專(zhuān)利名稱(chēng)：三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物和它們作為組蛋白脫乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物，或它們的藥用鹽，其具有抗細(xì)胞增殖活性例如抗癌活性并因此可用于人或動(dòng)物體的治療方法中。本發(fā)明還涉及制備所述三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物的方法，涉及包含它們的藥物組合物和它們?cè)谥苽渌幬镏械膽?yīng)用，所述藥物用于在溫血?jiǎng)游锢缛酥挟a(chǎn)生抗細(xì)胞增殖作用。
背景技術(shù)：
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)是細(xì)胞分化，增殖和編程性細(xì)胞死亡過(guò)程中的一件主要事件。一組基因的轉(zhuǎn)錄活化確定了細(xì)胞的終點(diǎn)，并且由于這個(gè)原因，轉(zhuǎn)錄被多種因子嚴(yán)格調(diào)節(jié)。在這個(gè)過(guò)程中涉及的它的一個(gè)調(diào)節(jié)機(jī)制是DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)的改變，其通過(guò)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子對(duì)它們的靶DNA片段的可接近性來(lái)影響轉(zhuǎn)錄。通過(guò)核心組蛋白的乙酰化狀況來(lái)調(diào)節(jié)核小體的完整性。在低乙酰化狀態(tài)下，核小體是緊密結(jié)合的，因此不能轉(zhuǎn)錄。另一方面，通過(guò)核心組蛋白的乙?；沙诤诵◇w，結(jié)果可以進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。組蛋白的乙?；癄顟B(tài)由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙酰基轉(zhuǎn)移酶(HDAC)的活性的平衡來(lái)控制。近來(lái)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)HDAC抑制劑在幾種類(lèi)型的癌細(xì)胞，包括結(jié)腸癌、T-細(xì)胞淋巴瘤和紅白血病細(xì)胞中抑制生長(zhǎng)和編程性細(xì)胞死亡。在編程性細(xì)胞死亡是癌癥發(fā)展的關(guān)鍵因素的條件下，作為編程性細(xì)胞死亡的有效誘導(dǎo)劑，HDAC抑制劑是治療癌癥的有前途的藥劑(Koyama，Y.，等.，血液96(2000)1490-1495)。
已鑒定了幾種結(jié)構(gòu)類(lèi)型的HDAC抑制劑，并綜述于Marks，P.M.，等.，Journal of National Cancer Institute 92(2000)1210-1216。更具體地，Su，G.H.，等.，Cancer Res.60(2000)3137-3142描述了三環(huán)imid，即“scriptaid”。
目前發(fā)現(xiàn)某些三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物具有抗細(xì)胞增殖性能，其比在上述提及的參考文獻(xiàn)中的那些更有效。這些性能是由于HDAD抑制。

發(fā)明內(nèi)容
依照本發(fā)明，提供了式I的三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物，它們的對(duì)映體，非對(duì)映異構(gòu)體，外消旋物和它們的混合物，和藥用鹽 其中 表示環(huán)己烯基或苯基， 表示環(huán)己烯基或苯基，其可以是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代，所述取代基獨(dú)立選自鹵素原子，硝基，氨基，(1-4C)烷基氨基，二[(14C)烷基]-氨基，或(1-4C)烷?；被琗是羰基或磺?；琘是包含5，6或7個(gè)碳原子的直鏈亞烷基，其中一個(gè)CH2基可被氧或硫原子代替，或其中2個(gè)碳原子形成C＝C雙鍵，并且其是未取代的或被一個(gè)或兩個(gè)選自(1-4C)烷基和鹵素原子的取代基所取代。
對(duì)于合適的取代基，當(dāng)它是鹵素原子時(shí)，是例如氟或氯；當(dāng)它是(1-4C)烷基時(shí)，是例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基；當(dāng)它是(1-4C)烷基氨基時(shí)，是例如甲氨基，乙氨基或丙氨基；當(dāng)它是二-[(1-4C)烷基]氨基時(shí)，是例如二甲氨基，N-乙基-N-甲氨基，二乙氨基，N-甲基-N-丙氨基或二丙氨基；當(dāng)它是(1-4C)烷酰基氨基時(shí)，是例如甲酰氨基，乙酰氨基，丙酰氨基或丁酰氨基。
式I的化合物的生理上可接受的鹽的實(shí)例是具有生理上可接受的堿的鹽。這些鹽可以是，尤其是，堿性鹽，銨和烷基銨鹽，例如鈉鹽，鉀鹽，鈣鹽或四甲基銨鹽。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物包括，例如式I的三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物，它們的對(duì)映體，非對(duì)映異構(gòu)體，外消旋物和它們的混合物，和藥用鹽 其中 表示環(huán)己烯基或苯基， 表示環(huán)己烯基或苯基，其可以是未取代的或被取代基所取代，所述取代基獨(dú)立選自氯或溴原子，硝基，氨基，(1-4C)烷基氨基，二[(1-4C)烷基]-氨基，或(1-4C)烷酰基氨基，X是羰基或磺酰基，和Y是包含5，6或7個(gè)碳原子的直鏈亞烷基，其中一個(gè)CH2基可被氧或硫原子代替，或其中2個(gè)碳原子形成C＝C雙鍵，并且其是未取代的或被一個(gè)或兩個(gè)選自(1-4C)烷基和鹵素原子的取代基所取代。
本發(fā)明化合物的制備式I的三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物，或它的藥用鹽可以用任何已知的適用于制備化學(xué)相關(guān)的化合物的方法來(lái)制備。這類(lèi)方法，當(dāng)用于制備式I的三環(huán)內(nèi)酰胺和磺內(nèi)酰胺衍生物，或它們的藥用鹽時(shí)，這類(lèi)方法可作為本發(fā)明的另外的特征，并且通過(guò)下述代表性實(shí)施例來(lái)舉例說(shuō)明，在所述代表性施例中，如未另外說(shuō)明，A，B，X和Y具有上文定義的任何含義。可用有機(jī)化學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)程序來(lái)獲得必需的起始物質(zhì)。這類(lèi)起始物質(zhì)的制備描述于后附的非限制性的實(shí)施例中。備選地，起始物質(zhì)通過(guò)那些在有機(jī)化學(xué)家的普通技術(shù)范圍內(nèi)的與所舉例說(shuō)明的程序相似的程序來(lái)獲得。
(a)制備式I的化合物的一個(gè)優(yōu)選的方法是將式II的化合物脫保護(hù) 其中A，B，X和Y具有前述定義的含義，Z是合適的保護(hù)基。式II的化合物是新的，并且包含于本發(fā)明中。
合適的保護(hù)基是芐基，對(duì)-甲氧基芐基，叔-丁氧基羰基，三苯甲基，或甲硅烷基例如三甲基甲硅烷基或二甲基-叔丁基甲硅烷基。依據(jù)保護(hù)基的類(lèi)型實(shí)施反應(yīng)。當(dāng)保護(hù)基是芐基或?qū)?甲氧基芐基時(shí)，實(shí)施的反應(yīng)是在合適載體上的貴金屬催化劑例如鈀存在的條件下，在環(huán)境溫度和壓力下，在惰性溶劑例如醇如甲醇或乙醇中進(jìn)行的氫解反應(yīng)，所述載體例如碳，硫酸鋇或碳酸鋇。當(dāng)保護(hù)基是叔丁氧基羰基，三苯甲基或甲硅烷基例如三甲基甲硅烷基或二甲基-叔丁基甲硅烷基時(shí)，在-20℃-60℃，優(yōu)選0℃—環(huán)境溫度下，在酸存在的條件下實(shí)施反應(yīng)。酸可以是鹽酸在惰性溶劑例如乙醚或二噁烷中的溶液，或三氟乙酸在二氯甲烷中的溶液。當(dāng)保護(hù)基是甲硅烷基例如三甲基甲硅烷基或二甲基-叔丁基甲硅烷基時(shí)，在惰性溶劑例如二氯甲烷中，在存在氟化物來(lái)源例如氟化鈉或氟化四丁銨的條件下進(jìn)行反應(yīng)。
在缺少或存在合適的堿的條件下，通過(guò)式III的內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺
其中A，B，和X具有上文定義的含義，與式IV的化合物反應(yīng)來(lái)獲得式II的化合物W-Y-CONHO-Z(IV)其中W是可置換的基團(tuán)，并且Y和Z具有上文定義的含義。
合適的可置換基團(tuán)W是例如，鹵代基或磺酰氧基，例如氯，溴，甲磺酰氧基或甲苯-對(duì)-磺酰氧基。合適的堿是例如，有機(jī)胺堿例如，吡啶，2，6-二甲基吡啶，三甲基吡啶，4-二甲基氨基吡啶，三乙胺，嗎啉，N-甲基嗎啉，或二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯，或例如，堿或堿土金屬碳酸鹽或氫氧化物，例如碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸鈣，氫氧化鈉或氫氧化鉀。
在存在合適的惰性溶劑或稀釋劑的條件下，便利地進(jìn)行反應(yīng)，所述惰性溶劑或稀釋劑是例如鏈烷醇或酯如甲醇、乙醇、異丙醇或乙酸乙酯，鹵代溶劑如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳，醚如四氫呋喃或1，4-二噁烷，芳香溶劑如甲苯，或偶極非質(zhì)子溶劑如N，N-二甲基甲酰胺，N，N-二甲基乙酰胺，N-甲吡咯烷-2-酮或二甲基亞砜。在例如10-250℃，優(yōu)選40-200℃的溫度下便利地進(jìn)行反應(yīng)。
式III的化合物可商購(gòu)或可按照Dannerth，F(xiàn).，J.Am.Chem.Soc.29(1908)1319(結(jié)晶1-氨基-萘-8-磺酸以產(chǎn)生1，8-萘磺酰胺)，Goldstein，F(xiàn).，Helv.Chim.Acta 15(1932)1366(鹵化1H-苯并[cd]吲哚-2-酮)，Varney，M.D.，等J.Med.Chem.35(1992)663-676(硝化1H-苯并[cd]吲哚-2-酮)來(lái)制備。
(b)另一個(gè)制備式I的化合物的優(yōu)選方法涉及式V的化合物與羥胺反應(yīng) 其中A，B，X和Y具有上文所定義的含義。該反應(yīng)典型地涉及兩步一罐(two-step one-pot)程序。在第一步中，活化式V的羧酸酯。在存在活化劑的條件下，在惰性溶劑或稀釋劑中，例如在二氯甲烷，二噁烷或四氫呋喃中進(jìn)行該反應(yīng)。合適的酸的活性衍生物是例如，酰鹵，例如通過(guò)酸與無(wú)機(jī)?；确磻?yīng)形成的酰氯，所述無(wú)機(jī)?；壤鐏喠蝓Ｂ龋换旌系乃狒?，例如通過(guò)酸與氯甲酸酯如氯甲酸異丁酯反應(yīng)形成的酸酐；活性酯，例如通過(guò)酸與苯酚如五氟苯酚、酯例如三氟乙酸五氟苯酯或醇例如甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇或N-羥基苯并三唑反應(yīng)形成的酯；酰疊氮，例如通過(guò)酸與疊氮化物如二苯基磷?；B氮化物反應(yīng)形成的疊氮化物；酰腈，例如通過(guò)酸與氰化物如二乙基磷酰氰反應(yīng)形成的氰化物；或酸和碳二亞胺如二環(huán)己基碳二亞胺反應(yīng)的產(chǎn)物。在-30℃-60℃，便利地，在0℃或0℃以下進(jìn)行反應(yīng)。在第二步中，在用于活化的溫度下，向溶液中加入羥胺，并且該溫度被緩慢地調(diào)至環(huán)境溫度。
通過(guò)水解，從式IV的化合物來(lái)制備式V的化合物 其中A，B，X和Y具有上文所定義的含義，并且R是烷基，例如甲基，乙基，或叔丁基或芐基。水解進(jìn)行的條件依據(jù)基團(tuán)R的性質(zhì)來(lái)決定。當(dāng)R是甲基或乙基時(shí)，在存在堿例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀的條件下，在惰性溶劑或稀釋劑中，如在甲醇或乙醇中進(jìn)行反應(yīng)。當(dāng)R是叔丁基時(shí)，在存在酸例如鹽酸在惰性溶劑中的溶液或三氟乙酸在二氯甲烷中的溶液的條件下進(jìn)行反應(yīng)，所述惰性溶劑例如乙醚或二噁烷。當(dāng)R是芐基時(shí)，在存在于合適的載體如碳上的貴金屬催化劑例如鈀的條件下，通過(guò)氫解進(jìn)行反應(yīng)。
在不存在或存在合適的堿的條件下，通過(guò)式VII的化合物的反應(yīng)，W-Y-COO-R(VII)其中W，Y和R具有上文所定義的含義，從式III的化合物來(lái)制備式VI的化合物 其中A，B和X具有上文所定義的含義。
合適的堿是，例如有機(jī)胺堿例如，吡啶，2，6-二甲基吡啶，三甲基吡啶，4-二甲基氨基吡啶，三乙胺，嗎啉，N-甲基嗎啉或二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯，或例如堿或堿土金屬碳酸鹽或氫氧化物，例如碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸鈣，氫氧化鈉或氫氧化鉀。
在存在合適的惰性溶劑或稀釋劑的條件下，便利地進(jìn)行反應(yīng)，所述惰性溶劑或稀釋劑例如鏈烷醇或酯如甲醇、乙醇、異丙醇或乙酸乙酯，鹵代溶劑如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳，醚如四氫呋喃或1，4-二噁烷，芳香溶劑如甲苯，或偶極非質(zhì)子溶劑如N，N- 甲基甲酰胺，N，N-二甲基乙酰胺，N-甲基吡咯烷-2-酮或二甲基亞砜。在例如10-250℃，優(yōu)選40-200℃的溫度下便利地進(jìn)行反應(yīng)。
(c)第三種產(chǎn)生式I的化合物的優(yōu)選方法涉及在存在合適的堿的條件下，式VIII的化合物與羥胺的反應(yīng) 其中A，B，X和Y具有上文所定義的含義，并且R’是(1-4C)烷基，例如甲基，或乙基。
在如下條件下進(jìn)行反應(yīng)在惰性溶劑或稀釋劑如甲醇或乙醇中，在0℃-100℃的溫度下，便利地在或在近于環(huán)境溫度下，pH為9-11。合適的堿是，例如醇化物如甲醇鈉。
(d)通過(guò)還原式I的衍生物來(lái)制備那些式I的化合物，在該式I的化合物中的取代基之一為氨基，在該式I的衍生物中所述的取代基是硝基?？赏ㄟ^(guò)已知適于這種轉(zhuǎn)換的很多程序的任何一種程序來(lái)便利地進(jìn)行還原。例如，可通過(guò)在存在合適的金屬催化劑例如鈀或鉑的條件下，在如上文所定義的惰性溶劑或稀釋劑中，通過(guò)硝基化合物溶液的氫化來(lái)進(jìn)行還原。另一個(gè)合適的還原劑是，例如活性金屬如活性鐵(通過(guò)用酸如鹽酸的稀溶液洗滌鐵粉來(lái)生產(chǎn))。因此，例如，可在合適的溶劑或稀釋劑中，通過(guò)將硝基化合物和活性金屬的混合物加熱至例如50-150℃，便利地，70℃或近于70℃的溫度來(lái)進(jìn)行還原，所述溶劑或稀釋劑是例如水和醇如甲醇或乙醇的混合物。
(e)通過(guò)?；絀的衍生物來(lái)制備那些式I的化合物，在該式I的化合物中，取代基之一為(1-4C)烷酰氨基，在該式I的衍生物中，取代基是氨基。合適的?；瘎┦抢缛魏伪绢I(lǐng)域中已知的將氨基酰化為酰氨基的試劑，例如便利地在存在如上文所定義的合適的堿的條件下的酰鹵，如烷酰氯或溴，在存在如上文所定義的合適的堿的條件下的鏈烷酸酐或混合的酸酐，例如乙酸酐或通過(guò)鏈烷酸與烷氧羰基鹵化物如烷氧羰基氯化物反應(yīng)形成的混合酸酐。通常，在如上文所定義的合適的惰性溶劑或稀釋劑中，和在例如-30-120℃，便利地在環(huán)境溫度或近于環(huán)境溫度下進(jìn)行酰化。
依照本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了如上文所定義的與藥用稀釋劑或載體相關(guān)的包含式I的三環(huán)內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺衍生物，或它的藥用鹽的藥物組合物。組合物可以是適于口服給藥的形式，如片劑或膠囊，適于胃腸外注射(包括靜脈內(nèi)，皮下，肌肉，血管內(nèi)或灌輸)的形式，如無(wú)菌溶液、混懸液或乳劑，適于局部給藥的形式如油膏或乳膏或適于直腸給藥的形式，如栓劑。通常，可以利用常規(guī)的賦形劑的方式來(lái)制備上述組合物。通常以5-5000mg/平方米動(dòng)物的體表面積，即約0.1-100mg/kg的單位劑量將三環(huán)內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺衍生物對(duì)溫血?jiǎng)游锝o藥，這通常提供了治療有效的劑量。單位劑量形式如片劑或膠囊通常包含例如1-250mg的活性成分。優(yōu)選地，使用1-50mg/kg的日劑量。然而，依據(jù)所治療的宿主、具體的給藥路徑和所治療的疾病的嚴(yán)重程度，必然需要改變?nèi)談┝?。因此，最佳劑量可以由治療任何具體患者的醫(yī)師來(lái)決定。
依照本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了如上文所定義的式I的三環(huán)內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺衍生物，以通過(guò)治療，在人或動(dòng)物體的治療方法中應(yīng)用。令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物具有抗細(xì)胞增殖性能，認(rèn)為該性能是由于它們的組蛋白脫乙酰轉(zhuǎn)移酶抑制活性而產(chǎn)生的。因此，本發(fā)明的化合物提供了一種治療惡性細(xì)胞增殖的方法。因此，本發(fā)明的化合物可通過(guò)提供抗增殖作用來(lái)治療癌癥，特別是治療乳腺癌，肺癌，結(jié)腸癌，直腸癌，胃癌，前列腺癌，膀胱癌，胰腺癌和卵巢癌。另外，依照本發(fā)明的化合物具有抗一系列的白血病、淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤和實(shí)體瘤例如在組織如肝、腎、前列腺和胰腺組織中的癌和肉瘤的活性。
因此，依照本發(fā)明的這個(gè)方面，提供了如上文所定義的式I的三環(huán)內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺衍生物或它的藥用鹽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在溫血?jiǎng)游锢缛酥挟a(chǎn)生抗細(xì)胞增殖作用。
依照本發(fā)明這個(gè)方面的另一個(gè)特征，提供了一種在需要這種治療的溫血?jiǎng)游锢缛酥挟a(chǎn)生抗細(xì)胞增殖作用的方法， 其包含對(duì)所述動(dòng)物給藥有效量的如上文所定義的內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺衍生物。
上文定義的抗細(xì)胞增殖治療可作為一種單獨(dú)的治療來(lái)應(yīng)用，或除了本發(fā)明的化合物以外，還可包括一種或多種其它抗腫瘤物質(zhì)，例如那些選自例如有絲分裂抑制劑如長(zhǎng)春堿；烷基化劑如順鉑，卡鉑和環(huán)磷酰胺；微管組裝抑制劑，如紫杉醇或其它紫杉烷類(lèi)；抗代謝物類(lèi)，如5-氟尿嘧啶，卡培他濱，阿糖胞苷和羥基脲；或，例如，插入抗生素，例如阿霉素和博來(lái)霉素；免疫刺激劑，如曲妥單抗；DNA合成抑制劑，如吉西他濱；酶，如天冬酰胺酶；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，如依托伯苷；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物，如干擾素；和抗激素類(lèi)，如抗雌激素類(lèi)如他莫昔芬，或例如抗雄激素藥類(lèi)如(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺?；?-2-羥基-2-甲基-3’-(三氟甲基)-N-丙酰苯胺，或描述于例如DeVita，Vincent，T.，Jr.，Hellmann，S.，Rosenberg，SA.，InCancerPrinciples&Practice of Oncology，第五版.，Lippincott-Raven Publishers(1997)的其它治療劑和原則。這種聯(lián)合治療可通過(guò)同時(shí)、順次或分別給藥治療用的單獨(dú)組分得以實(shí)現(xiàn)。依照本發(fā)明的這個(gè)方面，提供了一種藥品，其包含用于聯(lián)合治療癌癥的如上文所定義的式I的內(nèi)酰胺或磺內(nèi)酰胺衍生物和如上文所定義的另外的抗腫瘤物質(zhì)。
在下述非限制性的實(shí)施例中將舉例說(shuō)明本發(fā)明，在所述實(shí)施例中，如果未另外聲明(i)通過(guò)在真空中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來(lái)進(jìn)行蒸發(fā)，并且在通過(guò)過(guò)濾去除殘余的固體如干燥劑后進(jìn)行加工(work-up)程序；(ii)在環(huán)境溫度即18-25℃，在惰性氣體如氬氣或氮?dú)鈿夥障逻M(jìn)行操作；(iii)在購(gòu)自E.Merck，Darmstadt，德國(guó)的Merck Kieselgel二氧化硅或MerckLichroprep RP-18反相二氧化硅上進(jìn)行柱色譜(通過(guò)快速程序)和高壓液相色譜(HPLC)；(iv)提供的產(chǎn)率僅是為了舉例說(shuō)明的目的而不必是所達(dá)到的最大值；
(v)使用Mettler SP62自動(dòng)熔點(diǎn)儀，油浴儀或Kofler熱板儀測(cè)量熔點(diǎn)；(vi)通過(guò)核(通常是質(zhì)子)磁共振(NMR)和質(zhì)譜技術(shù)(利用APCI的Micromass臺(tái)式II儀或利用電霧化的Micromass臺(tái)式ZMD)確認(rèn)式I的終產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)；(vii)通常不完全表征中間體，并且通過(guò)薄層色譜(TLC)評(píng)價(jià)純度；(viii)使用下述縮寫(xiě)DMF，N，N-二甲基甲酰胺。
實(shí)施例1 8-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-辛酸羥基酰胺(a)在冰浴中，向3.2g(20mmol)O-芐基羥胺氫氯化物在150ml二氯甲烷的混懸液中加入14ml三乙胺。持續(xù)攪拌直至溶液變得清澈。然后，加入4.5g(20mmol)8-溴辛酸，然后加入5.6g(22mmol)二(2-氧-3-唑烷基)-磷酰氯。在環(huán)境溫度下持續(xù)攪拌18小時(shí)。每次用150ml 1M含水鹽酸萃取該溶液兩次，并每次用150ml 1M含水碳酸氫鈉萃取兩次。抽真空去除有機(jī)溶劑，以提供5.1g(78％)無(wú)色油狀的8-溴-辛酸芐氧基酰胺。MS330(M+H+)。
(b)將1，8-萘磺內(nèi)酰胺(0.3g，1.5mmol)，8-溴-辛酸芐氧基-酰胺(0.48g，1.5mmol)和0.2g(1.4mmol)碳酸鉀在DMF(7ml)中的溶液加熱至120℃2小時(shí)。冷卻至環(huán)境溫度后，加入水并用乙酸乙酯萃取。用水洗滌有機(jī)相，硫酸鈉干燥，過(guò)濾，并蒸發(fā)溶劑。利用乙酸乙酯∶庚烷＝8∶2作為洗脫劑，通過(guò)柱色譜純化殘余物。如此獲得0.35g(80％)作為非晶形固體的8-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)—辛酸芐氧基酰胺。MS453(M+H+)。
(c)在環(huán)境溫度和壓力下，在硫酸鋇上存在鈀的條件下，氫化8-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-辛酸芐氧基酰胺(0.47g)的甲醇溶液(30ml)1.5小時(shí)。通過(guò)過(guò)濾去除催化劑，并蒸發(fā)溶劑。通過(guò)柱色譜(硅膠；乙酸乙酯作為洗脫劑)純化殘余物。如此獲得無(wú)色油狀的8-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-辛酸羥基酰胺(61％)。MS363(M+H+)。
實(shí)施例2 7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺(a)向7-溴庚酸(1.3g，6.2mmol)和三乙胺(3.5ml，48mmol)的二氯甲烷(35ml)溶液中加入二(2-氧-3-唑烷基)磷酰氯(1.9g，7.5mmol)。15分鐘后，加入芐基羥胺氫氯化物(1g，6.3mmol)，并持續(xù)攪拌16小時(shí)。用1N含水鹽酸和飽和的含水氯化鈉溶液萃取有機(jī)相，然后用硫酸鈉干燥，并過(guò)濾。抽真空去除溶劑，并通過(guò)柱色譜(硅膠；乙酸乙酯∶庚烷＝1∶1)純化殘余物，以提供無(wú)色油狀的7-溴庚酸芐氧基酰胺(97％)。MS(M+H+)＝316。
(b)以類(lèi)似于實(shí)施例1(b)的方式，在存在碳酸鉀(0.2g，1.4mmol)的條件下，使7-溴庚酸芐氧基酰胺(0.46g，1.5mmol)與1，8-萘磺內(nèi)酰胺(0.3g，1.5mmol)反應(yīng)，以提供7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸芐氧基酰胺非晶形固體(產(chǎn)率0.4g，62％；通過(guò)使用硅膠和作為洗脫劑的乙酸乙酯∶庚烷＝1∶1的柱色譜來(lái)純化)。MS(M+H+)＝439。
(c)以類(lèi)似于實(shí)施例1(c)的方式，氫化7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸芐氧基酰胺，以98％的產(chǎn)率提供作為非晶形固體的標(biāo)題化合物。(M-H+)＝347。
實(shí)施例3 8-(2-氧-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-辛酸羥基酰胺
(a)以類(lèi)似于實(shí)施例1(b)的方式，在存在碳酸鉀(0.2g，1.4mmol)的條件下，使8-溴-辛酸芐氧基酰胺(0.49g，1.5mmol)與苯并[cd]吲哚-2(1H)-酮(0.25g，1.5mmol)反應(yīng)，以提供作為非晶形固體的8-(2-氧-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-辛酸芐氧基酰胺(產(chǎn)率0.12g，19％；通過(guò)使用硅膠和作為洗脫劑的乙酸乙酯∶庚烷＝1∶1的柱色譜來(lái)純化)。MS (M+H+)＝417。
(b)以類(lèi)似于實(shí)施例1(c)的方式，氫化8-(2-氧-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-辛酸芐氧基酰胺，以98％的產(chǎn)率提供作為非晶形固體的標(biāo)題化合物。(M-H+)＝325。
實(shí)施例4 7-(2-氧-6，7，8，8a-四氫-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-庚酸羥基酰胺(a)以類(lèi)似于實(shí)施例2(b)的方式，在存在碳酸鉀(0.2g，1.4mmol)的條件下，使7-溴-庚酸芐氧基-酰胺(0.46g，1.5mmol)與苯并[cd]吲哚-2(1H)-酮(0.25g，1.5mmol)反應(yīng)，以提供作為非晶形固體的7-(2-氧-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-庚酸芐氧基酰胺(產(chǎn)率0.08g，13％；通過(guò)使用硅膠和作為洗脫劑的乙酸乙酯∶庚烷＝1∶1的柱色譜來(lái)純化)。MS(M+H+)＝403。
(b)以類(lèi)似于實(shí)施例1(b)的方式，氫化7-(2-氧-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-庚酸芐氧基酰胺。輕微過(guò)氫化以98％產(chǎn)率提供作為非晶形固體的標(biāo)題化合物。(M+H+)＝317。
實(shí)施例5以類(lèi)似于實(shí)施例1-4中所描述的方式，制備下述化合物(a)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-己酸羥基酰胺
(b)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-5-甲基-庚酸羥基酰胺 (c)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-4-甲基-庚酸羥基酰胺 (d)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-甲基-庚酸羥基酰胺 (e)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-庚酸羥基酰胺 (f)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-氯-庚酸羥基酰胺 (g)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2，2-二甲基-庚酸羥基酰胺
(h)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2，2-二氯-庚酸羥基酰胺 (i)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-辛酸羥基酰胺 (j)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-己酸羥基酰胺 (k)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-4-噁-庚酸羥基酰胺 (l)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-甲基-4-噁-庚酸羥基酰胺 (m)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-噁-庚酸羥基酰胺
(n)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-噁-5-順式-庚酸羥基酰胺 (o)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-噁-5-反式-庚酸羥基酰胺 (p)7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-3-噁-庚酸羥基酰胺 (q)7-(5-溴-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺 (r)7-(5-硝基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺 (s)7-(5-氨基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺
(t)7-(5-甲基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺

(u)7-(5-乙酰氨基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺

實(shí)施例6本發(fā)明化合物的HDAC抑制性能的評(píng)估為確定本發(fā)明化合物的HDAC抑制性能，利用ω-乙?；馁?lài)氨酸的氨基香豆素衍生物作為酶的底物進(jìn)行試驗(yàn)。在文獻(xiàn)(Nucleic Acid Research1999，27，2057-2058)中已詳細(xì)描述了該試驗(yàn)。利用在該文獻(xiàn)中描述的方案，在10nM濃度下，確定代表性化合物的抑制作用。所選擇的化合物的觀測(cè)的抑制率示于表1表1

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1.式I的化合物，它們的對(duì)映體，非對(duì)映異構(gòu)體，外消旋物和它們的混合物，和藥用鹽 其中 表示環(huán)己烯基或苯基， 表示環(huán)己烯基或苯基，其可以是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代，所述取代基獨(dú)立選自鹵素原子，硝基，氨基，(1-4C)烷基氨基，二[(1-4C)烷基]-氨基或(1-4C)烷?；被?，X是羰基或磺?；?，Y是包含5，6或7個(gè)碳原子的直鏈亞烷基，其中一個(gè)CH2基可被氧或硫原子代替，或其中2個(gè)碳原子形成C＝C雙鍵，并且其是未取代的或被一個(gè)或兩個(gè)選自(1-4C)烷基和鹵素原子的取代基所取代。
2.依照權(quán)利要求1的式I的化合物，其選自8-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-辛酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺8-(2-氧-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-辛酸羥基酰胺7-(2-氧-6，7，8，8a-四氫-2H-苯并[cd]吲哚-1-基)-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-己酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-5-甲基-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-4-甲基-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-甲基-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-氯-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2，2-二甲基-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2，2-二氯-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-辛酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-己酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-4-噁-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-甲基-4-噁-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-噁-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-噁-5-順式-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-3-噁-5-反式-庚酸羥基酰胺7-(1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-2-甲基-3-噁-庚酸羥基酰胺7-(5-溴-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺7-(5-硝基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺7-(5-氨基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺7-(5-甲基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺7-(5-乙酰氨基-1，1-二氧-2H-萘并[1，8-cd]異噻唑-2-基)-庚酸羥基酰胺。
3.制備依照權(quán)利要求1或2的式I的化合物的方法，所述制備是通過(guò)在存在合適的堿的條件下，使式III的化合物 其中A，B和X具有上述定義的含義，與式IV的化合物反應(yīng)W-Y-CONHO-Z(IV)其中W是可置換基團(tuán)，Z是保護(hù)基，Y具有上述定義的含義，然后去除保護(hù)基Z，并且，如果需要，將獲得的化合物轉(zhuǎn)變成它的對(duì)映體，非對(duì)映異構(gòu)體，外消旋物或藥用鹽。
4.制備依照權(quán)利要求1或2的式I的化合物的方法，所述制備是通過(guò)在堿存在的條件下，使式VI的化合物與羥胺反應(yīng) 其中A，B，X和Y具有上述定義的含義，并且R是氫或C1-C4烷基，并且如果需要，將獲得的化合物轉(zhuǎn)變成它的對(duì)映體，非對(duì)映異構(gòu)體，外消旋物或藥用鹽。
5.藥物，其包含依照權(quán)利要求1或2的式I的化合物作為活性成分，并混有藥用賦形劑或稀釋劑。
6.依照權(quán)利要求1或2的化合物在制備具有組蛋白脫乙?；D(zhuǎn)移酶(HDAC)抑制劑活性的藥物中的應(yīng)用。
7.依照權(quán)利要求6的化合物的應(yīng)用，其作為細(xì)胞增殖抑制劑。
全文摘要
式(1)的化合物，其中A和B是任選被取代的環(huán)己烯基或苯基，X是羰基或磺?；蚘是5－7原子的連接物，其被用作組蛋白脫乙酰基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，特別用于抑制細(xì)胞增殖。
文檔編號(hào)A61P35/02GK1487925SQ02803979
公開(kāi)日2004年4月7日 申請(qǐng)日期2002年1月24日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月27日
發(fā)明者蓋伊·喬治, 阿德?tīng)柌亍じ窳_斯曼, 奧拉夫·蒙迪戈?duì)? 沃爾夫?qū)ゑT德薩爾, 蒂馬·薩特爾考, 蒙迪戈?duì)? 伯特 格羅斯曼, 岡 馮德薩爾, 蓋伊 喬治, 薩特爾考 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司