專利名稱：可釋放一氧化氮的新型非類固醇類抗炎藥、它們的制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組可釋放一氧化氮(NO)的新型非類固醇類抗炎藥物，它們的制備方法和用途。非類固醇類抗炎藥(NSAID)有顯著的抗炎、解熱止痛和抗血栓作用，是最廣泛使用的藥物類型。由于這類藥物通過抑制環(huán)氧化酶，阻止前列腺素生成，普遍具有消化道毒性作用，包括胃粘膜損害和胃出血等。降低消化道毒副作用是近年來開發(fā)這類新藥的基本立足點(diǎn)。主要手段包括開發(fā)不經(jīng)胃吸收的腸溶片，原形藥(形成肝臟代謝后的活性化物)、聯(lián)合用藥(如與抑制胃酸分泌藥或外源性前列腺素)，然而這些措施并沒有明顯地改善NSAID的嚴(yán)重副作用，如胃穿孔和出血(Soll A.H等.Ann.Intern.Med.114307-319，1991)。將NSAID與一種能釋放一氧化氮的分子片斷聯(lián)接組成的新化合物，被認(rèn)為可以顯著降低甚至完全消除NSAID的胃腸道毒副作用。這種化合物，通過釋放NO維持胃粘膜血流量、阻止白細(xì)胞附著于胃微循環(huán)，對(duì)抗由于NSAID抑制前列腺素合成所產(chǎn)生的胃粘膜損害(Wallac J.L.Can.J.Physiol.Pharmacol.7198--102，1993)。根據(jù)最新文獻(xiàn)報(bào)道，三種NSAID(氟吡洛芬、酮洛芬和雙氯滅痛)的4-硝氧基丁基脂已經(jīng)合成。這些化合物具有與母體NSAID相同的抗炎活性。但是，對(duì)胃損害的毒副作用明顯低于母體NSAID(Wallace，J.L等，Gastroenterology 8094-98，1994；Wallace，J.L等，Eur.JPharmacol.257249-255，1994；Cuzzolin L等，Pharmacol.Res.2989-97，1994；Reuter B.k等Life sci55p11-p18，1994)。大劑量多次重復(fù)給藥，NSAID導(dǎo)致顯著的小腸損害，穿孔和死亡，而同樣劑量的NSAID硝酸酯不引起小腸損害(Reuter B.K等Life sci.55p11-p18，1994)。除了解熱鎮(zhèn)痛和消炎以外，NSAID通過抑制血小板前列腺素(主要是血栓素)的生成，具有抗血栓形成作用。廣泛使用的有阿司匹林。然而，在阿斯匹林作為抗血栓藥，預(yù)防心腦血管疾病方面，長(zhǎng)期用藥導(dǎo)致胃的毒副作用(如出血和穿孔)成為阿斯匹林使用上的一大障礙。一種阿斯匹林的硝酸酯衍生物可能大降低阿斯匹林的消化道毒性(尤其是長(zhǎng)期用藥的病人)。此外，這種硝酸酯衍生物釋放NO，通過抑制血小板附著和聚集，增加阿斯匹林抗血小板活性。NO還直接擴(kuò)張冠脈和腦血管。因此，這種阿斯匹林硝酸酯衍生物對(duì)心腦血管疾病的防治方面有廣泛的使用前景。根據(jù)NO對(duì)胃腸道的保護(hù)作用，將NSAID分子上連接一個(gè)含NO分子片斷。這種新型NSAID硝酸酯進(jìn)入體內(nèi)后釋放NO，可對(duì)抗由NSAID本身引起的胃腸道毒副作用。英國(guó)Metgrove公司對(duì)雙氯滅痛的飽和硝酸酯曾申請(qǐng)世界專利(PCT，專利號(hào)WO94/04484)。Wallace等對(duì)氟吡洛芬和酮洛芬飽合硝酸酯也有過藥理學(xué)研究(Wallace.J.L等，Currentawareness，Tips-Novenber 1994 Vol15 405-406)。其他NSAID的硝酸酯化合物至今未見文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)。本發(fā)明提供了阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬和吡咯芬的各種硝酸酯化合物。本發(fā)明還包括雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬的不飽和硝酸酯化合物。本發(fā)明還包括阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬和吡咯芬的各種硝酸酯以及雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬的不飽和硝酸酯的制備方法和它們的用途。本發(fā)明的目的在于提供能釋放一氧化氮(NO)的分子片斷與NSAID結(jié)構(gòu)連接形成的一組新的NSAID硝酸酯化合物。NO可在體內(nèi)釋放并對(duì)抗相應(yīng)的NSAID藥物產(chǎn)生的消化道毒性。這組新型NSAID硝酸酯化合物有望取代原體藥物NSAID，用于抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛和防治心腦血管和外周血管疾病。本發(fā)明的新型NSAID硝酸酯化合物的制備方法包括將含有羧基的NSAID與一個(gè)帶有鹵素(Br，cl或I)的單元醇反應(yīng)生成含鹵素的羧酸酯，然后將鹵素轉(zhuǎn)化為硝基酯；或?qū)⒑恤然腘SAID與一個(gè)含硝基的單元醇反應(yīng)生成NSAID的硝酸酯化合物。合成路線如下合成方法一 合成方法二 以下為制備本發(fā)明化合物的實(shí)施例，這些實(shí)施例并不意味著對(duì)本發(fā)明的限制。方法一實(shí)施例1、2-乙酰氧基苯甲酸-3-硝氧基丙基酯(硝酸酯)的合成(化合物1)1、在阿斯匹林(2.0g；11.10mmol)的苯溶液(40ml)中，加入3-溴丙醇(1.85g，13.31mmol)和濃硫酸(43.5mg，0.44mmol)。此反應(yīng)液回流，除去水份，1小時(shí)后加入10％K2CO3(20ml)，用乙酸乙酯提取(50ml×3)，乙酸乙酯提取液合并后用10％K2CO3洗(10ml×1)，水洗(10ml×1)和飽和NaCL水溶液洗(10ml×1)。洗后的乙酸乙酯提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析，9∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得2-乙酰氧基苯甲酸-3-溴丙基酯(101)(0.98g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)2.30(m，2H)；2.36(s，3H)；3.52(t，2H)；4.43(t，2H)；7.10(d，1H)；7.32(t，1h)；7.58(t，1h)；8.01(d，1h)IR(cm-1)2963；1769；1723；1607；1452；1254；1194；1082.2、在一園底燒瓶中放入上述所得2-乙酰氧基苯甲酸-3-溴丙基酯(101)(140mg；0.46mmol)乙睛溶液(1ml)。然后滴加AgNO3溶液(85mg，0.50mmol溶解于1.5ml乙晴中)。上述反應(yīng)液85℃加熱攪拌反應(yīng)2小時(shí)，反應(yīng)中有黃綠色沉淀產(chǎn)生，過濾除去沉淀，濾液濃縮至干。殘留物以硅膠柱層析分離，用4∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得2-乙酰氧基苯甲酸丙基酯(阿斯匹林硝酸酯)(化合物1；128mg)。1HNMR(300MH2)(CDCL3)2.20(m，2H)；2.35(S，3H)；4.40(t，2H)；4.61(t，2H)；7.12(d，1H)；7.33(t，1H)；7.60(t，1H)；8.01(d，1H).IR(cm-1)2969；2901；1767；1723；1628；1194；1080；860.實(shí)施例2、α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-硝氧基丙基酯(布洛芬硝酸酯)的合成(化合物2)1、在α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸鈉(布洛芬鈉鹽)(2.0g，8.76mmol)的苯懸浮液中(40ml)加入濃硫酸(894mg，9.11mmol)，此懸浮液攪拌數(shù)分鐘后轉(zhuǎn)為純清溶液，在此溶液中加入3-溴丙醇(1.46g10.50mmol)。此反應(yīng)混合物回流，除去水份，1小時(shí)后加入10％K2CO3(20ml)，用乙酸乙酯提取(50ml×3)，乙酸乙酯提取液合并后用10％K2CO3洗(10ml×1)；水洗(10ml×1)和飽和NaCL水溶液洗(10ml×1)。洗后的乙酸乙酯層用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析，95∶5正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-溴丙基酯(102)(2.01g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.90(d，6H)；1.50(d，3H)；1.84(m，1H)；2.10(m，2H)；2.45(d，2H)；3.28(t，2H)；3.70(g，1H)；4.20(m，2H)；7.10(d，2H)；7.20(d，2H).IR(cm-1)2957；2868；1738；1512；1464；1215；1163；1094；1022；848.2、在α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-溴丙基酯(102)(2.01g，6.13mmol)的乙晴溶液(7ml)中滴加AgNO3溶液(1.2g，7.06mmol溶解于11ml乙腈中)，上述反應(yīng)液于85℃加熱攪拌反應(yīng)2小時(shí)，過濾除去生成的黃綠色沉淀，濾液濃縮至干，殘留物以硅膠柱層析分離，用9∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-硝氧基丙基酯〖布洛芬硝酸酯(化合物2，1.81g)〗1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.90(d，6H)；1.50(d，3H)；1.85(m，1H)；2.00(m，2H)；2.45(d，2H)；3.70(g，1H)；4.17(m，2H)；4.35(t，2H)；7.10(d，1H)；7.02(d，1H)；7.20(d，1H).IR(cm-1)2957；2870；1738；1632；1281；1165；858.方法二實(shí)施例3α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(布洛芬不飽和硝酸酯)的合成(化合物3)1)、1，4-丁炔-2二醇(4g，46.45mmol)溶解于二氧甲烷中(100ml)，在此溶液中加入叔丁基二甲基氯化硅(7.68g，51.13mmol)和咪唑(3.48g，51.13mmol)，此反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)四小時(shí)后過濾除去沉淀，濾液減壓濃縮至干，其殘留物用硅膠柱層析分離，從4∶1正已烷-乙酸乙酯混合液洗脫得1-叔丁基二甲基硅氧基丁炔(2)-4-醇(103)(4.2g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.10(S，6H)；0.90(S，9H)；4.30(S，2H)；4.35(S，2H).2)、在一園底燒瓶中置乙酸酐(9.13ml，89.50mmol)并用冰水浴冷卻，在此冷的乙酸酐中滴加無色濃硝酸(2.37ml，51.35mmol)，滴加完后在冰水浴中反應(yīng)15分鐘，然后將此混合液在冰水浴冷卻下加到1-叔丁基二甲基硅氧基丁炔(2)-4醇(4.2g，22.34mmol)中，此反應(yīng)混合物在冰水浴中反應(yīng)一小時(shí)后加入少量冰，然后用二氯甲烷提取三次(30ml×3)，提取液用10％NaHCO3水溶液洗二次(5ml×2)，水冼一次(5ml)，飽和NaCL水溶液一次(5ml)，二氯甲烷提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾除去硫酸鎂，濾液濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析分離，4∶1正己烷-乙酸乙酯洗脫得1-叔丁基二甲基硅氧基-4-硝氧基丁炔-2(104)(3.1g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.12(S，6H)；0.92(S，9H)；4.38(S，2H)；5.04(S，2H).3)、在冰水浴冷卻下的1-叔丁基二甲基硅氧基-4-硝氧基丁炔-2(104)(3.1g，12.65mmol)四氫呋喃(30ml)溶液中加入氟化四正丁基銨(9.8g，37.72mmol)，反應(yīng)混合物然后在室溫下反應(yīng)二小時(shí)，反應(yīng)液減壓濃縮至干，其殘留物用硅膠柱層析分離，以2∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得1-硝氧基丁炔(2)-4-醇(105)(1.1g).1HNMR(300MH2)(CDCL3)4.32(S，2H)；5.05(S，2H).4).在α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸鈉(100mg，0.44mmol)的苯懸浮液中(20ml)加入濃硫酸(43.1mg，0.44mmol)，此懸浮液攪拌數(shù)分鐘后轉(zhuǎn)為純清溶液，在此溶液中加入1-硝氧基丁炔(2)-4-醇(105)(86.1g，0.66mmol)，此反應(yīng)物回流，除去水份，1小時(shí)后加入10％K2CO3(10ml)，然后用乙酸乙酯提取(20ml×3)，乙酸乙酯混合并再用10％K2CO3洗(5ml×1)水洗(5ml×1)和飽和NaCl水溶液洗(5ml×1)。乙酸乙酯層用無水硫酸鎂干燥，過濾除去硫酸鎂，濾液減壓濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析分離，用9∶1正已烷-乙酸乙酯洗脫得α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸2-硝氧基-丁炔(2)酯(化合物3)(88mg).1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.90(d，6H)；1.50(d，3H)；1.86(M，1H)；2.46(d，2H)；3.74(g，1H)；4.70(g，2H)；5.00(S，2H)；7.10(d，2H)；7.20(d，2H).實(shí)施例41-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基丁炔(2)酯(消炎痛不飽和硝酸酯)的合成(化合物4)1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸(消炎痛)(300mg，0.84mmol，1-硝氧基丁炔(2)-4-醇(105)(91.6mg，0.70mmol)，和4-二甲胺基吡啶(DMAP)(28.1mg，0.23mmol)溶解在5ml CH2CL2.1，3-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(172.7mg，0.84mmol)加入到上述反應(yīng)液中，此反應(yīng)液在室溫反應(yīng)六小時(shí)，反應(yīng)混合物過濾除去沉淀物，濾液濃縮至干，殘留物硅膠柱層析分離，以2∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(消炎痛不飽和硝酸酯)(化合物4)(210mg)1HNMR(300MH2)(CDCL3)2.40(S，3H)；3.72(S，2H)；3.85(S，3H)；4.76(S，2H)；5.02(S，2H)；6.07(M，1H)；6.88(D，1H)；6.97(d，1H)；7.50(d，2H)；7.70(d，2H).實(shí)施例5(S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(萘普生不飽和硝酸酯)的合成(化合物5)。(S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸(萘普生)(200mg，0.87mmol)，1-硝氧基-丁炔(2)-4-醇(105)(94.9mg，0.72mmol)，和4-二甲胺基吡啶(DMAP)(29.1mg.0.23mmol)溶解在5mlCH2CL2.1，3-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(178.9mg，0.87mmol)加入到上述反應(yīng)液中，此反應(yīng)液在室溫反應(yīng)六小時(shí)，反應(yīng)混合物冷卻到室溫后過濾除去沉淀物，濾液濃縮至干，殘留物硅膠柱層析分離，以3∶1正已烷-乙酸乙酯混合液洗脫得(S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(萘普生不飽和硝酸酯)(化合物5)(178mg)1HNMR(300MH2)(CDCL3)1.60(d，3H)；3.89(M，1H)；3.90(S，3H)；4.70(M，2H)；5.00(S，2H)；7.15(d，2H)；7.40(d，1H)；7.70(t，3H).上述二方法中母體NSAID藥物除包含上述阿斯匹林、布洛芬、消炎痛、萘普生外，還包括酚吡咯芬和吡丙芬的飽和及不飽和直鏈和支鏈及雙氯滅痛，氟吡洛芬和酮洛芬的不飽和的直鏈和支鏈硝酸酯。單元醇和雙元醇包括以下結(jié)構(gòu)的醇HORX，HOROH其中R＝1-10個(gè)碳的飽和及不飽和，直鏈及支鏈的烷基；X＝CL，Br，I本發(fā)明的新型NSAID硝酸酯口服后體內(nèi)活性測(cè)定65只雌性CD-1小鼠(體重21-26克)隨機(jī)分為13組(每組5只)。分別為溶劑對(duì)照組；消炎痛和消炎痛-4-硝基丁炔酯給藥組(1.0mg/kg和0.1mg/kg)；萘普生和萘普生-4-硝基丁炔酯給藥組(10mg/kg和1mg/kg)；布洛芬和布洛芬-4-硝基丁炔酯給藥組(10mg/kg和1mg/kg)。布洛芬、消炎痛、萘普生三種原形藥從sigma公司購進(jìn)。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物禁食15小時(shí)。10％PEG200用作溶劑，各種藥物先溶解于PEG200之中，然后按10％PEG200比例在超聲狀態(tài)下加入蒸溜水，制成口服液。各個(gè)動(dòng)物分別灌胃給予對(duì)照溶劑或?qū)嶒?yàn)藥物(1ml/kg體重)。給藥后1小時(shí)，斷頭取血。以每ml血加入100單位肝素抗凝。取0.3ml全血加入2mM Ca+2離子導(dǎo)入劑A23187 3μl，在37℃溫度下培養(yǎng)30分鐘后，離心制備血漿。然后采用美國(guó)Cayman公司血栓素B2(T×B2)EIA測(cè)定藥盒檢測(cè)血漿樣品中T×B2含量。血液T×B2水平反映全血細(xì)胞中環(huán)氧化酶活性。用Cayman T×B2EIA藥含測(cè)定全血T×B2含量，在沒有A23187刺激條件下為7.2ng/ml。當(dāng)加入A23187后T×B2血濃度增加到502.8±83ng(x±SE)/ml。各種藥物對(duì)A23187刺激全血T×B2生成的抑制活性見表1
結(jié)果表明，以上三種NSAID的硝基丁炔酯在口服吸收后都具有顯著抑制環(huán)氧化酶產(chǎn)生前列腺素代謝產(chǎn)物作用。并且與原型化合物相比其抑制作用均有不同程度的提高。
權(quán)利要求
1.一組可釋放一氧化氮分子的含羧基的非類固醇抗炎藥(NSAID)的硝酸酯，具有如下的分子結(jié)構(gòu)Y-COO-R-ONO2其中Y-COO-為羧基NSAID，R為1-10個(gè)碳的飽和或不飽和直鏈或支鏈烷基，Y-COO-為阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬和吡丙芬時(shí)，R為1～10個(gè)碳的飽和或不飽和直鏈或支鏈的烷基，Y-COO-為雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬時(shí)，R為1～10個(gè)碳的不飽和直鏈或支鏈的烷基。
2，權(quán)利要求1的NSAID硝酸酯用于解熱、鎮(zhèn)痛、消炎和防治缺血性心腦血管疾病。
3，制備權(quán)利要求1的新型NSAID硝酸酯的方法，其特征為NSAID中的羧基與含鹵素或含硝氧基的醇反應(yīng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的制備方法，其特征是所述鹵素為Br，CL，I；其轉(zhuǎn)化成硝氧基的反應(yīng)是在乙腈溶劑中與硝酸銀反應(yīng)。
5.根據(jù)權(quán)力要求3或4的方法其中醇的羥基轉(zhuǎn)化為硝酸酯(硝氧基)的方法中，所用試劑是乙酸酐與濃硝酸的混合物。
6.權(quán)力要求1中的NSAID藥物是指阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬、吡丙芬、雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬。
7.根據(jù)權(quán)力要求3的方法其中的醇為以下結(jié)構(gòu)HORX，HCROH.其中R＝1-10個(gè)碳的飽和或不飽和，直鏈或支鏈的烷基；X＝CL，Br，I
8.用說明書中方法一制備阿司匹林硝酸酯(2-乙酰氧基苯甲酸-3-硝氧基丙基酯)和布洛芬硝酸酯(α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-硝氧基丙基酯)。
9.用說明書中方法二制備布洛芬不飽和硝酸酯(α-甲基-4(2-甲基丙基)苯乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯)，消炎痛不飽和硝酸酯(1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯和萘普生不飽和硝酸酯((S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯。
10.用說明書中方法一或方法二制備阿司匹林硝酸酯(2-乙酰氧基苯甲酸硝氧基烷(烯、炔)基酯)，萘普生硝酸酯((S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-硝氧基烷(烯、炔)基酯)，布洛芬硝酸酯(α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸硝氧基烷(烯、炔)基酯)，消炎痛硝酸酯(1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基烷(烯、炔)基酯；酚吡咯芬硝酸酯(α-甲基-3-酚基-苯乙酸硝氧基烷(烯、炔)基酯；吡丙芬硝酸酯(3-氯-4-(3-吡咯啉-1-基)氫化阿托酸硝氧基烷(烯、炔)基酯)；雙氯滅痛硝氧基(烯、炔)基酯；氟比洛芬硝酸酯(α-甲基-3氟-4-苯基-苯乙酸硝氧基烯(炔)基酯)；和酮洛芬硝酸酯(α-甲基-3-苯甲酮基-苯乙酸硝氧基烯(炔)基酯)。
全文摘要
本發(fā)明的內(nèi)容為一組非類固醇類抗炎藥物(NSAID)分子上含有能釋放一氧化氮(NO)的新化合物，即這類藥物的硝酸酯。這類NSAID包括阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、吡丙芬、酚吡丙芬、氟比洛芬、酮洛芬和雙氯滅痛。NSAID廣泛用于解熱、鎮(zhèn)痛和消炎以及心腦血管疾病的預(yù)防和治療。新的NSAID硝酸酯類化合物，在體內(nèi)釋放一氧化氮，對(duì)抗NSAID本身引起的消化道副作用，具有更好的安全性和更廣泛的用途。
文檔編號(hào)A61K31/215GK1144092SQ9510979
公開日1997年3月5日 申請(qǐng)日期1995年8月25日 優(yōu)先權(quán)日1995年8月25日
發(fā)明者蔡雄, 錢長(zhǎng)庚 申請(qǐng)人:蔡雄, 錢長(zhǎng)庚