專利名稱：治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物，特別是含有(3aS，5s， 6aR) -5- (2- ((2S，4S) -2-氰基-4-氟-吡咯烷-1-基)_2_氧乙氨基)-N, N，5-三甲基-六 氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (IH)-氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽和二甲雙胍或其藥學(xué)上可接受的鹽 (如鹽酸鹽)的固定劑量組合的藥物組合物，制備所述藥物組合物的方法和所述藥物組合 物治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的用途。
背景技術(shù)：
人2型糖尿病是由涉及胰島素抵抗和消弱胰島素分泌的雙重內(nèi)分泌缺陷的復(fù)雜 病理生理學(xué)導(dǎo)致的慢性和漸進(jìn)性疾病。人2型糖尿病的治療一般從飲食和鍛煉開始，隨后 進(jìn)行口服抗糖尿病藥物單一療法。對(duì)于許多患者，這一方案并不能在長期治療期間充分控 制血糖，這就導(dǎo)致在診斷之后的數(shù)年內(nèi)需要進(jìn)行聯(lián)合療法。然而兩種或者更多種口服抗糖 尿病藥物的共_處方對(duì)于使用的許多患者而言會(huì)導(dǎo)致復(fù)雜和困難的治療方案。將兩種或者更多種抗糖尿病試劑合并成單個(gè)制劑提供了不會(huì)增加患者每日治療 制度復(fù)雜性的遞送聯(lián)合療法的可能方式。所述制劑在其它疾病癥候中已經(jīng)廣泛接受，比如 高血壓(HYZAAR 是洛沙坦鉀和雙氫氯噻嗪的組合)和膽固醇降低(VYT0RIN 為辛伐他 汀和依澤替米貝的組合)中。有效和充分耐受的治療的選擇是組合片劑設(shè)計(jì)中的關(guān)鍵步 驟。此外，組分之間具有相互的作用機(jī)制和相容的藥物動(dòng)力學(xué)分步是必不可少的。含有 兩種口服抗糖尿病試劑的市售聯(lián)合片劑的實(shí)例包括Glucovance (二甲雙胍和優(yōu)降糖)、 AVandamentTM( 二甲雙胍和羅格列酮)和Metaglip ( 二甲雙胍和格列甲嗪)。二甲雙胍表示被證實(shí)降低微血管和大血管糖尿病并發(fā)癥的總體負(fù)擔(dān)和延長2型 糖尿病患者壽命的唯一口服抗糖尿病試劑。此外，二甲雙胍治療通常與超重患者的體重降 低和血脂異常性患者的脂肪輪廓的改進(jìn)有關(guān)。二肽基肽酶-IV(DPP-IV)抑制劑表示一類開發(fā)用于治療或者改進(jìn)患有2型糖 尿病患者中的血糖生成控制的新試劑。在當(dāng)前臨床試驗(yàn)中用于治療人2型糖尿病的 藥物有 MK-0431、維達(dá)列汀(LAF-237)、saxagliptin(BMS-47718)、P93/01 (Prosidon)、 SYR322(Takeda)、 GSK823093、 Roche0730699、 TS021(Taisho)、 E3024(Eisai)禾口 PHX-1149 (Phenomix)。比如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，將維達(dá)列汀口服給藥至人類2型糖尿病患者可以 降低與顯著降低的HbAIC水平相關(guān)的空腹葡糖和飯后葡糖偏差。關(guān)于應(yīng)用DDP-IV治療2 型糖尿病的綜述可以參見以下公開物(I)H. -U. Demuth等人，"Type 2diabetes-Theraphy with dipeptidyl peptidase IV inhibitors",Biochim. Biophvs. Acta. 1751:33-44(2005) 禾口(2) K. Augustyns 等人，‘‘ Inhibitors of proline-specific dipeptidyl peptidases DPP4inhibitors as a novel approach for the treatment of Type 2diabetesExpert Opin. Ther. Patants, 15 1387-1407 (2005)。目前一些 DPP-IV 抑制劑已被公開(US5462928、US5543396、W09515309、 W02003004498、W02003082817、W02004032836、W02004085661)，其中 Novartis 公司生成的
3DPP-IV抑制劑HAF-237顯示了良好的DPP-IV抑制活性及選擇性，并已于2007年上帀。


發(fā)明內(nèi)容
具有以下結(jié)構(gòu)式的(3aS，5s，6aR)-5-(2-((2S，4S)_2-氰基_4_ 氟-吡 口各 燒-1-基)-2_氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (IH)-氨甲酰是化合物A。 化合物A化合物A或其鹽對(duì)DPP-IV活性抑制時(shí)間比LAF-237長，抑制強(qiáng)度比LAF-237大。 通過實(shí)驗(yàn)研究，本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)化合物A或其鹽和二甲雙胍或其鹽復(fù)方藥效顯著地 高于單獨(dú)用藥，尤其是當(dāng)化合物A或其鹽和二甲雙胍或其鹽的配比為1 5-1 20時(shí)效果 更好。因此，化合物A或者其鹽與二甲雙胍或者其鹽(如鹽酸鹽)組成的組合物在臨床上 具有重大意義。本發(fā)明提供了化合物A或其藥學(xué)上可接受的鹽和二甲雙胍或其藥學(xué)上可接受的 鹽的固定劑量組合的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物的兩種活性藥物成分是立即釋放或 緩慢釋放。本發(fā)明的藥物組合物可以是片劑形式，并且特別是涂膜片劑，也可以是其他口服 劑型例如膠囊劑等。本發(fā)明的一方面涉及用于醫(yī)學(xué)給藥化合物A或者其藥學(xué)上可接受的鹽和二甲雙 胍或者其藥學(xué)上可接受的鹽的固定劑量組合的劑型。所述劑型可以為粉劑或者固體形式， 并且包括片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服溶液劑、緩釋劑、滴丸劑、沖劑、顆粒劑、緩釋微丸 或其他口服劑型等等。具體的固體劑型涉及含有化合物A或者其藥學(xué)上可接受的鹽和二甲 雙胍或其藥學(xué)上可接受的鹽的固定劑量組合的片劑。本發(fā)明還提供了通過干法?；ê蜐穹；ㄖ苽浠衔顰或其鹽和二甲雙胍 或其鹽的固定劑量組合的藥物組合物的方法。本發(fā)明的另一方面提供了本發(fā)明藥物組合物在治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病 的用途，該用途包括給予需要所述治療的主體治療有效量的本發(fā)明藥物組合物。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，藥物組合物包含(1)化合物A或者其藥學(xué)上可接受 的鹽，為第一種活性藥物成分；(2) 二甲雙胍或者其鹽如鹽酸鹽，為第二種活性藥物成分；和(3)潤滑劑或者助流劑。在本發(fā)明該方面的具體實(shí)施方案中，藥物組合物還可以含有一 種或者多種賦形劑，所述賦形劑選自一種或者多種粘合劑(結(jié)合劑)；一種或者多種稀釋 劑；一種或者多種表面活性劑或者潤濕劑；一種或者多種崩解劑；和一種或者多種抗氧化 劑?；衔顰或二甲雙胍藥學(xué)上可接受的鹽包括但不限于，對(duì)甲苯磺酸鹽、磷酸鹽、鹽 酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、氫溴酸鹽、甲磺酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、醋酸鹽、三氟醋 酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、枸櫞酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、萘磺酸鹽、乳酸鹽和蘋果酸鹽。合并入本發(fā)明藥物組合物中的化合物A或者其鹽的人日用劑量為25毫克 300 毫克。優(yōu)選化合物A或者其鹽的人日用劑量為50毫克 200毫克。離散的人日用劑量為 25、50、75、100、150、200、250和300毫克化合物A或者其鹽。合并入本發(fā)明固定劑量組合中的二甲雙胍或其鹽的人日用劑量為250毫克 3000毫克，離散的人日用劑量為250、500、750、1000、1500、2000、2500和3000毫克。二甲雙
胍或其鹽的這些日用劑量表示在中國和/或美國批準(zhǔn)用于市售治療人2型糖尿病的日用劑量。在本發(fā)明的固定劑量組合中，化合物A或者其鹽和二甲雙胍或者其鹽的人日用劑 量的具體實(shí)施方案如下化合物A 或其鹽(mg) 25，50，75，100，150，200，250，300 二 甲雙胍或其鹽(mg)250, 500，750，1000,1500，2000, 2500，3000可以是化合物A或其鹽任何治療有效量與二甲雙 胍或其鹽的任何治療有效量的組合物，例如50+250，50+500，50+750，100+250，100+500， 100+750 等等。本發(fā)明的藥物組合物中的兩種活性藥物成分可以有四種釋放形式成分化合物A或其鹽 二甲雙胍或其鹽立即釋放立即釋放立即釋放緩慢釋放緩慢釋放立即釋放緩慢釋放緩慢釋放本發(fā)明的藥物組合物通過濕法?；ê透煞；ㄟM(jìn)行制備。在一種實(shí)施方案中，藥物組合物通過濕法粒化法進(jìn)行制備。在一種該實(shí)施方案中， 藥物組合物通過濕法?；ㄟM(jìn)行制備。在進(jìn)行濕法?；?，可以應(yīng)用高剪切粒化或者流化 床?；?。在一種實(shí)施方案中，使用流化床粒化具有使得片劑具有更高徑向強(qiáng)度的優(yōu)點(diǎn)?？梢詫⑼ㄟ^干法?；ê蜐穹；ǐ@得的藥物組合物壓縮成片劑、封裝或者計(jì) 量入小袋中。藥物組合物含有一種或者多種潤滑劑或者助流劑。潤滑劑的實(shí)例包括硬脂酸鎂、 硬脂酸鈣、硬脂酸、硬脂富馬酸鈉、氫化蓖麻油或其混合物。優(yōu)選的潤滑劑是硬脂酸鎂或者 硬脂富馬酸鈉或者其混合物。助流劑的實(shí)例包括膠體二氧化硅、磷酸鈣、硅酸鎂和滑石。本發(fā)明的藥物組合物任選含有一種或者多種粘合劑。粘合劑的實(shí)施方案包括羥丙 基纖維素(HPC)、羥丙基甲基纖維素(HMPC)、羥乙基纖維素、淀粉1500、聚乙烯吡咯烷酮(聚 烯吡酮)和共聚烯吡酮。優(yōu)選的粘合劑是聚乙烯吡咯烷酮。本發(fā)明的藥物組合物還可以任選含有一種或者多種稀釋劑。稀釋劑的實(shí)例包括甘露醇、山梨醇、磷酸二氫鈣二水合物、微晶纖維素和粉化纖維素。優(yōu)選的稀釋劑是微晶纖 維素。微晶纖維素可以得自于數(shù)個(gè)供應(yīng)商，包括FMC Corporation制造的Avicel PH 101、 Avicel PH 102、Avicel PH 103、Avicel PH 105 和 Avicel PH 200。本發(fā)明的藥物組合物還可以任選含有崩解劑。崩解劑可以是數(shù)種改性淀粉、改性 纖維素聚合物或者聚羧酸中的一種，比如交聯(lián)羥甲基纖維素鈉、淀粉乙醇酸鈉、波拉克林鉀 和羥甲基纖維素鈣(CMCCalcium)。在一種實(shí)施方案中，崩解劑是交聯(lián)羥甲纖維素鈉。交聯(lián) 羥甲纖維素鈉NF類型A在市場上以商品名“Ac-di-sol”獲得。本發(fā)明的藥物組合物還可以任選含有一種或者多種表面活性劑或者潤濕劑。表面 活性劑可以為陰離子、陽離子或者中性表面活性劑。陰離子表面活性劑包括月桂基硫酸鈉、 十二烷基磺酸鈉、油烯基硫酸鈉和與硬脂酸脂和滑石混合的月桂酸鈉。陽離子表面活性劑 包括苯扎氯銨和烷基三甲基溴化銨。中性表面活性劑包括甘油單油酸脂、聚氧乙烯脫水山 梨糖醇脂肪酸脂、聚乙烯醇和脫水山梨醇脂。潤濕劑的實(shí)施方案包括泊洛沙姆、聚氧乙烯烷 基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物和聚氧乙烯硬脂酸脂。可以任選將抗氧化劑加入到制劑中，從而給予其化學(xué)穩(wěn)定性?？寡趸瘎┻x自 α-生育酚、Y-生育酚、δ-生育酚、生育酚富集天然來源的提取物，L-抗壞血酸和它的 鈉或者鈣鹽、抗壞血酰棕櫚酸酯、掊酸丙酯、掊酸辛酯、掊酸十二烷基酯、丁基化羥基甲苯 (BHT)和丁基化羥基苯甲醚(BHA)。在一種具體實(shí)施方案中，抗氧化劑為BHT或者ΒΗΑ。本發(fā)明藥組合物的優(yōu)選劑型是通過壓縮方法制備的片劑。所述片劑可以用比如羥 丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素的混合物進(jìn)行涂膜，該混合物中含有二氧化鈦和/或其它 著色劑，比如氧化鐵、染料和色淀；聚乙烯醇(PVA)和聚乙二醇(PEG)的混合物，含有二氧化 鈦和/或其它著色劑，比如氧化鐵、染料和色淀；或者任何其它適宜的即時(shí)釋放涂覆劑。包 衣對(duì)最終的片劑提供味道掩蔽和另外的穩(wěn)定性。市售的涂膜為Colorcon提供的為配制粉 末混合物的Opadry 。最后，如果需要，可以加入甜味劑和/或增香劑。本發(fā)明的二甲雙胍或者其鹽如鹽酸鹽既可以是立即釋放也可以是緩慢釋放，化合 物A或其鹽可以是立即釋放，也可以是緩慢釋放。本發(fā)明的藥物片劑組合物還可以含有一種或者多種另外的選自多種藥物制劑領(lǐng) 域已知的賦形劑中的制劑成分。根據(jù)對(duì)藥物組合的期望的性能，基于它們?cè)谥苽淦瑒┙M合 物中的已知用途，可以單獨(dú)或者聯(lián)合選擇任意種成分。所述成分包括但不限于稀釋劑、壓縮 助劑、助流劑、崩解劑、潤滑齊 、香料、增香齊 、甜味劑和防腐劑。在此使用的術(shù)語“片劑”意圖包括所有形狀和大小的壓縮藥物劑量制劑，無論涂覆 與否?？梢杂糜谕扛驳奈镔|(zhì)包括羥丙纖維素、羥丙基甲基纖維素、二氧化鈦、滑石、甜味劑、 著色劑和增香劑。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物通過濕法?；?高剪切和/或流化床) 進(jìn)行制備。?；瞧渲袑⒄澈蟿┘尤氲搅；芤褐谢蛘呒尤氲搅；仓幸孕纬深w粒的方 法。在濕法粒化方法中涉及的步驟包括以下(1)將活性藥物成分二甲雙胍或者其鹽如鹽酸鹽和化合物A或者其鹽加入到粒化 筒中；(2)將任選的崩解劑加入到步驟1中；
(3)對(duì)于高剪切粒化，將粘合劑(比如聚乙烯吡咯烷酮或者羥丙基纖維素)干燥加 入到?；仓泻瓦M(jìn)行短期干法混和，隨后加入水，存在或者不存在表面活性劑(比如月桂 基硫酸鈉)。對(duì)于流化床粒化，將兩種活性藥物成分加入到粒化器筒中，和通過流體化將粒 化溶液加入其中，所述?；芤河烧澈蟿┑乃芤航M成，含有或者不含有表面活性劑；(4)通過高剪切粒化制備的顆粒在烘箱中進(jìn)行托架干燥或者在流化床干燥器中進(jìn) 行干燥。對(duì)于通過流化床粒化制備的顆粒，顆粒在流化床干燥器中進(jìn)行干燥；(5)在適宜的研磨機(jī)中調(diào)整干燥顆粒的尺寸；(6)在適宜的混合器中，使任選的稀釋劑(比如微晶纖維素和磷酸二氫鈣二水合 物)與干燥的顆?；旌希?7)將潤滑劑或者助流劑(比如硬脂酸鎂和硬脂富馬酸鈉)加入到在適宜的混合 器中的步驟6的混合物中；(8)可以將步驟7的潤滑顆粒混合物填裝入小瓶、小袋或者膠囊中或者壓縮成期 望的片劑形狀；和(9)如果需要，所得的片劑可以進(jìn)行薄膜涂覆。在干法處理(直接壓制或者干法?；?方法中涉及的步驟包括(1)將活性藥物成分二甲雙胍或其鹽和化合物A或其鹽加入到適宜的混合器中；(2)將任選的崩解劑加入到步驟1中；(3)將任選的結(jié)合劑和/或稀釋劑加入到步驟2中；(4)將潤滑劑或者助流劑加入到步驟3中；(5)可以將步驟4的混合物填裝入小瓶、小袋或者膠囊中或者壓縮成期望的片劑 形狀，或者通過滾軸壓縮機(jī)進(jìn)行處理；(6)如果通過滾軸壓縮機(jī)進(jìn)行處理，如果需要，可以在適宜的研磨機(jī)中調(diào)整顆粒的 尺寸；(7)在適宜的混合器中，可以將任選的稀釋劑加入到所得顆粒中，從而改良?jí)嚎s性 能；(8)將任選的潤滑劑或者助流劑加入到步驟7的混合物中；(9)可以將步驟8的潤滑顆?；旌衔锾钛b入小瓶、小袋或者膠囊中或者壓縮成期 望的片劑形狀；和(10)如果需要，步驟5或者步驟9所得的片劑可以進(jìn)行薄膜涂覆。本發(fā)明還提供了通過口服給藥需要所述治療的主體治療有效量的一種本發(fā)明固 定劑量組合藥物組合物治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的方法。在一種實(shí)施方案中，需要 所述治療的主體是人類。在另一實(shí)施方案中，藥物組合物為片劑的形式，也可以是膠囊劑形 式。含有固定劑量組合的藥物組合物可以每日一次(QD)、每日兩次(BID)或者每日三 次(TID)給藥。本發(fā)明化合物A的合成方法(3aS，5s,6aR) _5_ (2_ ((2S，4S) _2_ 氰基 _4_ 氟-吡咯烷 基)_2_ 氧乙氨 基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (IH)-氨甲酰(化合物A)的合成方法按照PCT/ CN2008/071014實(shí)施例18所述的方法制備，因此將該公開內(nèi)容作為參考文獻(xiàn)。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例進(jìn)一步描述和說明了在本發(fā)明范圍內(nèi)的實(shí)施方案。實(shí)施例和試驗(yàn)例僅 僅是為了例證說明的目的給出，并不意圖將其視為對(duì)本發(fā)明的限制，其可能存在多種不背 離本發(fā)明精神和范圍的變體。t施例1 50臺(tái)克化合物A和500臺(tái)克二甲雙胍鹽酸鹽的固定劑合/毎片 劑-濕式?；?*在處理期間除去。制造方法將化合物A和二甲雙胍鹽酸鹽輸入到高剪切成粒器或者流化床成粒器中。在高剪 切?；那樾沃?，除了聚乙烯吡咯烷酮粘合劑之外，在3 5分鐘時(shí)間內(nèi)將含有月桂基硫酸 鈉的純凈水加入到APIs (活性藥物成分)中。濕的物質(zhì)或者在40°C下托架干燥或者在流 化床干燥器中在45-60°C的入口溫度下干燥3 6分鐘。在流化床?；那樾沃?，在30 60分鐘時(shí)間內(nèi)將含有聚乙烯吡咯烷酮和月桂基硫酸鈉的凈化水加入到APIs中。濕的物質(zhì) 在流化床干燥器中在45-60°C的入口溫度下進(jìn)行干燥。然后，利用共研磨機(jī)對(duì)干燥的材料進(jìn) 行研磨，從而獲得精細(xì)顆粒。在研磨之后，將微晶纖維素加入到顆粒中和在雙殼混合器中將 其混合200轉(zhuǎn)。然后，將潤滑劑(硬脂富馬酸鈉)加入其中并且另外混合100轉(zhuǎn)。潤滑的 混合物利用旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)進(jìn)行壓縮，從而提供675mg無涂膜片劑。所得片劑任選用Opadry II懸浮液(聚乙烯醇、聚乙二醇、二氧化鈦和滑石，有或者沒有著色劑)涂覆至重量增加大 約2. 5%，從而提供692mg涂膜片劑。特別說明處方中化合物A 50mg，也可以是化合物A的藥學(xué)上可接受的鹽。二甲 雙胍鹽酸鹽也可以是二甲雙胍或者其它藥學(xué)上可接受的鹽。類似的，通過調(diào)節(jié)處方中化合物A或其鹽，二甲雙胍或其鹽的用量，來制備含有不 同比例的兩種活性成分的處方，例如化合物A或其鹽與二甲雙胍或其鹽的比例為1 1、 1 5、1 7. 5,1 10、1 15、1 20、1 30、1 40、1 50、1 60 等等。
試驗(yàn)例1 化合物A、LAF_237的體外活件及詵擇件研究方法解凍DPP-IV-Glo.使用前緩沖并平衡到室溫，使用前緩沖凍存的熒光素檢測試 劑，懸浮DPP-IV-Glo.在底物中加入超純水輕微混合均勻后，制成ImM的底物，將熒光素 檢測試劑放入茶色瓶中，加入DPP-IV-Glo.。熒光素檢測試劑應(yīng)在1分鐘內(nèi)溶解，用DMSO 溶解所測化合物至最終操作濃度的50倍，每個(gè)試管中加入50倍濃度的所測化合物2 μ L， 在反面對(duì)照和空白對(duì)照中加入2 μ LDMS0,在每個(gè)試管中加入46 μ L Tris緩沖液，在空白 對(duì)照中加入48 μ L Tris緩沖液，在反面對(duì)照和測試樣的每個(gè)試管中加入2 μ LDPP-IV酶， 振動(dòng)混合并離心試管。將試管中物質(zhì)全部轉(zhuǎn)移到96-孔平板上，混合底物和DPP-IV-Glo. 比例為1 49。振動(dòng)混合至充分混合。使用前在室溫下靜置30-60分鐘，在每個(gè)96-孔 平板孔中加入50yL DPP-IV-Glo.和底物的混合液，用封膜封住平板，用平板振蕩器在 300-500rpm/30s下慢慢混合96孔中物質(zhì)。在室溫下培養(yǎng)30分鐘到3小時(shí)，在NOVOstar多 功能酶標(biāo)儀檢測化學(xué)發(fā)光計(jì)數(shù)值。[表 1] 結(jié)果化合物A對(duì)DPP-IV的抑制活性優(yōu)于對(duì)照藥物L(fēng)AF-237，選擇性也強(qiáng)于 LAF-237。試驗(yàn)例2 不同比例藥物組合物對(duì)ιΗ常ICR小鼠的口服糖耐量研究雄性ICR小鼠于禁食6小時(shí)后口服雙蒸水、不同配比(化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽二 甲雙胍鹽酸鹽=1 1,1 5,1 1.75,1 10,1 15，1 20，1 30，1 40，1 50， 1 60)相同劑量(100mg/kg)的藥物組合物，各組于給藥30分鐘時(shí)口服葡萄糖2.5g/kg， 做口服糖耐量試驗(yàn)。于給糖后0、30、60、120分鐘時(shí)取血，測定血清葡萄糖水平。血清葡萄糖測定方法；采用葡萄糖試劑盒測定血清中的葡萄糖含量，取250 μ 1酶工作液，加入5μ 1血 清，同時(shí)設(shè)立空白管(加入5μ1雙蒸水)及標(biāo)準(zhǔn)管(加入5μ1葡萄糖標(biāo)液)，混勻，37°C水 浴20分鐘，以空白管調(diào)零，0D505nm處比色測定。血清葡萄糖含量BG(nmol/l) = OD樣品管/OD標(biāo)準(zhǔn)管X 5· 55數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析；1、采用均值士SD及Student-t test對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析2、計(jì)算給糖后30分鐘時(shí)血糖下降百分率以及曲線下面積AUC[表2]正常ICR小鼠口服受試藥物組合物(100mg/kg)后對(duì)口服糖耐量的影響 (均值 士 SD，η = 6) *，P < 0. 05 ；與空白對(duì)照組相比；**，P < 0.01 ；與空白對(duì)照組相比；***，P < 0. 001 ；與空白對(duì)照組相比；試驗(yàn)例3 化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽、LAF-237分別與二甲雙胍鹽酸鹽的聯(lián)合服用在 遺傳性肥胖且患糖尿病的Wistar肥鼠中的效應(yīng)將14 19周齡的雄性Wistar肥鼠分成5組，每組5 6只，分別服用化合物 A對(duì)甲苯磺酸鹽、LAF-237(各10mg/kg體重/天，口服)和二甲雙胍鹽酸鹽(100mg/kg體 重/天；以5ppm的比率混在市售飼料中服用)14天。從尾靜脈取血，使用一種商品試劑盒 (NC-ROPET,Nippon Chemiphar CO.)以酶法分別測定血漿葡萄糖和血紅蛋白Al.結(jié)果表示 為每組(η = 5-6)的平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差并以Durmett’ s檢驗(yàn)分析，在表3中給出。使用
的顯著性水平。[表 3] * :P < 0. 01與對(duì)照組相比表3中化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽與二甲雙胍鹽酸鹽聯(lián)合服用很明顯地降低了血液葡 萄糖和血紅蛋白的濃度，其強(qiáng)度大于化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽、二甲雙胍鹽酸鹽、LAF-237的 單獨(dú)給藥，特別是其強(qiáng)度大于HAF-237與二甲雙胍鹽酸鹽聯(lián)合用藥。
權(quán)利要求
一種治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物，所述藥物組合物含有治療有效量的(3aS，5s，6aR) 5 (2 ((2S，4S) 2 氰基 4 氟 吡咯烷 1 基) 2 氧乙氨基) N，N，5 三甲基 六氫環(huán)戊[C]吡咯 2(1H) 氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽與二甲雙胍或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中(3aS，5s，6aR) 5 (2 ((2S，4S) 2 氰基 4 氟 吡咯烷 1 基) 2 氧乙氨基) N，N，5 三甲基 六氫環(huán)戊[C]吡咯 2(1H) 氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽與二甲雙胍或其藥學(xué)上可接受的鹽的重量比為1∶1至1∶60，優(yōu)選為1∶5至1∶20。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述的(3aS，5s,6aR)-5- (2- ((2S， 4S)-2-氰基-4-氟-吡咯烷-1-基)-2-氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡 咯_2 (IH)-氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽的人日用量為25-300mg，二甲雙胍或其藥學(xué)上可 接受的鹽的人日用量為250-3000mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物為片劑、硬膠囊劑、軟 膠囊劑、口服溶液劑、緩釋劑、滴丸劑、沖劑、顆粒劑、緩釋微丸或其他口服劑型。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述的(3aS，5s， 6aR) -5- (2- ((2S，4S) -2-氰基-4-氟-吡咯烷-1-基)_2_氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六 氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (IH)-氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽是立即釋放或緩慢釋放。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述二甲雙胍或其藥學(xué)上可接受 的鹽是立即釋放或緩慢釋放。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物以一日一次、一 日兩次或一日三次給藥。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽選自對(duì)甲 苯磺酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、氫溴酸鹽、甲磺酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、琥珀 酸鹽、醋酸鹽、三氟醋酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、枸櫞酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、萘磺酸鹽、 乳酸鹽或蘋果酸鹽。
8.制備如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的藥物組合物的方法，其中所述方法為濕法粒化法 和干法?；?。
9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療哺乳動(dòng)物包括人糖尿病的藥 物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物，特別是含有(3aS，5s，6aR)-5-(2-((2S，4S)-2-氰基-4-氟-吡咯烷-1-基)-2-氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯-2(1H)-氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽和二甲雙胍或其藥學(xué)上可接受的鹽(如鹽酸鹽)的固定劑量組合的藥物組合物，制備所述藥物組合物的方法和所述藥物組合物治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的用途。
文檔編號(hào)A61K31/155GK101904840SQ20091014061
公開日2010年12月8日 申請(qǐng)日期2009年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月8日
發(fā)明者朱亞飛, 李雷明, 袁開紅, 馬淑芹 申請(qǐng)人:江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司