1-(三甲基甲硅烷基)咪唑，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。然后將反應(yīng)混合物用水稀釋，并用己烷充分萃取。合并的萃取液用水和食鹽水洗至中性，硫酸鎂干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯9∶1快速層析純化給出310mg(97％)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例26
1，25-二羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往攪拌的725mg(1.24mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在15ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.78ml(1.24mmol)1.6M正丁基鋰己烷溶液。攪拌5分鐘后，往這樣得到的紅色溶液中滴加307mg(0.672mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-(三甲基甲硅烷基)氧基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3E-己烯基〕-4H-茚-4-酮在9ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2.5小時，然后用水淬滅，使其溫?zé)嶂潦覝?。進(jìn)一步用水稀釋后，將其用3×30ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。這樣得到的二甲硅烷基醚中間體通過用己烷-乙酸乙酯9∶1快速層析，給出449mg純中間體(25-甲硅烷氧基在反應(yīng)期間被水解)。
往此中間體(449mg)在10ml無水四氫呋喃中的溶液中加入3.6ml(3.6mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，這樣得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。反應(yīng)用冰淬滅，攪拌15分鐘，用水和食鹽水稀釋，用乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(1∶2)快速層析純化，給出標(biāo)題化合物白色泡沫，291mg(83％)。
實(shí)施例27
〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3Z-己烯基〕-3H-茚-4-醇
1.62g(4.21mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-3H-茚-4-醇，16ml乙酸乙酯，40ml己烷，1.6ml無水乙醇，0.080ml喹啉和320mg Lindlar催化劑的混合物在氫氣氛中室溫?cái)嚢?0分鐘。然后將其濾過硅藻土，濾餅用3×60ml乙酸乙酯洗滌。濾液用25ml 1N HCl洗滌，并用水和食鹽水的混合物洗4次。水層用2×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(3∶1)在硅膠柱上HPLC純化，流速100ml/分，給出1.51g(93％)標(biāo)題化合物白色固體。
實(shí)施例28
〔1(S*)，3aR(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7 a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3Z-己烯基〕-4H-茚-4-酮
往750mg(1.94mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，4β，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3Z-己烯基〕-3H-茚-4-醇在14ml二氯甲烷中的溶液分批加入3.64g(9.68mmol)重鉻酸吡啶鎓，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時。然后往反應(yīng)混合物中加入30ml乙醚，攪拌15分鐘，濾過硅藻土墊，該墊用3×50ml乙醚洗滌。合并的濾液用2N碳酸氫鉀(50ml)洗滌，并用水和鹽水1∶1洗三次。水層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯快速層析純化，給出720mg(96.5％)標(biāo)題化合物白色固體。
實(shí)施例29
〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-三甲基甲硅烷氧基-1-甲基-5-三氟甲基-3Z-己烯基〕-4H-茚-4-酮
在室溫下，往攪拌的720mg(1.87mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-三氟甲基-3Z-己烯基〕-4H-茚-4-酮在13ml無水二氯甲烷中的溶液加入1.86ml(12.68mmol)1-三甲基甲硅烷基咪唑，反應(yīng)混合物在氬氣氛中攪拌17小時。反應(yīng)然后用7ml水淬滅并攪拌15分鐘，加入20ml鹽水，并用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水和鹽水洗5次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(9∶1)快速層析純化，給出825mg(96.5％)無定形標(biāo)題化合物。
實(shí)施例301，25-二羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往攪拌的555mg(0.952mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在6ml無水四氫呋喃的溶液中滴加0.595ml(0.952mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)往這樣得到的紅色溶液中滴加270mg(0.591mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-三甲基甲硅烷氧基-1-甲基-5-三氟甲基-3Z-己烯基〕-4H-茚-4-酮在4ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1.75小時，然后通過加入10ml 2N Rochelle鹽并溫?zé)嶂潦覝囟銣纭⑵溆?0ml 2N Rochelle鹽稀釋，并用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗的甲硅烷基化的中間體通過用己烷-乙酸乙酯(10∶1)快速層析純化，給出355mg純中間體。氬氣保護(hù)下，往此中間體在4ml無水四氫呋喃中的溶液加入3.8ml(3.8mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?9小時。然后用5ml水淬滅反應(yīng)并攪拌15分鐘。用20ml食鹽水稀釋后，將其用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水和食鹽水的混合物洗4次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(1∶3)快速層析純化，給出237mg(77％)晶狀標(biāo)題化合物；m.p.120-122℃(從四氫呋喃-甲酸甲酯重結(jié)晶)。
實(shí)施例311，25-二羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-19-降-膽鈣化甾醇
將700mg(1.23mmol)〔3R-(3α，5β，Z)-3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在7ml無水四氫呋喃中的溶液在干冰浴中冷卻至-78℃，并在氬氣氛中用0.77ml(1.23mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液處理并攪拌5分鐘。在10分鐘內(nèi)往其中滴加277mg(0.607mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-三甲基甲硅烷氧基-1-甲基-5-三氟甲基-3Z-己烯基〕-4H-茚-4-酮在4ml無水四氫呋喃中的溶液。這樣得到的反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時。加入10ml 2N Rochelle鹽后，將其溫?zé)嶂潦覝?。進(jìn)一步用25ml 2N Rochelle鹽稀釋后，將其用3×100ml乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用鹽水洗，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物用己烷-乙酸乙酯(10∶1)硅膠柱層析，接著用己烷-乙酸乙酯(1∶3)洗脫回收環(huán)A前體。給出329mg環(huán)A二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
往329mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物在2.5ml無水四氫呋喃中的溶液加入4.4ml(4.4mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?5小時。然后將其用10ml水淬滅，攪拌15分鐘，加入20ml食鹽水，并用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物先用己烷-乙酸乙酯(1∶8)快速色譜，然后用硅膠柱HPLC純化，給出210mg(68％)標(biāo)題化合物白色泡沫。
實(shí)施例32
1α-氟-25-羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往460mg(0.977mmol)〔3S-(3α，5β，2)〕-2-〔2-〔2-亞甲基-3-氟-5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在6ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.61ml(0.976mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)滴加277mg(0.607 mmol)〔1(S*)，3aR-(3aα，7aβ)-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-(三甲基甲硅烷基)氧基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3Z-己烯基〕-4H-茚-4-酮在4ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)混合物然后在-78℃攪拌2小時。將其然后用10ml2N Rochelle鹽淬滅，并溫?zé)嶂潦覝?。進(jìn)一步用30ml 2N Rochelle鹽稀釋后，用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干給出630mg粗中間體。將其通過用己烷-乙酸乙酯(10∶1)快速層析純化，給出220mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。(在此過程中，25-甲硅烷基醚被水解)。在氬氣保護(hù)下，往220mg二甲硅烷基化的中間體在4ml無水四氫呋喃中的溶液加入2.5ml(2.5mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，然后在室溫?cái)嚢?8小時。此時，加入5ml水并攪拌15分鐘，接著加入20ml食鹽水，并用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(2∶1)快速層析純化，給出170mg(53％)標(biāo)題化合物白色泡沫。
實(shí)施例33
1α-氟-25-羥基-16-烯-23-炔-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣保護(hù)下，-78℃，往740mg(1.57mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-3-氟-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在8ml無水四氫呋喃中的溶液攪拌下滴加0.98ml(1.57mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)往這樣形成的紅色溶液中滴加262mg(0.685mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基)-3-己炔基〕-4H-茚-4-酮在5ml四氫呋喃中的溶液。然后將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時。然后通過加入15ml 1∶12N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀混合物淬滅，接著溫?zé)嶂潦覝?。加?0ml相同的鹽混合物后，用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物通過用己烷-乙酸乙酯(5∶1)硅膠柱快速層析給出250mg單甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
在氬氣保護(hù)下，往250ml甲硅烷基中間體在3ml無水四氫呋喃中的溶液中加入2.8ml(2.8mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。加入10ml水并攪拌15分鐘，然后用20ml食鹽水稀釋，用3×90ml乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水和食鹽水洗4次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(2∶1)硅膠柱快速層析并通過硅膠柱HPLC純化。給出175mg(49％)無定形標(biāo)題化合物。
實(shí)施例341α-氟-25-羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣保護(hù)下，-78℃，往攪拌的350mg(0.744mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-3-氟-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在5ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.463ml(0.74mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)，往這樣形成的紅色溶液中滴加230mg(0.503mmol)〔3aR-〔1(S*，3E)，3aα，7aβ〕〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7 a-甲基-1-〔6，6，6-三氟-1-甲基-5-(三氟甲基)-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-己烯基〕-4H-茚-4-酮在4.5ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌兩小時。然后通過加入10ml 1∶12N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀混合物淬滅并溫?zé)嶂潦覝?。加?0ml相同的鹽混合物后，用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物通過用己烷-乙酸乙酯硅膠柱快速層析純化給出236mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
在氬氣保護(hù)下，往236mg二甲硅烷基中間體在3.5ml無水四氫呋喃中的溶液加入3ml(3mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。通過加入5ml水并攪拌10分鐘而淬滅。用20ml食鹽水稀釋后，混合物用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗滌，硫酸干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(2∶1)硅膠柱快速層析，并用硅膠柱HPLC純化，給出140mg(53％)無定形標(biāo)題化合物。
實(shí)施例351，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-雙高-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣保護(hù)下，-78℃，往攪拌的435mg(0.746mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在5ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.465ml(0.744mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)往這樣得到的紅色溶液中滴加169mg(0.451mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，7aβ〕〕-1-〔5-乙基-1-甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-庚炔基〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-4H-茚-4-酮在4ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2.5小時。然后通過加入10ml 1∶12N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀混合物淬滅，并溫?zé)嶂潦覝?。加?5ml相同的鹽混合物后，用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物用己烷-乙酸乙酯(40∶1)硅膠柱快速層析純化，給出260mg三甲基甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
在氬氣氛中，往260mg三甲硅烷基化的中間體在3ml無水四氫呋喃中的溶液加入3ml(3mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌17小時，然后通過加入10ml水并攪拌10分鐘淬滅。用20ml水和食鹽水稀釋后，用3×80ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗4次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(1∶3)硅膠柱快速層析純化，給出158mg(80％)標(biāo)題化合物，從甲酸甲酯中結(jié)晶，m.p.103-105℃。
實(shí)施例361，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-雙高-19-降-20-表-膽鈣化甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往攪拌的300mg(0.525mmol)〔3R-反式-〔2-〔3，5-雙〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在4ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.325ml(0.520mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在5分鐘內(nèi)往這樣得到的紅色溶液中滴加77mg(0.205mmol)〔3aR-〔1(S*)，3aα，7aβ〕〕-1-〔5-乙基-1-甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-庚炔基〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-4H-茚-4-酮在2.5ml無水四氫呋喃中的溶液。反應(yīng)物在-78℃攪拌2.5小時。然后通過加入10ml 1∶12N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀并溫?zé)嶂潦覝囟銣?。進(jìn)-步用25ml相同的鹽混合物稀釋后，用3×75ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。殘余物通過用己烷-乙酸乙酯3硅膠柱快速層析給出58mg三甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
在氬氣保護(hù)下，往124mg三甲硅烷基中間體(從兩個偶合反應(yīng)得到)在2.5ml無水四氫呋喃中的溶液滴加2.5ml(2.5mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0小時。然后通過加入10ml水并攪拌15分鐘而淬滅。用20ml水的食鹽水稀釋后，用3×70ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗4次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(1∶7)硅膠柱快速層析純化給出74mg(25.3％)標(biāo)題化合物，用甲酸甲酯重結(jié)晶，m.p.130-132℃。
實(shí)施例371α-氟-25-羥基-16-烯-23-炔-26，27-雙高-20-表-膽鈣甾醇
在氬氣氛中，-78℃，往390mg(0.829mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-3-氟-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在5ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.53ml(0.848mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)往這樣得到的紅色溶液中滴加200mg(0.534mmol)〔3a R-〔1(S*)，3aα，7aβ〕〕-1-〔5-乙基-1-甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-庚炔基〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-4H-茚-4-酮在4.5ml無水四氫呋喃中的溶液。然后將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時，通過加入10ml 1∶12NRochelle鹽和2N碳酸氫鉀混和物并溫?zé)嶂潦覝囟銣?。?0ml相同的鹽混和物稀釋之后，用3X 100ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。剩余物通過用己烷-乙酸乙酯(30∶1)硅膠柱快速層析純化，給出254mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
往254mg二甲硅烷基中間體在3.5ml無水四氫呋喃中的溶液在氬氣保護(hù)下加入3.5ml(3.5mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?8小時，然后通過加入10ml水并攪拌15分鐘而淬滅。用20ml水和食鹽水稀釋之后，用3X 80ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗四次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(7∶4)硅膠柱快速層析，并通過用己烷-乙酸乙酯(3∶2)硅膠柱HPLC純化，給出195mg(67.6％)無定形標(biāo)題化合物。
實(shí)施例381α-氟-25-羥基-16，23E-二烯-26，27-雙高-20-表-膽鈣化甾醇
在氫氣氛中，-78℃，往240mg(0.51mmol)〔3S-(1Z，3α，5β)〕-〔2-〔5-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基〕氧基〕-3-氟-2-亞甲基亞環(huán)己基〕乙基〕二苯基氰化膦在5ml無水四氫呋喃中的溶液滴加0.319ml(0.51mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后，在10分鐘內(nèi)往這樣得到的紅色溶液中滴加103mg(0.273mmol)〔3aR-〔1(S*，3E)，3aα，7aβ〕〕-1-〔5-乙基-1-甲基-5-〔(三甲基甲硅烷基)氧基〕-3-庚炔基〕-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-4 H-茚-4-酮在4ml無水四氫呋喃中的溶液。將反應(yīng)混和物在-78℃攪拌2小時，然后放入冷凍器(-20℃)一小時，通過加入10ml 1∶12N Rochelle鹽和2N碳酸氫鉀混和物并溫?zé)嶂潦覝囟銣纭Ｓ昧硗?5ml相同的鹽混和物稀釋之后，用3X 90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和食鹽水洗三次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。剩余物通過用己烷-乙酸乙酯(1∶4)硅膠柱快速層析純化，給出145mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。
往145mg二甲硅烷基中間體在3ml無水四氫呋喃中的溶液在氬氣保護(hù)下加入1.7ml(1.7mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。反應(yīng)混和物在室溫?cái)嚢?8小時，然后通過加入10ml水并攪拌15分鐘而淬滅。用20ml水和食鹽水稀釋之后，用3X80ml乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水和食鹽水洗四次，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過用己烷-乙酸乙酯(3∶2)30mmX5”硅膠柱快速層析，并通過用己烷-乙酸乙酯(1∶1)硅膠柱HPLC純化。給出90mg(74％)標(biāo)題化合物；m.p.91-92℃，從乙酸甲酯-己烷結(jié)晶。
含有在下面實(shí)施例A至C中列出的比例的成分的乳膏，凝膠和溶液可以通過常規(guī)手段配制。參考化合物A，它是1，25-二羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，在這些實(shí)施例中是任何權(quán)利要求化合物的舉例。
實(shí)施例A
乳膏
實(shí)施例B
凝膠
實(shí)施例C
局部溶液
權(quán)利要求
1.下式化合物
其中R是氫，氟，或羥基，R2是氫，低級烷基或鹵素，X是＝CH2或當(dāng)R是羥基時，X是(H，H)或＝CH2，而A是-C≡C-，
或-CH2-CH2-，條件是當(dāng)A是-CH2-CH2-時，R2是氫或低級烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R是羥基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中A是-C≡C-。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中A是-CH2-CH2-。
5.權(quán)利要求2的化合物，其中A是
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是氟。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是氫。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是低級烷基，特別是甲基或乙基。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中R是氟。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中X是(H，H)。
11.權(quán)利要求1的化合物
1，25-二羥基-16-烯-23-炔-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-19-降-膽鈣化甾醇，
1α-氟-25-羥基-16，23Z-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，
1α-氟-25-羥基-16-烯-23-炔-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，
1α-氟-25-羥基-16，23E-二烯-26，27-六氟-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-雙高-20-表-膽鈣化甾醇，
1，25-二羥基-16-烯-23-炔-26，27-雙高-19-降-20-表-膽鈣化甾醇，
1α-氟-25-羥基-16-烯-23-炔-26，27-雙高-20-表-膽鈣化甾醇，
1α-氟-25-羥基-16，23E-二烯-26，27-雙高-20-表-膽鈣化甾醇。
12.一種藥物組合物，含有有效量的如權(quán)利要求1的式I化合物和藥用載體。
13.生產(chǎn)如權(quán)利要求1的式I化合物的方法，包括將含有甲硅烷基保護(hù)的羥基的相應(yīng)化合物脫保護(hù)。
14.如權(quán)利要求1的式I化合物，用于誘導(dǎo)分化作用并抑制皮膚增生和癌細(xì)胞系，特別是用于治療過度增生的皮膚病，如牛皮癬；腫瘤病，如白血??；和皮脂腺疾病，如粉刺。
15.如權(quán)利要求1的式I化合物，用于逆轉(zhuǎn)與光傷害有關(guān)的病況，特別是用于局部治療由陽光曝曬引起的皮膚傷害，起皺，彈性組織變性和早衰。
16.如權(quán)利要求1的式I化合物的用途，用于生產(chǎn)用來誘導(dǎo)分化作用并抑制皮膚增生和癌細(xì)胞系，特別是治療過度增生的皮膚病，如牛皮癬；腫瘤病，如白血?。缓推ぶ偌膊?，如粉刺的藥物組合物。
17.如權(quán)利要求1的式I化合物的用途，用于生產(chǎn)用來逆轉(zhuǎn)與光傷害有關(guān)的病況，特別是用于局部治療由陽光曝曬引起的皮膚傷害，起皺，彈性組織變性和早衰的藥物組合物。
18.如前所述的，特別是參考了實(shí)施例的化合物，藥物組合物，方法和用途。
全文摘要
右式化合物I其中R是氫,氟,或羥基,R2是氫,低級烷基或鹵素,X是=CH2或當(dāng)R是羥基時,X是(H,H)或=CH2,而A是－C≡C－,或－CH2－CH2－,可用于治療過度增生的皮膚病,腫瘤病,皮脂腺疾病,和與光傷害的皮膚有關(guān)的病況。
文檔編號A61P17/00GK1175573SQ9711343
公開日1998年3月11日 申請日期1997年5月22日 優(yōu)先權(quán)日1996年5月23日
發(fā)明者A·D·巴朝, G·F·布里斯, B·M·亨尼斯, J·A·拉克貝利, M·R·尤斯科科維克 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司