專利名稱：海藻多肽在制備降血脂、降血糖保健品中的用途和包含上述多肽的降血脂、降血糖飲料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及多肽的醫(yī)藥用途和包含上述多肽的飲料，具體地涉及一種具有降血月旨、降血糖功能的海藻多肽和包含上述多肽的降血脂、降血糖飲料。
背景技術(shù)：
海藻屬于低等植物，主要生長在淺海區(qū)域，我國海岸線長，淺海面積大，海藻種類 豐富，這其中，有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的海藻主要分成綠藻、褐藻及紅藻三大類。目前，已經(jīng)開展人工養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)海藻主要有屬于褐藻類的海帶、裙帶菜和羊棲菜；屬于紅藻類的壇紫菜、條斑紫菜、龍須菜、細(xì)基江蘺、紅毛菜和麒麟菜等。然而，由于我國海藻事業(yè)發(fā)展處于初級(jí)階段，因此，其對(duì)于海藻的利用是相當(dāng)不充分的，目前，我國的海藻產(chǎn)品集中在海藻多糖這一方面。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，海藻中的海藻多糖都具有提高人體免疫力、抗癌、抗病毒的活性，并可以降低血管中導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的脂質(zhì)含量。因此，國內(nèi)市場比較成熟的工業(yè)化海藻產(chǎn)品主要為海藻多糖產(chǎn)品從紅藻中提取的瓊膠、卡拉膠等，從褐藻中提取的褐藻膠、褐藻糖膠等，以及從綠藻中提取的木聚糖、甘露聚糖等。而海藻多糖是一類組成相當(dāng)復(fù)雜的生物大分子，其提純常采用乙醇沉淀法、季胺鹽沉淀法、DEAE纖維柱層析和凝膠柱層析法，并通過分子篩或者陰離子交換柱等可以達(dá)到多糖與蛋白分離的目的，進(jìn)而使得占海藻含量10% 50%之間的海藻蛋白大多形成了工業(yè)廢料，造成極大浪費(fèi)。另一方面，現(xiàn)有的降糖藥物有胰島素、雙胍類(代表藥物為二甲雙胍)、磺脲類(代表藥物為格列吡嗪、格列齊特等)、a 一糖苷酶抑制劑(代表藥物為阿卡波糖)、胰島素增敏齊IJ(代表藥物為羅格列酮、吡格列酮等)。然而，上述各種藥物都有其局限性，如雙胍類的降糖藥對(duì)腸胃的傷害較大，容易導(dǎo)致消化不良；磺脲類藥物可能導(dǎo)致白細(xì)胞減少；a —糖苷酶抑制劑則會(huì)產(chǎn)生胃腸道反應(yīng)，具體表現(xiàn)有腹脹、胃脹、上腹部灼痛、腹瀉或便秘等；胰島素增敏劑則有可能導(dǎo)致水潴留的發(fā)生。而現(xiàn)有最常用降血脂藥物為HMG — CoA還原酶抑制劑，具體有洛伐他丁、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀和羅伐他汀等，然而，他汀類藥物容易引起肝酶增高，可能引起肝功能變化，且部分患者在服藥后有肌肉疼痛的癥狀，個(gè)別甚至引發(fā)肌肉溶解癥。綜上，目前針對(duì)降低血糖、降低血脂并無一種可靠、令人滿意的治療方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供海藻多肽在制備降血脂、降血糖藥物中的用途。海藻多肽在制備降血脂、降血糖保健品中的用途，所述海藻多肽采用如下的方式制得浸泡后的壇紫菜和水的混合物料經(jīng)過膠體磨研磨，得到壇紫菜漿液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45。。 55。。、pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物濃度3 7%(w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液5h 10h，獲得酶解液，將酶解液離心后收集上清液，再將上清液經(jīng)超濾分離獲得分子量小于10000 Da的活性組分，冷凍干燥后備用。本發(fā)明所述的壇紫菜(/jOrjDAjTa haitanensis)屬于紅藻門(Rhodophyta)原紅藻綱(Protoflorideae)紅毛菜目(Bangiales)紅毛菜科(Bangiaceae)紫菜屬(Porphyra)。在推薦的實(shí)施例中，優(yōu)選采用AS. 1398中性蛋白酶在50°C、pH7.5、加酶量E/S10000U. g_\底物濃度5% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液10h，獲得酶解液。在推薦的實(shí)施例中，離心后收集的上清液按I :1的比例加水稀釋一倍，而后將稀釋后的上清液加入超濾設(shè)備進(jìn)行分離。本發(fā)明的另一目的在于提供包含上述海藻多肽的降血脂、降血糖飲料。 一種包括海藻多肽的降血脂、降血糖飲料，其特征在于其包括降血脂、降血糖有效量的海藻多肽和可食用的飲料配方，所述海藻多肽原液采用如下的方式制得浸泡后的壇紫菜和水的混合物料經(jīng)過膠體磨研磨，得到壇紫菜漿液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45。。 55°C、pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物濃度3 7% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液5h 10h，獲得酶解液，將酶解液離心后收集上清液，再將上清液經(jīng)超濾分離獲得分子量小于10000 Da的活性組分的海藻多肽原液。本發(fā)明通過上述的分離方法脫除海藻多肽液苦腥味，并保留濃郁紫菜風(fēng)味，進(jìn)而獲得口感獨(dú)特、具有食療價(jià)值的飲料產(chǎn)品。在推薦的實(shí)施例中，所述的飲料配方包括環(huán)狀糊精、蘋果酸、檸檬酸鈉、異維C鈉、維C、甘氨酸、白砂糖和羧甲基纖維素鈉，并按照環(huán)狀糊精5%。 7%。、蘋果酸0.5%。 1%。、檸檬酸鈉 0. 2%0 0. 6%。、異維 C 鈉 0. 2%0 0. 6%。、維 CO. 2%0 0. 6%。、甘氨酸 0. 1%。 0. 3%0、白砂糖50%。 80%。和羧甲基纖維素鈉0. 5 0. 8%。的比例加入海藻多肽原液中。在推薦的實(shí)施例中，所述的飲料配方還包括楓糖香精和烤大麥香精，并按照楓糖香精0. 1%。 0. 3%。和烤大麥香精0. 5%。 I. 5%。的比例加入海藻多肽原液中。需要說明的是，本發(fā)明所使用的原料為干壇紫菜，其既可以選擇口感較好、營養(yǎng)價(jià)值較高的頭茬紫菜，也可以使用口感和營養(yǎng)價(jià)值較低的末茬紫菜。而鑒于海藻多肽飲料能夠以四茬或五茬的紫菜為原料，因此，其原料來源廣、成本低，制備過程簡單易行，設(shè)備及資金投入相對(duì)較少，并可大幅度提升產(chǎn)品的附加值，獲得較高的經(jīng)濟(jì)效益。本發(fā)明提供的海藻多肽飲料具有如下特點(diǎn)
1、口感潤滑、酸甜適中、紫菜風(fēng)味濃郁，呈深紫紅色、透明清亮。其適合于各式灌裝，經(jīng)超聞溫瞬時(shí)殺菌后保質(zhì)期可達(dá)I年以上；
2、有機(jī)碘含量豐富，適合于我國內(nèi)陸缺碘地區(qū)的推廣利用，起到豐富補(bǔ)碘產(chǎn)品的作用；維生素及礦物質(zhì)含量也較高，且腥味小、風(fēng)味獨(dú)特，是典型的低脂肪、富含纖維素和礦物質(zhì)的健康海洋食品；
3、具有降血脂、降血糖及降血壓的功效通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，紫菜經(jīng)生物酶解獲得的海藻多肽具有顯著的降血脂、降血糖及降血壓作用，長期服用可抑制體重過快增長、減少動(dòng)脈硬化的發(fā)生機(jī)率(關(guān)于海藻多肽降血壓作用的報(bào)道請見中國海洋藥物，2010年03期，王茵等)；本發(fā)明利用我國豐富的海藻資源，以中國傳統(tǒng)養(yǎng)生理論和現(xiàn)代科研成果為基礎(chǔ)，以食療同源為理念，根據(jù)海藻的營養(yǎng)功能特性和現(xiàn)代飲食結(jié)構(gòu)的需求，通過現(xiàn)代生物工程技術(shù)、納米膜超濾技術(shù)、生物活性分析技術(shù)等提取具有降血脂、降血糖功效的活性多肽物質(zhì)。本發(fā)明研制的海藻多肽系列產(chǎn)品可以填補(bǔ)海藻蛋白活性多肽產(chǎn)品的市場空白，且由于海藻活性多肽自身具有易吸收、高活性、降血脂、降血糖、降血壓功效顯著等優(yōu)勢，加之特有的藻香味，適合現(xiàn)在人們在食品方面對(duì)健康、營養(yǎng)、美味的需求。本發(fā)明以該海藻多肽為主要配方，探討海藻多肽液苦腥味的脫除技術(shù)、風(fēng)味的調(diào)配工藝，優(yōu)化影響產(chǎn)品穩(wěn)定性的條件及最佳的殺菌方案，精制成兼具營養(yǎng)和降血脂、降血糖、降血壓等保健功效食療同源的海藻多肽飲料等系列新型海藻類健康制品。這符合當(dāng)前海藻食品研究開發(fā)的方向，符合海洋保健品潛在市場需求，具有巨大的推廣前景，能夠促進(jìn)海藻產(chǎn)業(yè)走上綠色工藝、綠色產(chǎn)品的健康發(fā)展之路，帶動(dòng)海藻產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益增長，推動(dòng)我國海洋經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。
具體實(shí)施方式

為了便于理解本發(fā)明，特列舉實(shí)施例，以進(jìn)一步詮釋本發(fā)明，而不是對(duì)本發(fā)明的任何方式的限制。實(shí)施例I
1)原料原料選擇頭茬干壇紫菜；
2)加水浸泡按I:25 (壇紫菜水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)膠體磨絞碎將壇紫菜浸泡混合液通過膠體磨，形成顆粒較細(xì)的壇紫菜漿液；
4)加熱保溫將壇紫菜漿液加熱到中心溫度達(dá)50°C；
5)蛋白酶酶解:采用AS.1398中性蛋白酶在50°C、pH7. 5、加酶量E/S 10000U. g—1、底物濃度5% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液10h，獲得酶解液；
6)離心將酶解液于8000r.HiirT1離心lOmin，初步除去紫菜渣，獲得上清液；
7)上清液稀釋離心收取的上清液較為濃稠，先按I:1的比例加水稀釋一倍；
8)超濾除雜將稀釋后的上清液通過陶瓷卷心的超濾設(shè)備分離，獲得分子量小于10000 Da的活性組分，冷凍干燥后備用。實(shí)施例2
1)原料原料選擇第三茬干壇紫菜；
2)加水浸泡按I:25 (壇紫菜水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)膠體磨絞碎將壇紫菜浸泡混合液通過膠體磨，形成顆粒較細(xì)的壇紫菜漿液；
4)加熱保溫將壇紫菜漿液加熱到中心溫度達(dá)45°C；
5)蛋白酶酶解采用AS.1398中性蛋白酶在45。。、pH7. 2、加酶量E/S 8000U. g—1、底物濃度3% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液10h，獲得酶解液；
6)離心將酶解液于8000r.HiirT1離心lOmin，初步除去紫菜渣，獲得上清液；
7)上清液稀釋離心收取的上清液較為濃稠，先按I:1的比例加水稀釋一倍；
8)超濾除雜將稀釋后的上清液通過陶瓷卷心的超濾設(shè)備分離，獲得分子量小于10000 Da的活性組分，噴霧干燥后備用。實(shí)施例31)原料原料選擇末茬干壇紫菜；
2)加水浸泡按I30 (壇紫菜:水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)膠體磨絞碎將壇紫菜浸泡混合液通過膠體磨，形成顆粒較細(xì)的壇紫菜漿液；
4)加熱保溫將壇紫菜漿液加熱到中心溫度達(dá)55°C；
5)蛋白酶酶解:采用AS.1398中性蛋白酶在55°C、pH7.8、加酶量E/S 12000U. g-1、底物濃度7% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液5h，獲得酶解液；
6)離心將酶解液于8000r.HiirT1離心lOmin，初步除去紫菜渣，獲得上清液； 7)上清液稀釋離心收取的上清液較為濃稠，先按I:1的比例加水稀釋一倍；
8)超濾除雜將稀釋后的上清液通過陶瓷卷心的超濾設(shè)備分離，獲得分子量小于10000 Da的活性組分，冷凍干燥后備用。實(shí)施例4
1)原料原料選擇第三茬干壇紫菜；
2)加水浸泡按I20 (壇紫菜:水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)膠體磨絞碎將壇紫菜浸泡混合液通過膠體磨，形成顆粒較細(xì)的壇紫菜漿液；
4)加熱保溫將壇紫菜漿液加熱到中心溫度達(dá)45°C；
5)蛋白酶酶解采用AS.1398中性蛋白酶在45。。、pH7. 2、加酶量E/S 8000U. g—1、底物濃度3% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液10h，獲得酶解液；
6)離心將酶解液于8000r.HiirT1離心lOmin，初步除去紫菜渣，獲得上清液；
7)上清液稀釋離心收取的上清液較為濃稠，先按I:1的比例加水稀釋一倍；
8)超濾除雜將稀釋后的上清液通過陶瓷卷心的超濾設(shè)備分離，獲得分子量小于10000 Da的活性組分組成的海藻多肽原液；
9)按照環(huán)狀糊精6.5%。、蘋果酸0. 8%。、檸檬酸鈉0. 4%。、異維C鈉0. 45%。、維CO. 5%。、甘氨酸0. 15%。、白砂糖70%。和羧甲基纖維素鈉0. 6%。的比例向海藻多肽原液中加入上述物質(zhì)，溶解，得到海藻多肽飲料；
10)殺菌罐裝罐裝材料選擇馬口鐵三片罐，巴氏殺菌(85°C、20min)，得到飲料產(chǎn)品。飲料口味試飲及外觀評(píng)價(jià)由幾名專業(yè)人員組成的評(píng)估小組完成，該飲料口感潤滑、酸甜適中、紫菜風(fēng)味濃郁，不帶苦腥味，外觀呈深紫紅色、透明清亮。實(shí)施例5
1)原料原料選擇末茬干壇紫菜；
2)加水浸泡按I:25 (壇紫菜水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)膠體磨絞碎將壇紫菜浸泡混合液通過膠體磨，形成顆粒較細(xì)的壇紫菜漿液；
4)加熱保溫將壇紫菜漿液加熱到中心溫度達(dá)55°C；
5)蛋白酶酶解:采用AS.1398中性蛋白酶在55°C、pH7.8、加酶量E/S 12000U. g-1、底物濃度7% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液5h，獲得酶解液；
6)離心將酶解液于8000r.HiirT1離心lOmin，初步除去紫菜渣，獲得上清液；
7)上清液稀釋離心收取的上清液較為濃稠，先按I:1的比例加水稀釋一倍；
8)超濾除雜將稀釋后的上清液通過陶瓷卷心的超濾設(shè)備分離，獲得分子量小于10000 Da的活性組分組成的海藻多肽原液；9)按照環(huán)狀糊精6.5%。、蘋果酸0. 8%。、檸檬酸鈉0. 4%。、異維C鈉0. 45%。、維CO. 5%0、甘氨酸0. 15%。、白砂糖70%。、羧甲基纖維素鈉0. 6%。、楓糖香精0. 1%。和烤大麥香精1%。的比例向海藻多肽原液中加入上述物質(zhì)，溶解，得到海藻多肽飲料；這其中，楓糖香精、烤大麥香精為調(diào)香配方，因此，可根據(jù)消費(fèi)者口味調(diào)配其它香型；
10)殺菌罐裝罐裝材料選擇馬口鐵三片罐，巴氏殺菌(85°C、20min)，得到飲料產(chǎn)品。飲料口味試飲及外觀評(píng)價(jià)由幾名專業(yè)人員組成的評(píng)估小組完成，該飲料口感潤滑、酸甜適中、紫菜風(fēng)味濃郁，不帶苦腥味，外觀呈深紫紅色、透明清亮。試驗(yàn)例I
I實(shí)驗(yàn)材料與方法
I.I海藻多肽
實(shí)施例I制得的海藻多肽。I. 2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
昆明小鼠(KM)，雄性，體質(zhì)量20 25g，100只；
Wistar大鼠，雄性，體質(zhì)量150 200g，60只。I. 3指標(biāo)檢測試劑
總膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒、丙二醛試劑盒、一氧化氮試劑盒；糖化血清蛋白試劑盒、血清胰島素試劑盒、肝糖元試劑盒等。I. 4其他試劑材料
辛伐他汀，北京北大維信生物科技有限公司；格列吡嗪控釋片，美國輝瑞制藥有限公司；四氧喃唳，sigma公司；高脂飼料(配方10%豬油、10%蛋黃粉、1%膽固醇、0. 3%膽鹽、78. 7%基礎(chǔ)飼料)，蘇州雙獅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料科技有限公司。I. 5降血脂作用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法
1.5. I實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
60只Wistar大鼠以基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)5d后，稱體質(zhì)量并根據(jù)體質(zhì)量進(jìn)行分層隨機(jī)分組，包括高脂模型Wistar大鼠5組(50只，每組10只)和正常對(duì)照組I組(10只)。 I. 5. 2聞脂I旲型大鼠造豐旲
將5組高脂模型Wistar大鼠進(jìn)行高脂模型造模試驗(yàn)，50只Wistar大鼠連續(xù)飼喂高脂飼料2周，正常對(duì)照組飼喂正常飼料，2周后尾部取血，檢測血清TC、TG、HDL-C, LDL-C的指標(biāo)檢測。1.5.3實(shí)驗(yàn)分組及劑量設(shè)計(jì)
選取高脂模型Wistar大鼠中的5組，組別分別為B高脂模型對(duì)照組、C高脂藥物對(duì)照組(辛伐他汀IOmg .kg—1)』高脂海藻多肽低劑量組(0. 5 g .kg—1)』中劑量組(I. 0 g .kg—1)、F高劑量組(I. 5 g ^kg4);正常對(duì)照組的組別為A正常對(duì)照組。具體分組及劑量要求如表I所示。表I降血脂實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥劑量__
序號(hào)組另Il_喂養(yǎng)詞料灌胃藥物齊[!量(mg/kgbw)_
A~正常對(duì)照組-正常飼料I餾水 -—
B_高脂模型對(duì)照組高脂飼料蒸餾水 -_
C I高脂藥物對(duì)照組 I高脂詞料I辛伐他汀Iio
權(quán)利要求
1.海藻多肽在制備降血脂、降血糖保健品中的用途，所述海藻多肽采用如下的方式制得浸泡后的壇紫菜和水的混合物料經(jīng)過膠體磨研磨，得到壇紫菜漿液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45°C 55°C、pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物重量體積比濃度3 7%的條件下酶解壇紫菜漿液5h 10h，獲得酶解液，將酶解液離心后收集上清液，再將上清液經(jīng)超濾分離獲得分子量小于10000 Da的活性組分，冷凍干燥或噴霧干燥后備用。
2.根據(jù)權(quán)利要求書I所述的用途，其特征在于優(yōu)選采用AS.1398中性蛋白酶在50°C、pH7. 5、加酶量E/S 10000U. g_\底物重量體積比濃度5%的條件下酶解壇紫菜漿液10h，獲得酶解液。
3.根據(jù)權(quán)利要求書2所述的用途，其特征在于離心后收集的上清液按I:1的比例加水稀釋一倍，而后將稀釋后的上清液加入超濾設(shè)備進(jìn)行分離。
4.一種包括海藻多肽的降血脂、降血糖飲料，其特征在于其包括降血脂、降血糖有效量的海藻多肽和可食用的飲料配方，所述海藻多肽原液采用如下的方式制得浸泡后的壇紫菜和水的混合物料經(jīng)過膠體磨研磨，得到壇紫菜漿液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45。。 55°C>pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物濃度3 7% (w/v)的條件下酶解壇紫菜漿液5h 10h，獲得酶解液，將酶解液離心后收集上清液，再將上清液經(jīng)超濾分離獲得分子量小于10000 Da的活性組分的海藻多肽原液。
5.根據(jù)權(quán)利要求書4所述的包括海藻多肽的降血脂、降血糖飲料，其特征在于所述的飲料配方包括環(huán)狀糊精、蘋果酸、檸檬酸鈉、異維C鈉、維C、甘氨酸、白砂糖和羧甲基纖維素鈉，并按照環(huán)狀糊精5%。 7%。、蘋果酸0. 5%。 1%。、檸檬酸鈉0. 2%。 0. 6%。、異維C鈉0.2%。 0. 6%。、維CO. 2%。 0. 6%。、甘氨酸0. I %。 0. 3%0、白砂糖50%。 80%。和羧甲基纖維素鈉0. 5 0. 8%。的比例加入海藻多肽原液中。
6.根據(jù)權(quán)利要求書5所述的包括海藻多肽的降血脂、降血糖飲料，其特征在于所述的飲料配方還包括楓糖香精和烤大麥香精，并按照楓糖香精0. 1%。 0. 3%。和烤大麥香精0.5%。 I. 5%。的比例加入海藻多肽原液中。
7.根據(jù)權(quán)利要求書4所述的具有降血脂、降血糖功能的海藻多肽飲料，其特征在于離心后收集的上清液按I :1的比例加水稀釋一倍，而后將稀釋后的上清液加入超濾設(shè)備進(jìn)行分離。
全文摘要
本發(fā)明涉及海藻多肽在制備降血脂、降血糖保健品中的用途和包含上述多肽的降血脂、降血糖飲料。海藻多肽采用如下的方式制得浸泡后的壇紫菜和水的混合物料經(jīng)過膠體磨研磨，得到壇紫菜漿液，采用AS.1398中性蛋白酶在45℃～55℃、pH7.2～7.8、加酶量E/S8000～12000U.g-1、底物重量體積比濃度3～7%的條件下酶解壇紫菜漿液5h～10h，獲得酶解液，將酶解液離心后收集上清液，再將上清液經(jīng)超濾分離獲得分子量小于10000Da的活性組分。通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，紫菜經(jīng)生物酶解獲得的海藻多肽具有顯著的降血脂、降血糖及降血壓作用，長期服用可抑制體重過快增長、減少動(dòng)脈硬化的發(fā)生機(jī)率。
文檔編號(hào)A61P3/10GK102961733SQ20121046266
公開日2013年3月13日 申請日期2012年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月16日
發(fā)明者吳成業(yè), 王茵, 蘇永昌, 劉淑集 申請人:福建省水產(chǎn)研究所